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褪黑激素影响山羊绒生长的分子机理

摘要第1-6页
Abstract第6-18页
1 引言第18-40页
   ·绒山羊概况第18-19页
     ·绒山羊品种分类第18页
     ·中国绒山羊及其绒毛特征第18页
     ·内蒙古绒山羊及其绒毛生产性能第18-19页
   ·绒毛生长规律第19-25页
     ·毛囊结构及其周期中的变化第19-22页
     ·皮肤结构及其变化第22-23页
     ·毛囊周期性生长规律第23-25页
   ·褪黑激素(Melatonin,MT)的作用第25-29页
     ·MT对绒毛生长性能的影响第26页
     ·MT对毛囊周期的影响第26页
     ·MT对繁殖性能的影响第26-28页
     ·MT对绒毛相关基因的影响第28-29页
   ·绒毛生长相关基因的研究第29-39页
     ·BMP2基因及其受体基因的研究第29-30页
     ·WNT家族的研究第30-32页
     ·PDGFA及其受体基因的研究第32-34页
     ·转化生长因子β及其受体的研究第34-35页
     ·Notch信号通路的研究第35-36页
     ·Bcl-2(B-cell lymphoma-2)基因的研究第36-37页
     ·SOX21基因的研究第37页
     ·BMP4基因的研究第37-38页
     ·Noggin基因的研究第38-39页
   ·研究目的和意义第39-40页
2 本研究整体路线第40-41页
3 研究一:外源MT对绒山羊绒毛生长特性及绒毛品质特征性状的影响第41-60页
   ·试验材料第41-42页
     ·试验时间和地点第41页
     ·试验动物第41页
     ·绒毛样品的采集第41-42页
   ·绒毛样品的测定第42页
   ·数据统计分析第42页
   ·结果与分析第42-55页
     ·羊毛长度第42-45页
     ·羊毛细度第45-47页
     ·羊绒长度第47-49页
     ·羊绒细度第49-52页
     ·绒毛比第52-55页
   ·讨论第55-59页
   ·结论第59-60页
4 研究二:外源MT对抓绒时绒毛生产性能及其它性能的的影响第60-68页
   ·试验材料第60页
     ·试验时间,地点第60页
     ·试验动物第60页
   ·绒毛样品的测定第60页
   ·数据统计分析第60-61页
   ·结果与分析第61-66页
     ·外源MT对内蒙古绒山羊产绒量的影响第61-62页
     ·外源MT对内蒙古绒山羊抓绒时绒长度的影响第62-63页
     ·外源MT对内蒙古绒山羊抓绒时绒细度的影响第63-64页
     ·外源MT对内蒙古绒山羊绒厚度的影响第64-65页
     ·外源MT对内蒙古绒山羊抓绒时粗毛自然长度的影响第65-66页
     ·外源MT对内蒙古绒山羊产羔性能的影响第66页
   ·讨论第66-68页
   ·结论第68页
5 研究三:内蒙古成年绒山羊皮肤中绒毛生长相关基因的表达量第68-119页
   ·试验材料第68-69页
     ·试验时间和地点第68-69页
     ·试验动物第69页
   ·皮肤样品的采集第69页
   ·样品的处理第69-70页
     ·总RNA的提取第69页
     ·Total RNA纯化第69页
     ·Total RNA溶液OD值的测定第69-70页
     ·cDNA的合成第70页
   ·待测基因引物的选择第70-71页
   ·检测引物的准确性第71-74页
     ·待测基因引物的RT-PCR反应第71-72页
     ·RT-PCR产物琼脂糖凝胶回收第72-73页
     ·回收的RT-PCR产物与pGM-T载体的连接第73页
     ·DH5α感受态细胞的制备第73页
     ·连接产物转化到DH5α感受态细胞中第73页
     ·重组质粒的鉴定第73-74页
   ·荧光定量PCR第74页
     ·检测荧光定量PCR条件第74页
     ·检测试验羊皮肤样品中待测基因的表达量第74页
   ·数据分析方法第74页
   ·数据统计分析第74-75页
   ·结果与分析第75-106页
     ·内蒙古绒山羊皮肤样品总RNA提取第75页
     ·测序结果分析第75页
     ·荧光定量PCR标准样品的检测第75-76页
     ·荧光定量PCR产物的检测第76-77页
     ·绒毛生长相关基因在内蒙古成年绒山羊不同试验组皮肤组织当中的表达第77-99页
     ·绒毛生长相关基因表达量之间的相关性分析第99-106页
   ·讨论第106-117页
     ·WNT信号通路基因在不同试验组绒山羊皮肤组织当中的表达及埋植MT对其表达的影响第106-107页
     ·TGFB信号通路基因在不同试验组绒山羊皮肤组织当中的表达及埋植MT对其表达的影响第107-108页
     ·MT核受体基因在成年羊皮肤中的表达规律和外源MT对其表达量的影响第108-109页
     ·其它信号通路基因在不同试验组绒山羊皮肤组织当中的表达及埋植MT对其表达的影响第109-111页
     ·TGFβ信号通过WNT信号通路调节其它信号通路第111-112页
     ·毛囊生长期至休止期变化过程中皮肤毛囊生长相关基因在绒山羊皮肤组织中的表达量的变化第112-113页
     ·毛囊休止期皮肤相关基因的表达量的变化第113页
     ·毛囊生长期初期绒毛生长相关基因在绒山羊皮肤组织中表达量的变化第113-114页
     ·MT受体基因与Wnt10b和BMP2基因的表达第114页
     ·埋植MT影响毛囊生长周期相关基因之间的相关性第114-117页
   ·结论第117-119页
6 研究四:BMP2基因和WNT10B基因在内蒙古绒山羊皮肤毛囊组织的表达第119-143页
   ·材料与试剂第120-122页
     ·实验材料第120页
     ·主要仪器和设备第120页
     ·实验试剂的配置第120-122页
   ·实验方法第122-123页
     ·总RNA的提取第122页
     ·总RNA的纯化第122页
     ·RNA纯度及浓度检测第122页
     ·反转录第122页
     ·PCR扩增第122-123页
   ·cRNA核酸探针的制备第123-128页
     ·探针模板的制备第123-124页
     ·探针的体外转录第124-125页
     ·石蜡切片的制备第125页
     ·载玻片的处理第125-126页
     ·盖玻片的处理第126页
     ·切片第126页
     ·杂交前切片预处理第126页
     ·预杂交与杂交第126-127页
     ·杂交后洗片第127页
     ·免疫反应及检测第127-128页
   ·实验结果与分析第128-139页
     ·质粒DNA提取结果第128页
     ·探针模板的制备第128-129页
     ·探针的体外转录第129-130页
     ·DNA酶消化第130-131页
     ·BMP2和Wnt10b基因在内蒙古绒山羊皮肤毛囊组织上的原位杂交结果第131-139页
   ·讨论第139-142页
     ·埋植MT对周岁绒山羊整个生长期毛囊变化的影响第139-140页
     ·埋植MT对BMP2在内蒙古绒山羊皮肤毛囊上表达量的影响第140-141页
     ·埋植MT对Wnt10b在内蒙古绒山羊皮肤毛囊上表达量的影响第141-142页
   ·结论第142-143页
7 大总结第143-145页
致谢第145-147页
参考文献第147-166页
作者简介第166-167页

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