| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| 第一部分：文献综述 | 第12-35页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 一、蜡质的合成 | 第13-17页 |
| ·质体内饱和脂肪酸从头合成途径 | 第14-17页 |
| ·脂酰链的合成途径 | 第14页 |
| ·质体外脂肪酸延长及其衍生物的合成途径 | 第14-17页 |
| ·特长链脂肪酸 VLCFAs 的合成 | 第14-15页 |
| ·蜡质组成成分的合成途径 | 第15-17页 |
| 二、蜡质的分泌 | 第17-22页 |
| ·脂肪酸（C16 或C18）运出质体的途径以及蜡质组成分的形成位点 | 第18页 |
| ·蜡质组成成分从内质网到质膜的运输途径 | 第18-19页 |
| ·蜡质组成成分从质膜到质外体的运输途径 | 第19-20页 |
| ·蜡质组成成分穿过细胞壁到达表皮的运输途径 | 第20-22页 |
| ·非特异性脂转移蛋白（nonspecific lipid proteins nsLTP） | 第20-21页 |
| ·蜡质组成成分穿过细胞壁到达表皮的运输途径 | 第21-22页 |
| 三、蜡质的生化与遗传学的研究 | 第22-27页 |
| ·拟南芥表皮蜡质突变体 | 第23-26页 |
| ·小盐芥——新的模式材料 | 第26-27页 |
| 四、表皮蜡质的生态学意义 | 第27-29页 |
| ·表皮防水 | 第27-28页 |
| ·表皮蜡质和昆虫的相互作用 | 第28页 |
| ·其它生态作用 | 第28-29页 |
| 五、关于目的蛋白亚细胞定位的研究 | 第29-35页 |
| ·GFP 基因的克隆及特征 | 第29-30页 |
| ·GFP 的改造 | 第30页 |
| ·GFP 的毒性 | 第30-31页 |
| ·GFP 的应用前景 | 第31-32页 |
| ·新型报告基因 | 第32页 |
| ·GFP 进行亚细胞定位 | 第32-33页 |
| ·用于研究植物与微生物的关系 | 第33页 |
| ·用于完整植株的信号传导研究 | 第33页 |
| ·转基因植物的生态检测 | 第33-35页 |
| 第二部分：实验论文 | 第35-72页 |
| 一、材料和方法 | 第35-47页 |
| 1 实验材料 | 第35-37页 |
| ·cDNA 文库、质粒及菌种 | 第35页 |
| ·酶及化学试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35-36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·质粒提取液 | 第36页 |
| ·植物材料 | 第36-37页 |
| 2 实验方法 | 第37-39页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及转化的方法 | 第37页 |
| ·质粒的提取的方法 | 第37-38页 |
| ·PCR 及酶切验证以及连接 | 第38页 |
| ·GeneClean 方法从琼脂糖凝胶上回收再扩增cDNA 片段 | 第38页 |
| ·菌种的保藏 | 第38页 |
| ·序列测定 | 第38-39页 |
| ·Th-nsLTP4 的cDNA 克隆 | 第39页 |
| ·Th-nsLTP4 基因全长cDNA 的获得 | 第39页 |
| ·cDNA 序列的验证 | 第39页 |
| ·植物材料处理 | 第39页 |
| ·小盐芥(T. halophila)总RNA 的提取和Northern 杂交膜的制备 | 第39-41页 |
| ·异硫氰酸胍法提取总RNA 和检测 | 第39-40页 |
| ·Northern 杂交膜的制备 | 第40-41页 |
| ·在含有甲醛的凝胶上进行RNA 电泳 | 第40页 |
| ·RNA 杂交膜的制备 | 第40-41页 |
| ·小盐芥(T. halophila)总DNA 的提取和Southern 杂交膜的制备 | 第41页 |
| ·植物基因组DNA 的提取 | 第41页 |
| ·Southern 杂交膜的制备 | 第41页 |
| ·Northern 杂交和Southern 杂交分析 | 第41-42页 |
| ·cDNA 探针的制备 | 第41-42页 |
| ·杂交过程 | 第42页 |
| ·植物表达框架的构建及农杆菌的转化 | 第42-43页 |
