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印度洋表层海水石油降解菌及其烷烃羟化酶AlkB的多样性分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-24页
   ·海洋石油污染及其生物修复第11-14页
     ·石油简介第11-12页
     ·海洋石油污染第12-13页
     ·海洋石油污染的处理第13-14页
   ·微生物分子生态学的研究方法第14-19页
     ·基于纯培养技术的微生物分子生态学研究第14-15页
     ·基于PCR技术的微生物分子生态学研究第15-16页
     ·基于核酸探针杂交技术的微生物分子生态学研究第16-17页
     ·基于生物标志物检测方法的微生物分子生态学研究第17页
     ·微生物分子生态学研究的新进展第17-19页
   ·海洋中细菌降解石油污染的研究进展第19-23页
     ·降解石油的细菌种类第19-21页
     ·细菌降解石油的作用机制第21-22页
     ·烷烃羟化酶研究的进展第22-23页
   ·本试验的研究目的和意义第23-24页
2 材料与方法第24-37页
   ·材料第24-27页
     ·样品来源第24-25页
     ·药品和试剂第25页
     ·分子生物学试剂和试剂盒第25-26页
     ·主要仪器第26页
     ·常用培养基和溶液第26页
     ·引物第26-27页
     ·分析软件第27页
   ·试验方法第27-28页
     ·石油降解菌群和单菌基因组DNA的提取第27页
     ·PCR反应第27-28页
     ·DNA片段的回收第28页
     ·PCR产物的纯化第28页
     ·感受态细胞E. coli DH5α的制备第28页
     ·DNA的连接、转化和克隆子的检测第28页
     ·石油降解率的测定方法第28页
   ·印度洋表层海水可培养石油降解菌的多样性分析第28-30页
     ·石油降解菌群的富集第28-29页
     ·石油降解菌的分离鉴定第29页
     ·单菌和菌群对石油降解能力的测定第29页
     ·细菌16S rRNA基因的鉴定和系统发育分析第29-30页
     ·酵母ITS区序列的分离和鉴定第30页
   ·基于454焦磷酸测序技术的石油降解菌的多样性分析第30-35页
     ·石油降解菌菌群16S rRNA基因的454焦磷酸测序第30-31页
     ·454焦碟酸测序的原始数据分析第31页
     ·454焦磷酸测序数据的基础分析第31-34页
     ·454焦磷酸测序数据的高级分析第34-35页
   ·石油降解菌群中烷烃羟化酶(AlkB)的多样性分析第35-37页
     ·烷烃羟化酶alkB基因片段的扩增第35页
     ·基于OPUs的烷烃羟化酶AlkB的多样性分析第35-37页
3 结果与分析第37-67页
   ·印度洋表层海水石油降解菌群可培养菌的分离鉴定和降解率的测定第37-44页
     ·可培养细菌的分离鉴定和多样性分析第37-42页
     ·可培养酵母的分离鉴定和多样性分析第42页
     ·单菌和菌群的降解率测定第42-44页
   ·454焦磷酸测序对印度洋表层海水石油降解菌群多样性分析第44-60页
     ·OTU的聚类分析第44-48页
     ·石油降解菌群的α和β多样性分析第48-50页
     ·石油降解菌群的454焦磷酸测序的稀释曲线第50-51页
     ·12个石油降解菌群的比较分析第51-55页
     ·12个石油降解菌群相似度树状图和Heatmap图第55-59页
     ·12个石油降解菌群主成分分析第59-60页
   ·印度洋表层海水石油降解菌群中烷烃羟化酶alkB基因的多样性分析第60-67页
     ·烷烃羟化酶AlkB的α多样性分析第60-61页
     ·烷烃羟化酶AlkB的稀释曲线第61-62页
     ·12个石油降解菌群烷烃羟化酶AlkB代表OPU分类第62页
     ·12个石油降解菌群烷烃羟化酶AlkB代表OPU分布第62-63页
     ·12个石油降解菌群烷烃羟化酶AlkB的系统发育分析第63-65页
     ·11个OPU代表序列烷烃羟化酶AlkB氨基酸的保守区域分析第65-67页
4 讨论第67-75页
   ·可培养石油降解菌的多样性特征第67-68页
   ·基于454焦磷酸高通量测序的石油降解菌多样性分析第68-69页
   ·单菌和菌群的降解试验第69-71页
   ·石油降解酵母菌第71-72页
   ·烷烃羟化酶的多样性分析第72-75页
5 小结与展望第75-76页
参考文献第76-85页
附录第85-86页
致谢第86页

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