致谢 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-46页 |
第一节 免疫系统概述 | 第17-18页 |
第二节 免疫系统的发生与发育 | 第18-38页 |
一、造血细胞的发生 | 第18-32页 |
二、免疫细胞的发育 | 第32-34页 |
三、免疫系统的成熟 | 第34-38页 |
第三节 母源免疫及其传代效应 | 第38-43页 |
一、母源免疫的发现 | 第38-39页 |
二、母源免疫分子的主要类型 | 第39-41页 |
三、母源免疫的传递机制 | 第41页 |
四、母源免疫的传代效应 | 第41-43页 |
第四节 软体动物免疫系统发生及母源免疫的研究进展 | 第43-44页 |
一、软体动物免疫系统的发生 | 第43页 |
二、软体动物具有母源免疫的若干证据 | 第43-44页 |
第五节 本研究目的及意义 | 第44-46页 |
第二章 实验材料与方法 | 第46-77页 |
第一节 实验材料 | 第46-54页 |
一、实验动物及菌株 | 第46页 |
二、试剂耗材 | 第46-53页 |
三、仪器设备 | 第53-54页 |
第二节 实验方法 | 第54-77页 |
一、栉孔扇贝组织总 RNA制备 | 第54-55页 |
二、栉孔扇贝 cDNA模板第一链的合成 | 第55页 |
三、靶基因同源克隆 | 第55-56页 |
四、RACE 扩增靶基因 cDNA序列全长 | 第56页 |
五、PCR产物回收 | 第56页 |
六、PCR产物连接、转化、测序 | 第56-57页 |
七、靶基因序列的生物信息学分析 | 第57-58页 |
八、蛋白的原核重组表达和纯化 | 第58-61页 |
九、多克隆抗体制备 | 第61-62页 |
十、重组蛋白 DNA结合活性分析 | 第62-64页 |
十一、栉孔扇贝鳗弧菌注射刺激实验 | 第64页 |
十二、栉孔扇贝 RNA 干扰实验 | 第64-66页 |
十三、栉孔扇贝 RNA 干扰条件下 LPS刺激实验 | 第66-67页 |
十四、栉孔扇贝个体发育实验 | 第67-68页 |
十五、栉孔扇贝母源免疫刺激实验 | 第68-69页 |
十六、循环血细胞计数 | 第69-70页 |
十七、新生细胞 BrdU增殖检测 | 第70-71页 |
十八、荧光实时定量 PCR检测 | 第71页 |
十九、半定量 PCR检测 | 第71-72页 |
二十、蛋白免疫印迹检测 | 第72-73页 |
二十一、胚胎整体免疫荧光定位 | 第73-74页 |
二十二、总蛋白提取 | 第74页 |
二十三、菌凝集实验 | 第74-75页 |
二十四、菌损伤实验 | 第75页 |
二十五、抗菌活力测定 | 第75-76页 |
二十六、Cu/Zn-SOD活力测定 | 第76-77页 |
第三章 实验结果 | 第77-121页 |
第一节 栉孔扇贝造血相关转录因子的鉴定及功能分析 | 第77-100页 |
一、栉孔扇贝 CfRunt、CfCBFβ和 CfGATA基因的克隆 | 第77页 |
二、栉孔扇贝 CfRunt、CfCBFβ和 CfGATA基因的分子特征 | 第77-88页 |
三、栉孔扇贝 CfRunt、CfCBFβ和 CfGATA 的蛋白重组和功能分析 | 第88-92页 |
四、栉孔扇贝 CfRunt、CfCBFβ和 CfGATA mRNA的组织分布 | 第92-93页 |
五、鳗弧菌刺激对扇贝循环血细胞数量和造血相关转录因子 mRNA 表达的影响 | 第93-95页 |
六、栉孔扇贝 CfRunt 和 CfGATA基因干扰对血细胞生成的影响 | 第95-100页 |
第二节 造血相关转录因子在栉孔扇贝早期个体发生过程中的表达模式 | 第100-107页 |
一、栉孔扇贝早期个体发生过程中造血相关转录因子的基因表达 | 第100-101页 |
二、栉孔扇贝不同发育时期造血相关转录因子的整体免疫荧光定位 | 第101-104页 |
三、菌刺激对栉孔扇贝不同幼虫时期造血相关转录因子基因表达的影响 | 第104-107页 |
第三节 免疫分子在栉孔扇贝早期个体发生过程中的表达模式 | 第107-115页 |
一、栉孔扇贝早期个体发生过程中免疫分子的基因表达 | 第107-108页 |
二、栉孔扇贝不同幼虫时期免疫分子的整体免疫荧光定位 | 第108-112页 |
三、菌刺激对栉孔扇贝不同幼虫时期免疫分子基因表达的影响 | 第112-115页 |
第四节 栉孔扇贝母源免疫及其对子代的保护作用 | 第115-121页 |
一、栉孔扇贝卵细胞中重要免疫分子的表达 | 第115页 |
二、栉孔扇贝卵细胞的对细菌和真菌的凝集和损伤作用 | 第115-116页 |
三、母源免疫刺激对栉孔扇贝子代免疫分子表达及免疫力的影响 | 第116-120页 |
四、母源免疫刺激对栉孔扇贝子代鳗弧菌感染的保护作用 | 第120-121页 |
第四章 讨论 | 第121-136页 |
第一节 栉孔扇贝 CfRunt、CfCBFβ和 CfGATA 在血细胞生成中的作用 | 第121-126页 |
第二节 栉孔扇贝免疫系统发生与发育过程 | 第126-133页 |
一、栉孔扇贝血细胞的早期发生过程 | 第126-129页 |
二、栉孔扇贝免疫系统的发育过程 | 第129-133页 |
第三节 栉孔扇贝母源免疫及其传代保护效应 | 第133-136页 |
第五章 结论 | 第136-138页 |
参考文献 | 第138-174页 |
附录 | 第174-183页 |
作者简介 | 第183-184页 |
博士期间发表和完成的论文及研究成果 | 第184-185页 |