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亚治疗剂量四环素饲喂对牛源微生物耐药基因的影响

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 引言第10-28页
   ·亚治疗剂量抗生素在畜牧生产中的应用及其影响第10-13页
     ·抗生素在畜牧生产中的应用原则第10-11页
     ·抗生素在畜牧生产中的应用范围第11页
     ·亚治疗剂量抗生素的应用对微生物耐药性的影响第11-12页
     ·耐药微生物由家畜向人类传播的途径第12-13页
   ·肉牛生产系统中细菌耐药性的研究进展第13-14页
   ·细菌耐药性产生的遗传机制及作用机理第14-19页
     ·细菌耐药性产生的遗传机制第14-16页
     ·细菌耐药性作用机理第16-18页
     ·细菌的多重耐药机制第18-19页
   ·四环素耐药基因研究概况第19-27页
     ·四环素耐药基因分类第19-22页
     ·新发现菌种中四环素耐药基因的鉴定及流行第22-26页
     ·革兰氏阴性菌中四环素耐药基因的分布第26页
     ·四环素耐药基因的连接模式和可移动因子第26-27页
     ·四环素耐药基因研究展望第27页
   ·本研究的内容与意义第27-28页
2 不同四环素耐药基因型大肠杆菌对四环素类抗生素的耐药性分析第28-41页
   ·试验材料与方法第28-35页
     ·试验动物的饲养管理第28页
     ·试验动物的处理及样品采集第28-29页
     ·大肠杆菌的分离纯化及鉴定保种第29页
     ·纸片法药敏试验第29-30页
     ·四环素耐药基因检测第30-32页
     ·稀释法药敏试验第32-34页
     ·相对实时定量PCR试验第34页
     ·tet(C)基因克隆测序第34-35页
     ·质粒提取转化及其药敏试验鉴定第35页
   ·试验结果与分析第35-39页
     ·四环素耐药基因检测结果第35-36页
     ·稀释法药敏试验结果第36-37页
     ·tet(C)基因的表达分析结果第37-38页
     ·tet(C)基因测序结果第38页
     ·转化细菌药敏测试结果第38-39页
   ·讨论第39-40页
     ·抗生素类型对耐药基因流行的影响第39页
     ·大肠杆菌对各类四环素的耐药性与耐药基因之间的相关第39-40页
     ·关于tet(C)基因的两种基因型第40页
   ·小结第40-41页
3 四环素饲喂对肉牛肠道及咽部微生物耐药基因的影响第41-51页
   ·试验材料与方法第41-43页
     ·试验动物处理及采样方法第41页
     ·宏基因组DNA提取与浓度检测第41页
     ·耐药基因扩增第41-42页
     ·标准曲线的制作第42-43页
     ·绝对定量real-time PCR第43页
     ·数据统计分析第43页
   ·试验结果第43-49页
     ·宏基因组DNA提取结果第43-44页
     ·四环素处理与否对耐药基因数量的影响第44-47页
     ·四环素处理前后对耐药基因数量的影响第47-49页
   ·讨论第49-51页
     ·关于试验设计的讨论第49-50页
     ·关于耐药基因定量标准化的讨论第50页
     ·关于四环素耐药基因定量结果的讨论第50-51页
     ·关于磺胺耐药基因定量结果的讨论第51页
     ·关于红霉素耐药基因定量结果的讨论第51页
   ·小结第51页
4 肉牛废弃粪便中四环素耐药基因持久性的研究第51-59页
   ·试验材料与方法第51-54页
     ·试验动物处理第51-52页
     ·采样方法第52页
     ·四环素耐药基因的定量分析第52-54页
     ·数据统计分析第54页
   ·试验结果第54-57页
     ·16S-rRNA基因定量结果第54页
     ·四环素耐药基因定量结果第54-57页
   ·讨论第57-59页
   ·小结第59页
5 结论第59-61页
致谢第61-63页
参考文献第63-73页
作者简介第73页

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