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辽宁新品系绒山羊DCN等基因生物学特性的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 引言第10-21页
   ·影响绒毛生长的因素第11-12页
     ·环境因素对绒毛生长的影响第11页
     ·营养对绒毛生长的影响第11页
     ·激素对绒毛生长的影响第11-12页
   ·褪黑激素的生理功能第12-15页
     ·调节生物节律与睡眠第12页
     ·调节生长与繁殖第12-13页
     ·增强免疫抗衰老第13页
     ·褪黑激素促进绒毛生长的作用机制的研究第13-14页
     ·褪黑激素对绒山羊绒毛生长相关基因的影响第14-15页
   ·Real-time PCR 实验技术介绍及其相关进展第15-18页
     ·荧光定量 PCR 的原理及特点第15-16页
     ·荧光定量 PCR 分类第16-17页
     ·Real-time PCR 技术第17-18页
   ·辽宁新品系绒山羊新基因生物学特性的研究进展第18-21页
     ·核心蛋白聚糖前体(Decorin)基因功能及研究进展第18页
     ·GMPR2 功能及研究进展第18-19页
     ·OCIAD2 基因功能及研究进展第19页
     ·UMP/CMP 激酶基因功能及其研究进展第19-21页
第二章 褪黑激素对辽宁新品系绒山羊皮肤细胞中 GMP 还原酶 2、核心蛋白聚糖和OCIAD2 三个新基因的表达影响第21-40页
   ·实验材料与方法第21-25页
     ·羊耳成纤维细胞的培养第21-22页
     ·细胞中总 RNA 的提取第22-23页
     ·反转录反应第23页
     ·荧光定量 PCR第23-25页
   ·实验结果第25-38页
     ·RNA 提取第25页
     ·Real Time PCR第25-38页
   ·结果讨论第38-40页
第三章 辽宁新品系绒山羊 UMP/CMP 激酶新基因的表达及分析第40-52页
   ·材料第40页
     ·样品第40页
     ·PCR 引物第40页
     ·试剂及主要仪器第40页
   ·实验方法第40-42页
     ·生物信息学分析第40-41页
     ·半定量 RT-PCR 检测第41-42页
   ·实验结果第42-50页
     ·UMP/CMP 激酶基因的全长序列及生物信息学分析第42-49页
     ·半定量 PCR第49-50页
   ·讨论第50-52页
第四章 辽宁新品系绒山羊 KAP26.1 基因蛋白表达、纯化及抗体制备第52-81页
     ·实验材料第52-57页
     ·样本采集第52页
     ·实验器材第52-53页
     ·实验耗材及试剂第53-57页
   ·实验方法第57-69页
     ·信息学分析第57页
     ·提取 RNA第57-58页
     ·反转录为 cDNA第58-59页
     ·PCR 反应第59-60页
     ·产物纯化第60-61页
     ·连接反应第61页
     ·转化反应第61-62页
     ·筛选后 PCR第62页
     ·提取质粒第62-63页
     ·酶切反应第63页
     ·连接反应第63-64页
     ·转化反应第64页
     ·诱导条件第64页
     ·SDS-PAGE 电泳第64-65页
     ·重组蛋白可溶性检测第65页
     ·大量诱导第65-66页
     ·重组蛋白纯化第66页
     ·透析第66-67页
     ·免疫动物第67-68页
     ·抗血清效价检测第68页
     ·提纯抗体第68页
     ·抗体效价检测第68页
     ·抗体特异性检测第68-69页
   ·实验结果第69-79页
     ·辽宁新品系绒山羊 KAP26.1 基因的克隆第69-71页
     ·提取 RNA第71-74页
     ·K26.1 原核表达及纯化结果第74-76页
     ·兔抗 KAP26.1 多克隆抗体纯化及鉴定结果第76-79页
   ·结果讨论第79-81页
     ·原核表达载体及宿主的选择第79页
     ·目的基因片段的选择、克隆及载体构建第79页
     ·多克隆抗体的制备第79-81页
第五章 结论第81-83页
参考文献第83-89页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第89-90页
致谢第90页

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