| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 第一部分 TIPE2 基因过表达载体的构建及对 Jurkat 细胞的影响 | 第16-42页 |
| ·前言 | 第16页 |
| ·材料 | 第16-21页 |
| ·主要试剂 | 第16-17页 |
| ·仪器设备 | 第17-18页 |
| ·主要溶剂的配制 | 第18-21页 |
| ·方法 | 第21-32页 |
| ·引物设计 | 第21-22页 |
| ·感受态的制备 | 第22-23页 |
| ·TIPE2 过表达载体的构建 | 第23-26页 |
| ·细胞培养及对重组质粒的转染 | 第26-27页 |
| ·mRNA 的提取及 cDNA 的反转录 | 第27-28页 |
| ·蛋白的提取及 BCA 测蛋白浓度 | 第28-29页 |
| ·免疫印迹杂交 | 第29-30页 |
| ·生长曲线 | 第30页 |
| ·细胞分化 | 第30-31页 |
| ·流式细胞仪测细胞周期 | 第31页 |
| ·流式细胞仪测细胞凋亡 | 第31-32页 |
| ·Transwell 小室细胞测细胞迁移 | 第32页 |
| ·统计学分析方法 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-39页 |
| ·TIPE2 基因 CDS 区的扩增 | 第32-33页 |
| ·TIPE2 CDS 区 PCR 产物与 pcDNA3.1(-)载体连接的测序结果 | 第33-34页 |
| ·TIPE2 基因过表达 PCR 和免疫印迹的验证 | 第34页 |
| ·TIPE2 基因过表达后对 TNFAIP8 家族其他成员的影响 | 第34-35页 |
| ·TIPE2 基因过表达后对 Jurkat 细胞生长的影响 | 第35页 |
| ·TIPE2 基因过表达后对 Jurkat 细胞周期的影响 | 第35-36页 |
| ·TIPE2 基因过表达后对 Jurkat 细胞凋亡的影响 | 第36-37页 |
| ·TIPE2 基因对 Jurkat 分化的影响 | 第37页 |
| ·TIPE2 基因对 Jurkat 细胞迁移的影响 | 第37-38页 |
| ·TIPE2 基因过表达后对一些蛋白的影响 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| 第二部分 PCNP 基因沉默载体和过表达载体的构建及其对 Jurkat 细胞的影响 | 第42-56页 |
| ·前言 | 第42页 |
| ·材料及试剂 | 第42-43页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·仪器设备 | 第43页 |
| ·主要溶液的配制 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·基因沉默功能序列和过表达序列的设计与合成 | 第43-44页 |
| ·PCNP 基因沉默载体的构建 | 第44-45页 |
| ·PCNP 过表达载体的构建 | 第45页 |
| ·细胞的培养及对沉默和过表达重组质粒的转染 | 第45页 |
| ·mRNA 的提取及反转录成 cDNA | 第45页 |
| ·蛋白的提取及 BCA 测蛋白浓度 | 第45页 |
| ·免疫印迹杂交 | 第45页 |
| ·生长曲线 | 第45-46页 |
| ·细胞的分化 | 第46页 |
| ·细胞的凋亡 | 第46页 |
| ·细胞周期 | 第46页 |
| ·细胞的迁移 | 第46页 |
| ·统计学分析方法 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-53页 |
| ·PCNP 基因 CDS 区的扩增 | 第46-47页 |
| ·PCNP 基因沉默和过表达重组质粒的测序结果 | 第47-48页 |
| ·PCNP 基因沉默和过表达免疫印迹的验证 | 第48页 |
| ·PCNP 基因沉默和过表达后对 Jurkat 细胞生长的影响 | 第48页 |
| ·流式细胞仪检测 PCNP 基因沉默和过表达后对细胞周期的影响 | 第48-49页 |
| ·PCNP 基因沉默和过表达后对细胞周期相关蛋白的影响 | 第49-50页 |
| ·PCNP 基因沉默和过表达对细胞凋亡的影响 | 第50-51页 |
| ·PCNP 沉默和过表达后对细胞分化的影响 | 第51页 |
| ·PCNP 沉默和过表达后对细胞迁移的影响 | 第51-52页 |
| ·PCNP 对一些蛋白的影响 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-56页 |
| 第三部分 JNK1-DN 和 JNK1 过表达后对 Jurkat 细胞生物学功能的影响 | 第56-64页 |
| ·前言 | 第56页 |
| ·材料及试剂 | 第56-57页 |
| ·主要试剂 | 第56页 |
| ·仪器设备 | 第56-57页 |
| ·主要溶液的配制 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-58页 |
| ·引物序列 | 第57页 |
| ·JNK1 基因沉默和过表达载体的来源 | 第57页 |
| ·细胞的培养及对沉默和过表达重组质粒的转染 | 第57页 |
| ·mRNA 的提取及反转录成 cDNA | 第57页 |
| ·蛋白的提取及 BCA 测蛋白浓度 | 第57页 |
| ·免疫印迹杂交 | 第57页 |
| ·生长曲线 | 第57页 |
| ·细胞的分化 | 第57-58页 |
| ·细胞的凋亡 | 第58页 |
| ·细胞周期 | 第58页 |
| ·细胞的迁移 | 第58页 |
| ·统计学分析方法 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-62页 |
| ·JNK1-DN 和 JNK1 过表达重组质粒的验证 | 第58页 |
| ·JNK1-DN 和 JNK1 过表达后对细胞生长的影响 | 第58-59页 |
| ·流式细胞仪检测 JNK1-DN 和 JNK1 过表达后对细胞周期的影响 | 第59页 |
| ·流式细胞仪检测 JNK1-DN 和 JNK1 过表达后对细胞凋亡的影响 | 第59-60页 |
| ·JNK1-DN 和 JNK1 过表达后对细胞分化的影响 | 第60-61页 |
| ·JNK1-DN 和 JNK1 过表达后对细胞迁移的影响 | 第61-62页 |
| ·JNK1-DN 和 JNK1 过表达后对一些蛋白的影响 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 文献综述 | 第68-80页 |
| 参考文献 | 第76-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
| 在读期间参加的学术会议及获奖情况 | 第82-83页 |
