| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-19页 |
| ·水生甲壳动物的离子转运与渗透压调节 | 第12-15页 |
| ·水生甲壳动物最主要的渗透压调节器官——鳃 | 第12-13页 |
| ·角质层 | 第12页 |
| ·鳃上皮 | 第12页 |
| ·氯细胞 | 第12-13页 |
| ·离子转运途径及其作用机制 | 第13-15页 |
| ·离子转运酶 | 第13-15页 |
| ·Na~+,K~+-ATPase | 第14页 |
| ·V-ATPase | 第14页 |
| ·碳酸酐酶（CA） | 第14页 |
| ·HCO3 | 第14-15页 |
| ·离子转运途径 | 第15页 |
| ·基底侧质膜的离子转运途径 | 第15页 |
| ·顶部质膜的离子转运途径 | 第15页 |
| ·Na~+,K~+-ATPase | 第15-16页 |
| ·Na~+,K~+-ATPase 的结构 | 第15-16页 |
| ·α亚基 | 第15-16页 |
| ·β亚基 | 第16页 |
| ·水生甲壳动物 Na~+,K~+-ATPase 研究进展 | 第16页 |
| ·ATP 酶活性测定技术 | 第16-17页 |
| ·Na~+,K~+-ATPase 酶活性测定原理 | 第16-17页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的原理 | 第17页 |
| ·免疫组织化学技术 | 第17-19页 |
| ·免疫组织化学技术的原理 | 第17页 |
| ·免疫组织化学技术的特点 | 第17-18页 |
| ·特异性强 | 第17页 |
| ·敏感性高 | 第17页 |
| ·定位准确 | 第17-18页 |
| ·免疫组织化学技术在细胞生物学中的应用 | 第18-19页 |
| 第二章 盐度胁迫对三疣梭子蟹各组织中 Na~+,K~+-ATPase mRNA 表达水平的影响 | 第19-28页 |
| ·实验材料与方法 | 第19-23页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·三疣梭子蟹的采集和驯化 | 第19页 |
| ·三疣梭子蟹实验预处理 | 第19页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第19-20页 |
| ·主要实验仪器 | 第19-20页 |
| ·主要实验试剂 | 第20页 |
| ·实验方法和步骤 | 第20-23页 |
| ·组织总 RNA 的提取 | 第20-21页 |
| ·实验器材的处理 | 第20页 |
| ·组织总 RNA 的提取步骤 | 第20-21页 |
| ·组织总 RNA 完整性分析 | 第21页 |
| ·合成反转录 cDNA 模板 | 第21-22页 |
| ·PCR 扩增 | 第22-23页 |
| ·内参基因的选择 | 第22页 |
| ·PCR 扩增最佳反应体系的摸索与建立 | 第22-23页 |
| ·半定量 RT-PCR 产物检测与分析 | 第23页 |
| ·实验结果及讨论 | 第23-28页 |
| ·三疣梭子蟹各组织总 RNA 完整性分析 | 第23页 |
| ·盐度胁迫对三疣梭子蟹各组织中 Na~+,K~+-ATPase mRNA 表达水平的影响 | 第23-26页 |
| ·Na~+,K~+-ATPase α亚基（NAKA）表达水平随胁迫盐度和胁迫时间的变化 | 第23-25页 |
| ·Na~+,K~+-ATPase β亚基（NAKB）表达水平随胁迫盐度和胁迫时间的变化 | 第25-26页 |
| ·讨论 | 第26-28页 |
| ·Na~+,K~+-ATPase mRNA 在各组织中的表达水平 | 第26页 |
| ·Na~+,K~+-ATPase mRNA 表达的调控机制 | 第26-28页 |
| 第三章 盐度胁迫对三疣梭子蟹鳃 Na~+,K~+-ATPase 酶活性的影响 | 第28-35页 |
| ·实验材料和方法 | 第28-31页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-31页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第28-29页 |
| ·实验试剂的配制 | 第28-29页 |
| ·实验步骤 | 第29页 |
| ·Na~+,K~+-ATPase 酶活性测定 | 第29-31页 |
| ·实验试剂的配制 | 第29-30页 |
| ·实验步骤 | 第30-31页 |
| ·实验计算和分析 | 第31页 |
| ·计算公式 | 第31页 |
| ·数据分析 | 第31页 |
| ·实验结果 | 第31-35页 |
| ·盐度胁迫 1d 时三疣梭子蟹各对鳃 Na~+,K~+-ATPase 酶活性的比较 | 第31-32页 |
| ·盐度胁迫对三疣梭子蟹第 2 和 6 对鳃 Na~+,K~+-ATPase 酶活性的影响 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| ·三疣梭子蟹各对鳃与离子转运和渗透调节的关系 | 第33-34页 |
| ·盐度胁迫对三疣梭子蟹鳃中 Na~+,K~+-ATPase 酶活性的影响 | 第34-35页 |
| 第四章 盐度胁迫对三疣梭子蟹鳃上皮氯细胞分布的影响 | 第35-42页 |
| ·实验材料和方法 | 第35-40页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-40页 |
| ·石蜡切片 | 第35-36页 |
| ·免疫组织化学分析 | 第36-38页 |
| ·抗体的选择 | 第36-37页 |
| ·免疫组织化学相关试剂的配制 | 第37页 |
| ·免疫组织化学分析步骤 | 第37-38页 |
| ·H.E.染色 | 第38-40页 |
| ·染液的配制 | 第38-39页 |
| ·苏木精染液 | 第38-39页 |
| ·伊红染液 | 第39页 |
| ·H.E.染色步骤 | 第39-40页 |
| ·实验结果及讨论 | 第40-42页 |
| ·免疫组织化学分析盐度胁迫对 Na~+,K~+-ATPase 活性的影响 | 第40页 |
| ·H.E.染色结果分析盐度胁迫对氯细胞形态结构的影响 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·免疫组织化学分析盐度胁迫对鳃组织氯细胞中 Na~+,K~+-ATPase 的影响 | 第41页 |
| ·H.E.染色结果分析盐度胁迫对鳃中氯细胞形态结构的影响 | 第41-42页 |
| 第五章 结论与展望 | 第42-44页 |
| ·主要结论 | 第42-43页 |
| ·Na~+,K~+-ATPase 在盐度调控中的作用 | 第42页 |
| ·三疣梭子蟹 Na~+,K~+-ATPase 盐度调节规律 | 第42-43页 |
| ·展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
