| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-36页 |
| 1 海洋多糖 | 第13-17页 |
| ·褐藻胶 | 第13-15页 |
| ·卡拉胶 | 第15-17页 |
| 2 菊糖 | 第17-19页 |
| ·菊糖的结构 | 第17页 |
| ·菊糖的应用 | 第17-19页 |
| 3 海洋微生物多糖水解酶 | 第19-34页 |
| ·褐藻胶裂解酶 | 第20-23页 |
| ·卡拉胶酶 | 第23-29页 |
| ·菊糖酶 | 第29-34页 |
| 4 论文的研究依据和主要的研究内容 | 第34-36页 |
| 第二章 Vibrio sp.QY101褐藻胶裂解酶Y.lipolytica表面展示表达及展示酶性质研究 | 第36-59页 |
| 1 前言 | 第36-38页 |
| 2 实验设计 | 第38-39页 |
| 3 材料与方法 | 第39-47页 |
| ·质粒与菌株 | 第39页 |
| ·培养基与试剂 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-47页 |
| 8 结果与讨论 | 第47-58页 |
| ·构建褐藻胶裂解酶表面展示表达质粒 | 第47-50页 |
| ·Y.lipolytica Polh转化 | 第50页 |
| ·阳性转化子筛选及验证 | 第50-52页 |
| ·复筛高酶活力转化子 | 第52-54页 |
| ·展示褐藻胶裂解酶酶特性研究 | 第54-58页 |
| 9 本章总结 | 第58-59页 |
| 第三章 P.porphyrae LL1 κ-卡拉胶酶的纯化及特性分析 | 第59-77页 |
| 10 前言 | 第59页 |
| 11 实验设计 | 第59-60页 |
| 12 材料与方法 | 第60-67页 |
| ·菌株 | 第60页 |
| ·培养基与试剂 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-67页 |
| 13 结果与讨论 | 第67-76页 |
| ·LL1菌株的鉴定 | 第67-68页 |
| ·P.porphyrae LL1 κ-卡拉胶酶的纯化 | 第68-70页 |
| ·κ-卡拉胶酶纯酶的特性分析 | 第70-76页 |
| 14 本章总结 | 第76-77页 |
| 第四章 P.porphyrae LL1 κ-卡拉胶酶的基因克隆及生物信息学分析 | 第77-99页 |
| 15 前言 | 第77-79页 |
| 16 实验设计 | 第79页 |
| 17 材料与方法 | 第79-86页 |
| ·质粒与菌株 | 第79页 |
| ·培养基与试剂 | 第79-80页 |
| ·实验方法 | 第80-86页 |
| 18 结果与讨论 | 第86-97页 |
| ·P.porphyrae LL1菌株的基因组DNA的提取 | 第86页 |
| ·P.porphyrae LL1菌株纯化κ-卡拉胶酶的蛋白N端测序 | 第86-87页 |
| ·κ-卡拉胶酶简并引物PCR扩增 | 第87-88页 |
| ·κ-卡拉胶酶反向PCR扩增 | 第88页 |
| ·κ-卡拉胶酶基因蛋白序列生物信息学分析 | 第88-94页 |
| ·染色体步移克隆κ-卡拉胶酶转录调控因子 | 第94页 |
| ·κ-卡拉胶酶转录调控因子基因蛋白序列生物信息学分析 | 第94-97页 |
| 19 本章总结 | 第97-99页 |
| 第五章 P.porphyrae LL1 κ-卡拉胶酶在Y. lipolytica高效表达及κ-卡拉胶的酶解 | 第99-117页 |
| 20 前言 | 第99-100页 |
| 21 实验设计 | 第100-101页 |
| 22 材料与方法 | 第101-107页 |
| ·质粒与菌株 | 第101页 |
| ·培养基与试剂 | 第101-107页 |
| 23 结果与讨论 | 第107-115页 |
| ·κ-卡拉胶酶表达质粒pINA1317-Cgk的构建 | 第107-109页 |
| ·κ-卡拉胶酶双拷贝表达片段的构建 | 第109-110页 |
| ·转化Y.lipolytica Polh | 第110页 |
| ·转化子重组κ-卡拉胶酶酶活力测定 | 第110-111页 |
| ·重组表达κ-卡拉胶酶酶性质研究 | 第111-114页 |
| ·κ-卡拉胶酶解的条件优化 | 第114-115页 |
| 24 本章总结 | 第115-117页 |
| 第六章 P.guilliermondii菊糖酶基因的天然菌株超表达 | 第117-138页 |
| 1 前言 | 第117-118页 |
| 2 实验设计 | 第118页 |
| 3 材料与方法 | 第118-130页 |
| ·质粒与菌株 | 第118页 |
| ·培养基与试剂 | 第118-119页 |
| ·实验方法 | 第119-130页 |
| 4 结果与讨论 | 第130-137页 |
| ·构建rDNA重组表达质粒 | 第130-134页 |
| ·转化P.guilliermondii酵母 | 第134-135页 |
| ·转化子筛选验证 | 第135-136页 |
| ·补料分批发酵 | 第136-137页 |
| 5 本章总结 | 第137-138页 |
| 第七章 易错PCR改造P.guilliermondii糖酶基因 | 第138-156页 |
| 1 前言 | 第138-139页 |
| 2 实验设计 | 第139-140页 |
| 3 材料与方法 | 第140-147页 |
| ·质粒与菌株 | 第140页 |
| ·培养基与试剂 | 第140页 |
| ·实验方法 | 第140-147页 |
| 4 结果与讨论 | 第147-155页 |
| ·构建Ycplac33-INUM质粒 | 第147-148页 |
| ·易错PCR筛选高活力突变菊糖酶基因 | 第148-149页 |
| ·突变基因分析 | 第149-152页 |
| ·高效表达突变菊糖酶基因 | 第152-155页 |
| 5 本章总结 | 第155-156页 |
| 论文总结与创新点 | 第156-158页 |
| 参考文献 | 第158-164页 |
| 附录：英文缩写符号及中英文对照表 | 第164-166页 |
| 致谢 | 第166-167页 |
| 个人简历及发表的学术论文 | 第167页 |
| 个人简历及发表的学术论文 | 第167-169页 |
