中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略词 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-24页 |
·血栓性疾病及溶栓剂 | 第11-15页 |
·血栓的形成及溶栓机制 | 第11-13页 |
·溶栓剂的研究进展 | 第13-15页 |
·豆豉纤溶酶研究概况 | 第15-19页 |
·豆豉纤溶酶产生菌 | 第15-16页 |
·豆豉纤溶酶理化性质 | 第16-18页 |
·豆豉纤溶酶溶栓机制 | 第18页 |
·豆豉纤溶酶基因的克隆表达 | 第18-19页 |
·纤溶活性的测定 | 第19-22页 |
·纤维蛋白平板法 | 第19-20页 |
·纤维蛋白块溶解时间(CLT)法 | 第20页 |
·四肽底物法 | 第20页 |
·TAME 法 | 第20-21页 |
·血清平板法 | 第21页 |
·酶联免疫吸附法(ELISA) | 第21-22页 |
·聚丙烯酰胺纤维蛋白平板法 | 第22页 |
·本研究的立题依据、研究内容和技术路线 | 第22-24页 |
·立题依据 | 第22页 |
·研究内容 | 第22-23页 |
·技术路线 | 第23-24页 |
第二章 豆豉纤溶酶产生菌的筛选及鉴定 | 第24-42页 |
·材料与方法 | 第24-33页 |
·材料 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24-25页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·培养基 | 第25-26页 |
·染色剂及生理生化鉴定试剂 | 第26-27页 |
·豆豉纤溶酶产生菌的分离纯化及培养 | 第27页 |
·冻融法提取纤维蛋白原 | 第27-28页 |
·纤溶酶活性的比较与测定 | 第28-29页 |
·菌株的保存 | 第29页 |
·生理生化特征测试 | 第29-31页 |
·细菌 16S rRNA 基因扩增及序列分析 | 第31-33页 |
·16S rRNA 基因序列的系统进化树分析 | 第33页 |
·结果与分析 | 第33-40页 |
·豆豉纤溶酶产生菌的分离 | 第33-35页 |
·分离菌株的鉴定 | 第35-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·本章小结 | 第41-42页 |
第三章 豆豉纤溶酶产生菌 HD4 发酵条件的研究 | 第42-51页 |
·材料与方法 | 第42-43页 |
·实验材料 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42页 |
·主要仪器 | 第42页 |
·培养基 | 第42-43页 |
·菌种的保存与活化 | 第43页 |
·菌体生长曲线的绘制 | 第43页 |
·培养方法 | 第43页 |
·纤溶酶活力的比较测定 | 第43页 |
·结果与分析 | 第43-49页 |
·生长曲线 | 第43-44页 |
·发酵条件的确定 | 第44-47页 |
·培养基组成的确定 | 第47-49页 |
·讨论 | 第49-50页 |
·本章小结 | 第50-51页 |
第四章 豆豉纤溶酶全基因克隆及序列分析 | 第51-63页 |
·材料和方法 | 第51-58页 |
·实验材料 | 第51-52页 |
·主要试剂 | 第52页 |
·主要仪器 | 第52-53页 |
·培养基 | 第53页 |
·豆豉纤溶酶(DFE)基因的 PCR 扩增 | 第53-54页 |
·豆豉纤溶酶基因的克隆 | 第54-58页 |
·豆豉纤溶酶(DFE)全基因的序列测定及分析 | 第58页 |
·结果与分析 | 第58-62页 |
·豆豉纤溶酶基因的扩增 | 第58页 |
·重组克隆载体的鉴定 | 第58-60页 |
·豆豉纤溶酶全基因测序及序列分析 | 第60-62页 |
·讨论 | 第62页 |
·本章小结 | 第62-63页 |
第五章 豆豉纤溶酶基因及纤溶酶原基因的原核表达研究 | 第63-78页 |
·材料和方法 | 第63-67页 |
·实验材料 | 第63页 |
·主要试剂 | 第63-64页 |
·主要仪器 | 第64页 |
·培养基 | 第64页 |
·豆豉纤溶酶原(pro-DFE)基因的 PCR 扩增 | 第64-65页 |
·重组表达质粒的构建 | 第65-66页 |
·外源基因的诱导表达 | 第66-67页 |
·结果与分析 | 第67-76页 |
·豆豉纤溶酶原(pro-DFE)基因的 PCR 扩增 | 第67-68页 |
·重组表达质粒的构建及酶切分析 | 第68-69页 |
·纤溶酶全基因及纤溶酶原基因的诱导表达 | 第69-72页 |
·葡萄糖在诱导表达中的作用 | 第72-76页 |
·讨论 | 第76-77页 |
·本章小结 | 第77-78页 |
结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第86页 |