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青天葵转录组特征研究

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
引言第15-19页
 1 研究背景第15页
 2 本研究工作的总体思路、主要研究方法和预期成果第15-17页
 参考文献第17-19页
第一章 文献综述第19-44页
   ·中药DNA条形码研究进展第19-21页
   ·转录组及其在药用植物中应用第21-26页
   ·植物器官大小调控基因研究进展第26-34页
  附表第32-34页
 参考文献第34-44页
第二章 基于DNA条形码的青天葵真伪鉴别第44-70页
   ·青天葵与常见混伪品的鉴别第44-60页
     ·材料与试剂第44-45页
       ·植物材料第44页
       ·试剂第44-45页
       ·仪器第45页
     ·方法第45-46页
       ·DNA提取第45-46页
       ·PCR扩增与测序第46页
       ·序列分析第46页
     ·结果与分析第46-59页
       ·PCR与测序成功率第46-47页
       ·序列变异分析第47-52页
       ·遗传距离分析第52-56页
       ·聚类分析第56-57页
       ·ITS2序列二级结构比较第57-59页
     ·讨论第59-60页
   ·青天葵与同属近缘品的鉴别第60-68页
     ·材料与试剂第60页
       ·实验材料第60页
       ·试剂与仪器第60页
     ·方法第60-63页
       ·DNA提取、PCR扩增和测序第60-63页
       ·数据分析第63页
         ·序列处理与提交第63页
         ·不同候选序列的序列变异分析第63页
         ·Wilcoxon秩合检验第63页
         ·Barcoding gap评估第63页
         ·鉴定成功率评价第63页
         ·遗传关系分析第63页
     ·结果与分析第63-67页
       ·扩增和测序成功率第63-64页
       ·种间和种内变异分析第64-65页
       ·barcoding gap评价第65-66页
       ·鉴定效率评价第66页
       ·基于;WC7/尺序列的亲缘关系分析第66-67页
     ·讨论第67-68页
   ·小结第68页
 参考文献第68-70页
第三章 青天葵转录组学研究第70-97页
   ·植物材料第70页
   ·方法第70-73页
     ·RNA提取第70页
     ·cDNA文库的建立和测序第70-71页
     ·序列组装第71-72页
     ·基因注释和挖掘第72-73页
     ·基因表达量计算第73页
   ·结果与分析第73-95页
     ·RNA提取第73-74页
     ·产量统计、序列组装、基因注释第74-77页
     ·SSR分析第77-78页
     ·基因注释和分类第78-81页
     ·代谢途径分析第81-83页
     ·基因差异表达分析第83-85页
     ·基因挖掘第85-87页
       ·次生代谢产物生源途径相关基因第85-86页
       ·生理功能过程相关基因第86-87页
  附表第87-95页
   ·讨论第95页
   ·小结第95-96页
 参考文献第96-97页
第四章 青天葵转录组的验证—器官生长调控基因NfEBP1的克隆与分析第97-132页
   ·材料与试药第97-99页
     ·植物材料第97页
     ·引物第97页
     ·菌种与载体第97-98页
     ·分子生物学试剂第98页
     ·其他相关试剂配制第98-99页
     ·测序第99页
     ·主要仪器第99页
   ·方法第99-111页
     ·NfEBPl的克隆第99-107页
       ·青天葵叶片总RNA提取第99-100页
       ·引物设计第100页
       ·5'-RACE第100-104页
       ·3'-RACE第104-106页
       ·cDNA全序列的拼接第106页
       ·NfEBP1编码区的克隆第106-107页
       ·序列提交第107页
       ·基因编码蛋白的分析第107页
     ·NfEBP1在青天葵不同组织的表达分析第107-111页
       ·青天葵不同组织的RNA提取第107-108页
       ·反转录PCR第108页
       ·引物设计第108-109页
       ·内参基因核心片段的普通PCR扩增第109-110页
       ·内参基因扩增效率的检测第110页
       ·内参基因的稳定性评价第110页
       ·目的基因NfEBP1在青天葵不同组织的相对表达量分析第110-111页
   ·结果与分析第111-128页
     ·N-BP1的克隆第111-122页
       ·RNA提取效果第111页
       ·Unigene片段的筛选第111页
       ·NfEBP1的5’RACE克隆第111-114页
       ·NfEBP1的3’RACE克隆第114-117页
       ·NfEBP1的全长的拼接第117-118页
       ·NfEBP1编码区的克隆及编码蛋白分析第118-122页
     ·NfEBP1在青天葵不同组织中的表达分析第122-128页
       ·青天葵组织总RNA提取第122-123页
       ·内参基因的普通PCR扩增第123页
       ·内参基因的扩增效率和特异性第123-125页
       ·内参基因的实时定量PCR分析第125-126页
       ·内参基因的稳定性评价第126-127页
       ·NfEBP1在青天葵不同组织的表达分析第127-128页
   ·讨论第128-130页
     ·NfEBP1的克隆与表达第128-129页
     ·青天葵实时荧光定量PCR内参基因的选择第129-130页
   ·小结第130页
 参考文献第130-132页
第五章 结论与展望第132-134页
   ·结论第132-133页
   ·展望第133-134页
附录第134-165页
 附录1 青天葵KEGG代谢途径及基因差异第134-151页
 附录2 NJEBP1-5’564 BLASTN结果第151-153页
 附录3 NfEBP1-3’807 BLASTN结果第153-155页
 附录4 NfEBP1编码区序列BLASTN结果第155-157页
 附录5 NfEBP1氨基酸序列BLASTP结果第157-159页
 附录6 NfEBP1亚细胞定位分析结果第159-160页
 附录7 英文缩略词表第160-161页
 附录8 图片目录第161-163页
 附录9 表格目录第163-165页
研究生在学期间参与课题情况第165-166页
研究生在学期间发表论文及著作第166-168页
研究生在学期间获得的奖励和资助第168-169页
致谢第169-170页
统计学证明第170页

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