| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-32页 |
| 1 菊粉简介 | 第12页 |
| 2 生产菊粉的作物 | 第12-14页 |
| 3 菊粉的利用现状 | 第14-21页 |
| ·生产生物燃料 | 第14-16页 |
| ·生物乙醇 | 第14-15页 |
| ·生产单细胞油脂 | 第15-16页 |
| ·生产高果糖浆 | 第16-17页 |
| ·生产低聚菊糖 | 第17-19页 |
| ·生产单细胞蛋白 | 第19页 |
| ·其它化工产品 | 第19-21页 |
| ·2,3-丁二醇 | 第19-20页 |
| ·乳酸 | 第20页 |
| ·糖醇 | 第20-21页 |
| 4 菊粉酶 | 第21-25页 |
| ·菊粉酶简介 | 第22页 |
| ·产菊粉酶的微生物 | 第22-25页 |
| ·酵母 | 第22-23页 |
| ·丝状真菌 | 第23页 |
| ·细菌 | 第23-25页 |
| 5 菊粉酶在酵母中的表达 | 第25-26页 |
| 6 单细胞蛋白 | 第26-30页 |
| ·单细胞蛋白简介 | 第26-27页 |
| ·产单细胞蛋白的微生物 | 第27-29页 |
| ·酵母 | 第27页 |
| ·细菌 | 第27-28页 |
| ·真菌 | 第28页 |
| ·微藻 | 第28-29页 |
| ·单细胞蛋白的营养评价 | 第29页 |
| ·单细胞蛋白的应用及展望 | 第29-30页 |
| 7 本论文的研究内容和意义 | 第30-32页 |
| 第二章 菊粉酶基因 INU1 在高蛋白海洋酵母菌 Y lipolytica 中的表达 | 第32-52页 |
| 0 前言 | 第32-33页 |
| 1 材料与方法 | 第33-45页 |
| ·菌种和质粒 | 第33-34页 |
| ·培养基与试剂 | 第34-36页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·试剂 | 第34-36页 |
| ·方法 | 第36-45页 |
| ·K marxianus 菊粉酶基因在Y lipolytica 中分泌表达的质粒构建图. | 第36页 |
| ·PCR 扩增菊粉酶编码基因INU1 | 第36-38页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第38页 |
| ·重组质粒pMD19-INU1 的构建 | 第38-40页 |
| ·INU1 片段与质粒pINA1317 连接 | 第40-41页 |
| ·Y lipolytica 尿嘧啶缺陷型突变株22a 的转化 | 第41-42页 |
| ·转化子基因组插入片段检测 | 第42-43页 |
| ·转化子酶活性测定及高酶活转化子的筛选 | 第43页 |
| ·转化子培养上清液的SDS-PAGE 和Western blotting 分析 | 第43-45页 |
| 2 结果与讨论 | 第45-51页 |
| ·表达质粒pINA1317- INU1 的构建 | 第45-48页 |
| ·阳性转化子的鉴定 | 第48-49页 |
| ·阳性转化子酶活力测定及高酶活转化子的筛选 | 第49-50页 |
| ·转化子培养液上清SDS-PAGE 和Western blotting 的检测结果 | 第50-51页 |
| 3 本章小结 | 第51-52页 |
| 第三章 高蛋白海洋酵母菌 Y.lipolytica菊粉酶重组菌株利用菊粉及菊芋干粉生产单细胞蛋白的研究 | 第52-70页 |
| 0 前言 | 第52页 |
| 1 材料和方法 | 第52-57页 |
| ·菌种 | 第52-53页 |
| ·培养基与试剂 | 第53页 |
| ·培养基 | 第53页 |
| ·试剂 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-57页 |
| ·酵母粗蛋白含量的测定（凯氏定氮法） | 第53-54页 |
| ·细胞干重的测定 | 第54页 |
| ·摇瓶发酵生产单细胞蛋白的条件优化 | 第54-56页 |
| ·菊芋干粉的制备 | 第56页 |
| ·使用2-l 发酵罐发酵生产单细胞蛋白 | 第56页 |
| ·还原糖含量的确定 | 第56页 |
| ·总糖的测定 | 第56-57页 |
| ·菊粉酶酶活的测定 | 第57页 |
| ·氨基酸组分的测定 | 第57页 |
| ·必需氨基酸指数的计算方法 | 第57页 |
| 2 结果与讨论 | 第57-68页 |
| ·摇瓶生产单细胞蛋白条件的优化结果 | 第57-64页 |
| ·不同菊粉浓度对细胞干重、蛋白含量和总蛋白量的影响 | 第57-58页 |
| ·不同氮源对细胞干重、蛋白含量和总蛋白量的影响 | 第58-59页 |
| ·最佳氮源浓度的确定 | 第59-61页 |
| ·温度对细胞干重、蛋白含量和总蛋白量的影响 | 第61-62页 |
| ·pH 对细胞干重、蛋白含量和总蛋白量的影响 | 第62-63页 |
| ·细胞干重、蛋白含量和总蛋白量随时间变化曲线 | 第63-64页 |
| ·使用2-l 发酵罐发酵单细胞蛋白 | 第64-67页 |
| ·转化子细胞氨基酸成分的分析 | 第67-68页 |
| 3 本章小结 | 第68-70页 |
| 第四章 重组菊粉酶的纯化和酶学性质的研究 | 第70-84页 |
| 0 前言 | 第70页 |
| 1 材料与方法 | 第70-74页 |
| ·菌株 | 第70页 |
| ·培养基和试剂 | 第70-71页 |
| ·培养基 | 第70-71页 |
| ·试剂 | 第71页 |
| ·方法 | 第71-74页 |
| ·重组菊粉酶的纯化 | 第71-72页 |
| ·对纯化样品的SDS-PAGE | 第72页 |
| ·重组菊粉酶的性质 | 第72-73页 |
| ·菊粉酶水解产物的薄层层析色谱(TLC) | 第73-74页 |
| 2 结果与讨论 | 第74-81页 |
| ·重组菊粉酶的SDS-PAGE 结果 | 第74-75页 |
| ·重组菊粉酶性质的研究 | 第75-80页 |
| ·重组菊粉酶的最适反应温度和温度稳定性 | 第75-76页 |
| ·重组菊粉酶的最适作用pH 和对pH 的稳定性 | 第76-77页 |
| ·不同金属离子对重组菊粉酶活性的影响 | 第77-78页 |
| ·蛋白抑制剂对重组菊粉酶活性的影响 | 第78-79页 |
| ·重组菊粉酶动力学常数的测定 | 第79-80页 |
| ·菊粉酶水解产物的薄层层析色谱 | 第80-81页 |
| 3 本章小结 | 第81-84页 |
| 参考文献 | 第84-93页 |
| 附录 英文缩写符号及其中英文名称 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 个人简历 | 第95页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第95页 |
