L-谷氨酸氧化酶发酵条件及分离纯化的研究
| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-20页 |
| 引言 | 第13页 |
| ·谷氨酸氧化酶的发现及特性 | 第13-15页 |
| ·谷氨酸氧化酶发酵条件及分离纯化的研究 | 第15-16页 |
| ·谷氨酸氧化酶发酵条件的研究 | 第15-16页 |
| ·谷氨酸氧化酶分离纯化的研究 | 第16页 |
| ·L-谷氨酸氧化酶的应用 | 第16-19页 |
| ·GLOD 在临床生化检测中的应用 | 第16-17页 |
| ·谷氨酸氧化酶在生物传感器的应用 | 第17-19页 |
| ·谷氨酸氧化酶的研究前景 | 第19-20页 |
| 第2章 酶活性测定及其它测定方法的建立 | 第20-28页 |
| 引言 | 第20页 |
| ·仪器与试剂 | 第20-22页 |
| ·实验仪器及器材 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·酶活性的测定 | 第22-25页 |
| ·相对酶活性的测定 | 第22-23页 |
| ·GLOD 绝对酶活的测定 | 第23-24页 |
| ·绝对酶活与相对酶活的关系 | 第24-25页 |
| ·其它测定方法的建立 | 第25-26页 |
| ·蛋白质的测定 | 第25-26页 |
| ·葡萄糖和蔗糖的测定 | 第26页 |
| ·谷氨酸的测定 | 第26页 |
| 本章小结 | 第26-28页 |
| 第3章 GLOD高产菌的筛选与鉴定 | 第28-34页 |
| 引言 | 第28页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·待分离菌种 | 第28页 |
| ·仪器与试剂 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·菌种筛选方法 | 第29页 |
| ·菌种活化 | 第29页 |
| ·种子培养 | 第29页 |
| ·摇瓶培养 | 第29页 |
| ·鉴定方法 | 第29-30页 |
| ·形态鉴定 | 第29页 |
| ·菌株生长曲线的测定 | 第29页 |
| ·菌种稳定性 | 第29-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-32页 |
| ·形态鉴定 | 第30-31页 |
| ·华美链霉菌生长曲线与产酶情况 | 第31页 |
| ·菌种稳定性 | 第31-32页 |
| ·菌种的保藏 | 第32页 |
| 本章小结 | 第32-34页 |
| 第4章 GLOD 发酵条件的优化 | 第34-49页 |
| 引言 | 第34-35页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·菌种 | 第35-36页 |
| ·培养基和培养条件 | 第36页 |
| ·培养方法 | 第36页 |
| ·菌种活化 | 第36页 |
| ·种子培养 | 第36页 |
| ·摇瓶培养 | 第36页 |
| ·GLOD 酶活测定 | 第36页 |
| ·实验设计 | 第36-38页 |
| ·对培养基组分的响应面优化 | 第36-37页 |
| ·培养条件的优化 | 第37-38页 |
| ·最佳发酵条件的验证 | 第38页 |
| ·结果与讨论 | 第38-47页 |
| ·对培养基组分的响应面优化 | 第38-45页 |
| ·培养条件的优化 | 第45-47页 |
| ·最优条件的验证结果 | 第47页 |
| 本章小结 | 第47-49页 |
| 第5章 L-谷氨酸氧化酶的分离纯化 | 第49-56页 |
| 引言 | 第49页 |
| ·材料与方法 | 第49-50页 |
| ·仪器与试剂 | 第49-50页 |
| ·酶活的测定方法 | 第50页 |
| ·其他因素的选择 | 第50页 |
| ·缓冲液的确定 | 第50页 |
| ·硫酸铵比例的确定 | 第50页 |
| ·匀浆的选择 | 第50页 |
| ·GLOD 是胞外酶 | 第50-51页 |
| ·GLOD 分离纯化步骤 | 第51-54页 |
| ·GLOD 粗品的制备 | 第51页 |
| ·液相色谱法分离纯化 | 第51-54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-55页 |
| ·纯化的结果及收率 | 第54-55页 |
| ·GLOD 的纯度及分子量的测定 | 第55页 |
| 本章小结 | 第55-56页 |
| 第6章 L-谷氨酸氧化酶的酶学性质的研究及应用 | 第56-64页 |
| 引言 | 第56页 |
| ·材料与方法 | 第56页 |
| ·仪器与试剂 | 第56页 |
| ·酶活的测定方法 | 第56页 |
| ·GLOD 的酶学性质研究 | 第56-57页 |
| ·酶的底物特异性 | 第56页 |
| ·粗酶的稳定性试验 | 第56-57页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第57页 |
| ·PH 对酶活的影响 | 第57页 |
| ·酸碱滴定试验 | 第57页 |
| ·米氏常数和最大反应速率的测定 | 第57页 |
| ·金属离子对 GLOD 活性的影响 | 第57页 |
| ·GLOD 在生物传感分析仪上的应用 | 第57-59页 |
| ·固定化 GLOD 酶膜制备 | 第57-58页 |
| ·测定方法 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-63页 |
| ·酶的底物特异性 | 第59-60页 |
| ·粗酶的稳定性试验 | 第60页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第60-61页 |
| ·PH 对酶活力的影响 | 第61页 |
| ·酸碱滴定试验 | 第61-62页 |
| ·米氏常数和最大反应速率的测定 | 第62页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第62-63页 |
| ·固定化 GLOD 酶膜 | 第63页 |
| 本章小结 | 第63-64页 |
| 第七章 结论与展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 在学期间的主要科研成果 | 第71页 |
| 一、发表的学术论文 | 第71页 |