| ·植物过量表达(overexpression) 表达框架的构建 | 第42页 |
| ·植物沉默表达(silence) 表达框架的构建 | 第42-43页 |
| ·植物表达载体的农杆菌的转化 | 第43页 |
| ·农杆菌质粒的提取与鉴定 | 第43页 |
| ·渗透法转化拟南芥和小盐芥 | 第43-46页 |
| ·植物的生长 | 第43页 |
| ·菌液的准备 | 第43-44页 |
| ·渗透转化 | 第44页 |
| ·转化子的筛选 | 第44页 |
| ·用Kana 筛选转基因苗 | 第44页 |
| ·用Basta 筛选转基因苗 | 第44页 |
| ·转化子的遗传分析 | 第44页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第44-45页 |
| ·转基因植株基因组Southern 鉴定 | 第45页 |
| ·转基因植株的Northern 杂交 | 第45页 |
| ·转基因植株的表型鉴定 | 第45-46页 |
| ·农杆菌介导的洋葱表皮的转化 | 第46-47页 |
| 二、实验结果与分析 | 第47-66页 |
| ·小盐芥(T. halophila) Th-nsLTP4 cDNA 分子克隆与鉴定 | 第47-63页 |
| ·EST 的BLAST 分析 | 第47-48页 |
| ·小盐芥(T. halophila) Th-nsLTP4 cDNA 的全长序列 | 第48-49页 |
| ·利用对该基因进行二级结构预测分析 | 第49-51页 |
| ·利用CN3D 4.0 软件对该基因进行空间结构的预测分析 | 第51页 |
| ·Th-nsLTP4 基因在不同胁迫条件下的特异性表达分析 | 第51-53页 |
| ·Th-nsLTP4 植物表达框架的构建以及酶切和PCR 验证 | 第53页 |
| ·转入农杆菌质粒的提取与鉴定 | 第53-54页 |
| ·拟南芥和小盐芥的遗传转化与筛选 | 第54页 |
| ·转基因植株的分析 | 第54-56页 |
| ·转基因植株的PCR 鉴定 | 第54-55页 |
| ·转基因植株的 Southern 分析 | 第55-56页 |
| ·转基因植株的 Northern 分析 | 第56页 |
| ·转基因植株的表型分析 | 第56-61页 |
| ·过量表达Th-nsLTP4 对转基因拟南芥植株表皮透性的影响 | 第56-57页 |
| ·过量表达Th-nsLTP4 对转基因拟南芥叶绿素透过率的影响 | 第57页 |
| ·过量表达Th-nsLTP4 转基因植株在NaCl 胁迫条件下的生长情况 | 第57-58页 |
| ·盐处理对转基因植株与野生型植株鲜、干重的影响 | 第58页 |
| ·盐处理对转基因植株与野生型含水量的影响 | 第58-59页 |
| ·盐处理对转基因植株与野生型植株丙二醛(MDA)含量的影响 | 第59页 |
| ·干旱处理对转Th-nsLTP4 植株与野生型植株生长的影响 | 第59页 |
| ·PEG 和甘露醇模拟生理干旱处理的结果 | 第59页 |
| ·转Th-nsLTP4 植株与野生型植株表皮蜡质含量和组成成分的分析 | 第59-61页 |
| ·转Th-nsLTP4 植株与野生型植株表皮蜡质晶体扫描电镜结果 | 第61页 |
| ·Th-nsLTP4 在小盐芥中的转录后基因沉默结果 | 第61-63页 |
| ·Th-nsLTP4 基因沉默表达的结果 | 第61页 |
| ·GC/MS 分析盐芥表皮蜡质含量和组成成分的结果 | 第61-62页 |
| ·Th-nsLTP4 基因表达水平下降对转基因盐芥表皮透性的影响 | 第62-63页 |
| ·沉默表达Th-nsLTP4 植株与野生型植株表皮蜡质晶体扫描电镜结果 | 第63页 |
| ·在拟南芥中过量表达WAX2 对表皮蜡质的影响 | 第63-65页 |
| ·过量表达WAX2 的拟南芥的表皮蜡质发生了改变 | 第63页 |
| ·扫描电镜结果 | 第63页 |
| ·northen 杂交分析结果 | 第63-64页 |
| ·表皮的透性的分析结果 | 第64-65页 |
| ·GC/MS 分析表皮蜡质含量和组成成分 | 第65页 |
| ·用农杆菌介导的方法研究荧光蛋白融合基因的定位 | 第65-66页 |
| 三、讨论 | 第66-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 附录 | 第80-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
