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镉、铜分别胁迫虾夷扇贝的毒性作用机制研究

致谢第1-5页
摘要第5-8页
ABSTRACT第8-17页
第一章 文献综述第17-45页
 第一节 虾夷扇贝及其养殖概况第17-18页
  一、 虾夷扇贝生物学习性第17页
  二、 国内外养殖概况第17-18页
 第二节 主要海洋污染物及其研究进展第18-21页
  一、 重金属污染物第18-19页
  二、 持久性有机污染物第19-21页
 第三节 镉、铜对双壳类动物的毒作用机制第21-34页
  一、 镉、铜在双壳贝类的体组织累积规律第22-24页
  二、 镉、铜对双壳贝类的氧化损伤及抗氧化防御机制第24-30页
   1. 氧化损伤第24-28页
   2. 抗氧化防御系统第28-30页
  三、 镉、铜对双壳贝类免疫系统的作用第30-34页
   1. 贝类免疫防御机制概述第30-33页
   2. 镉、铜对贝类的免疫损伤研究第33-34页
 第四节 深度测序技术的研究现状及其应用第34-44页
  一、 新一代测序技术第34-38页
   1. 测序技术的发展历史第34页
   2. DNA测序技术原理及其比较第34-37页
   3. 测序技术发展前景第37-38页
  二、 转录组测序技术及其在非模式生物研究中的应用第38-44页
   1. 转录组分析技术平台第38-41页
   2. 转录组分析(RNA-Seq)数据处理流程第41-43页
   3. 转录组测序技术在非模式动物中的研究应用第43-44页
 第五节 本研究的目的及意义第44-45页
第二章 镉、铜在虾夷扇贝鳃、消化腺组织的累积规律第45-51页
 第一节 材料与方法第45-46页
  一、 实验材料及设备第45页
  二、 实验方法第45-46页
   1. 养殖胁迫实验第45-46页
   2. 镉、铜在虾夷扇贝鳃、消化腺组织中含量的测定第46页
 第二节 镉在虾夷扇贝鳃、消化腺组织的累积规律第46-48页
  一、 实验结果第46-47页
  二、 讨论与分析第47-48页
 第三节 铜在虾夷扇贝鳃、消化腺组织的累积规律第48-51页
  一、 实验结果第48-49页
  二、 讨论与分析第49-51页
第三章 镉、铜对虾夷扇贝抗氧化防御系统的影响第51-64页
 第一节 材料与方法第51-54页
  一、 实验材料与设备第51页
  二、 实验方法第51-54页
   1. 胁迫实验方法第51页
   2. 样品采集第51页
   3. 总超氧化物歧化酶活力的测定第51-52页
   4. 过氧化氢酶活力测定第52-53页
   5. 谷胱甘肽过氧化物酶活力测定第53-54页
   6. 数据统计分析第54页
 第二节 镉对虾夷扇贝抗氧化防御系统的影响第54-59页
  一、 实验结果第54-56页
   1. 镉对虾夷扇贝鳃、消化腺SOD活性的影响第54页
   2. 镉对虾夷扇贝鳃、消化腺CAT活性的影响第54-55页
   3. 镉对虾夷扇贝鳃、消化腺GPx活性影响第55-56页
  二、 讨论与分析第56-59页
 第三节 铜对虾夷扇贝抗氧化防御系统的影响第59-64页
  一、 实验结果第59-62页
   1. 铜对虾夷扇贝鳃、消化腺SOD活性的影响第59页
   2. 铜对虾夷扇贝鳃、消化腺CAT活性的影响第59页
   3. 铜对虾夷扇贝鳃、消化腺GPx活性的影响第59-62页
  二、 讨论与分析第62-64页
第四章 虾夷扇贝转录组测序第64-76页
 第一节 材料与方法第64-68页
  一、 主要化学试剂、溶液配方第64页
  二、 主要仪器设备第64页
  三、 实验方法第64-68页
   1. 样本采集第64页
   2. 总RNA提取第64-65页
   3. 转录组测序及数据分析第65-68页
 第二节 结果与讨论第68-76页
  一、 双末端测序和读段的拼接第68-69页
  二、 预测蛋白基因注释第69-72页
   1. GO注释第70页
   2. KOG注释第70-71页
   3. KEGG注释第71-72页
  三、 环境胁迫、免疫相关基因分析第72-76页
第五章 镉胁迫条件下虾夷扇贝鳃、消化腺基因表达谱分析第76-95页
 第一节 材料与方法第76-81页
  一、 实验材料及仪器设备第76页
  二、 表达谱测序及数据分析第76-79页
   1. mRNA样本的纯化第76页
   2. cDNA文库的构建第76页
   3. 高通量测序第76-77页
   4. 数据分析第77-79页
  三、 荧光实时定量PCR(Realtime-PCR)验证第79-81页
 第二节 结果与讨论第81-95页
  一、 测序数据分析第81页
  二、 镉胁迫条件下虾夷扇贝鳃、消化腺基因表达差异第81-84页
  三、 差异表达基因代谢通路富集性分析第84-94页
  四、 差异表达基因的RT-PCR验证第94-95页
第六章 铜胁迫条件下虾夷扇贝鳃、消化腺基因表达谱分析第95-119页
 第一节 材料与方法第95页
  一、 实验材料及主要设备第95页
  二、 表达谱测序及数据分析第95页
  三、 荧光实时定量PCR(Realtime-PCR)验证第95页
 第二节 结果与讨论第95-119页
  一、 测序数据分析第95-96页
  二、 铜胁迫条件下虾夷扇贝鳃、消化腺基因表达差异第96-98页
  三、 差异表达基因GO富集性分析第98-111页
  四、 差异表达基因信号通路富集分析及免疫相关基因表达第111-115页
   1. 模式识别受体(PRRs)第113-114页
   2. 细胞凋亡(Apoptosis)第114页
   3. 溶酶体(lysosome)和C型凝集素(C-type lectin)第114-115页
  五、 差异表达基因的RT-PCR验证第115-119页
主要结论、创新性及研究展望第119-121页
参考文献第121-139页
博士期间发表论文和专利情况第139页

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