| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-15页 |
| 第一章 综述 | 第15-42页 |
| ·日本乙型脑炎简介 | 第15-17页 |
| ·起源和传播 | 第17页 |
| ·脑病毒基因组 | 第17-20页 |
| ·病毒的复制 | 第20-21页 |
| ·发病机制 | 第21-23页 |
| ·临床表现及病理变化 | 第23-24页 |
| ·感染JEV后宿主免疫反应 | 第24-26页 |
| ·体液免疫 | 第24页 |
| ·细胞免疫 | 第24-25页 |
| ·可溶性因子 | 第25-26页 |
| ·脑的诊断 | 第26-30页 |
| ·病原学检测 | 第26-28页 |
| ·血清学诊断 | 第28-30页 |
| ·乙脑的防治 | 第30页 |
| ·疫苗 | 第30-32页 |
| ·鼠脑纯化灭活苗 | 第31页 |
| ·原代地鼠肾细胞灭活苗 | 第31页 |
| ·SA14-14-2减毒活疫苗 | 第31-32页 |
| ·其他疫苗 | 第32页 |
| ·环介导等温扩增(LAMP) | 第32-41页 |
| ·背景 | 第32-34页 |
| ·LAMP方法的原理 | 第34-37页 |
| ·LAMP引物设计 | 第37-38页 |
| ·LAMP方法的反应体系和反应条件 | 第38页 |
| ·LAMP反应产物的鉴定 | 第38页 |
| ·LAMP检测方法的特点 | 第38-39页 |
| ·LAMP的应用 | 第39-41页 |
| ·研究目的与意义 | 第41-42页 |
| 第二章 研究内容 | 第42-119页 |
| 研究一 广西猪JEV FC792分离株全基因序列的克隆、测定及分析 | 第42-63页 |
| 1 主要材料、试剂与仪器 | 第42-44页 |
| ·菌种、毒株及载体 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43页 |
| ·引物的合成和序列的测定 | 第43页 |
| ·主要试剂和培养基的配制 | 第43-44页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第44-50页 |
| ·引物的设计 | 第44页 |
| ·样品的准备 | 第44-45页 |
| ·RNA的提取及反转录 | 第45页 |
| ·目的基因的扩增 | 第45-46页 |
| ·目的基因克隆 | 第46-47页 |
| ·序列测定和分析 | 第47-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-60页 |
| ·JEV FC792株全长基因序列的分段扩增结果 | 第50-51页 |
| ·重组质粒酶切鉴定结果 | 第51页 |
| ·JEV FC792株全基因序列的比较分析 | 第51-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 5 小结 | 第62-63页 |
| 研究二 JEV RT-LAMP检测方法的建立与初步应用 | 第63-86页 |
| 1 材料 | 第63-65页 |
| ·试验材料 | 第63页 |
| ·主要试剂 | 第63-64页 |
| ·主要仪器 | 第64-65页 |
| 2 方法与步骤 | 第65-71页 |
| ·试验路线 | 第65页 |
| ·引物设计 | 第65-66页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第66页 |
| ·反转录-环介导恒温扩增反应(RT-LAMP) | 第66-67页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第67页 |
| ·RT-LAMP反应条件的优化 | 第67-69页 |
| ·RT-LAMP特异性测定 | 第69页 |
| ·RT-LAMP敏感性测定 | 第69-70页 |
| ·RT-LAMP的稳定性检测 | 第70页 |
| ·运用RT-LAMP对临床样品进行检测 | 第70页 |
| ·RT-LAMP反应结果的可视化观察 | 第70-71页 |
| 3 实验结果与分析 | 第71-82页 |
| ·JEV RT-LAMP反应温度的优化结果 | 第71-72页 |
| ·JEV RT-LAMP反应时间的优化结果 | 第72-73页 |
| ·JEV RT-LAMP dNTPs浓度的优化结果 | 第73-74页 |
| ·JEV RT-LAMP Betaine浓度的优化结果 | 第74-75页 |
| ·RT-LAMP MgSO_4浓度的优化结果 | 第75-76页 |
| ·RT-LAMP引物浓度的优化结果 | 第76-77页 |
| ·JEV RT-LAMP检测方法各反应条件的优化 | 第77页 |
| ·JEV RT-LAMP特异性测定 | 第77-78页 |
| ·JEV RT-LAMP敏感性测定结果 | 第78-79页 |
| ·JEV RT-LAMP的稳定性检测结果 | 第79-80页 |
| ·JEV RT-LAMP临床样品检测结果 | 第80-81页 |
| ·RT-LAMP反应结果的可视化观察 | 第81-82页 |
| 4 讨论 | 第82-85页 |
| ·JEV RT-LAPM检测方法的评价 | 第82-83页 |
| ·RT-LAMP的优化 | 第83-84页 |
| ·LAMP结果的可视化检测 | 第84页 |
| ·LAMP的污染问题及解决办法 | 第84-85页 |
| 5 小结 | 第85-86页 |
| 研究三 广西猪JEV FC792分离株E基因主要抗原域Ⅰ、Ⅱ的克隆、原核表达与免疫原性的初步研究 | 第86-119页 |
| 1 材料、试剂与仪器 | 第86-91页 |
| ·菌种、毒株及载体 | 第86页 |
| ·主要试剂 | 第86-87页 |
| ·引物的设计、合成和序列的测定 | 第87页 |
| ·主要仪器 | 第87页 |
| ·主要试剂和培养基的配制 | 第87-91页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第91-102页 |
| ·引物 | 第91页 |
| ·样品的准备 | 第91页 |
| ·RNA的提取及反转录 | 第91页 |
| ·目的基因的扩增 | 第91-92页 |
| ·目的基因克隆 | 第92-93页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第93-94页 |
| ·重组蛋白E_a的诱导表达及鉴定 | 第94-97页 |
| ·重组蛋白pET-E_a的纯化及复性 | 第97-99页 |
| ·蛋白免疫原性的初步研究 | 第99-102页 |
| 3 结果与分析 | 第102-115页 |
| ·pET-E_a原核表达载体的构建 | 第102-103页 |
| ·重组蛋白的表达与鉴定 | 第103-110页 |
| ·E_a重组蛋白的纯化与复性 | 第110-112页 |
| ·中和试验 | 第112-115页 |
| 4 讨论 | 第115-118页 |
| 5 小结 | 第118-119页 |
| 第三章 全文结论 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-134页 |
| 附录：英文缩写对照表 | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135-136页 |
| 发表的文章 | 第136-137页 |
| 个人简历 | 第137页 |
