| 文献综述 | 第1-35页 |
| 1 我国农药使用概况 | 第13-14页 |
| 2 农药的污染及危害 | 第14-16页 |
| 3 农药残留的检测技术 | 第16-29页 |
| 3．1 农药残留的前处理技术 | 第16-18页 |
| 3．1．1 固相萃取技术(SPE) | 第16-17页 |
| 3．1．2 固相微萃取技术(SPME) | 第17页 |
| 3．1．3 基质固相分散萃取技术(MSPDE) | 第17-18页 |
| 3．1．4 超临界流体萃取(SFE)技术 | 第18页 |
| 3．2 农药残留的常规仪器检测技术 | 第18-22页 |
| 3．2．1 气相色谱及气质联用检测技术 | 第18-21页 |
| 3．2．2 高效液相色谱及液质联用检测技术 | 第21-22页 |
| 3．3 农药残留快速检测技术 | 第22-29页 |
| 3．3．1 酶抑制 | 第22-26页 |
| 3．3．1．1 固定化酶片 | 第23-25页 |
| 3．3．1．2 比色法 | 第25-26页 |
| 3．3．2 传感器 | 第26-27页 |
| 3．3．3 酶联免疫吸附测定技术 | 第27-29页 |
| 4 酯酶的固定化技术 | 第29-35页 |
| 4．1 酶固定于天然高分子材料 | 第29-30页 |
| 4．1．1 固定于纤维素 | 第29-30页 |
| 4．1．2 固定于透析膜片 | 第30页 |
| 4．1．3 固定于琼脂珠 | 第30页 |
| 4．2 酶固定于人工合成高分子材料 | 第30-32页 |
| 4．2．1 酶固定于尼龙网 | 第30-31页 |
| 4．2．2 酶固定于聚苯乙烯材料 | 第31页 |
| 4．2．3 酶固定于聚亚胺酯 | 第31页 |
| 4．2．4 酶固定于Sepharose | 第31-32页 |
| 4．2．5 酶固定于树脂 | 第32页 |
| 4．3 酶固定于无机材料 | 第32-33页 |
| 4．3．1 酶固定于微孔玻璃 | 第32页 |
| 4．3．2 酶直接固定于电极之上 | 第32-33页 |
| 4．4 固定化酯酶的应用 | 第33-34页 |
| 4．5 面临问题 | 第34-35页 |
| 正文 | 第35-73页 |
| 1 引言 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-46页 |
| 2．1 实验材料 | 第36-37页 |
| 2．2 仪器与设备 | 第37页 |
| 2．3 实验方法 | 第37-46页 |
| 2．3．1 乙酰胆碱酯酶活力测定的方法 | 第37-39页 |
| 2．3．1．1 主要试剂的配制 | 第37-38页 |
| 2．3．1．2 酰胆碱酯酶活力标准曲线的绘制 | 第38页 |
| 2．3．1．3 游离酶的活力测定 | 第38页 |
| 2．3．1．4 固定化酶的活力测定 | 第38-39页 |
| 2．3．1．5 活力计算公式 | 第39页 |
| 2．3．1．6 固定化酶酶活回收率的计算 | 第39页 |
| 2．3．2 酶活力测定中影响因素的研究及参数确定 | 第39页 |
| 2．3．2．1 SDS浓度对显色反应的影响 | 第39页 |
| 2．3．2．2 底物用量及反应时间的研究 | 第39页 |
| 2．3．2．3 显色稳定性的研究 | 第39页 |
| 2．3．2．4 环境温度对显色稳定性影响的研究 | 第39页 |
| 2．3．3 酶抑制光电比色检测方法 | 第39-40页 |
| 2．3．3．1 游离酶酶抑制检测方法 | 第39-40页 |
| 2．3．3．2 固定化酶酶抑制检测方法 | 第40页 |
| 2．3．4 酰胆碱酯酶固定化方法 | 第40-44页 |
| 2．3．4．1 尼龙网载体固定化方法 | 第40-41页 |
| 2．3．4．2 醋酸纤维素膜载体固定化方法 | 第41页 |
| 2．3．4．3 硝酸纤维素膜载体固定化方法 | 第41-42页 |
| 2．3．4．4 滤纸载体固定化方法 | 第42-43页 |
| 2．3．4．5 无纺布载体固定化方法 | 第43页 |
| 2．3．4．6 不同载体的固定化乙酰胆碱酯酶效果比较 | 第43页 |
| 2．3．4．7 硝酸纤维素膜载体固定化酶与游离酶的比较 | 第43页 |
| 2．3．4．8 硝酸纤维素膜载体固定化重现性研究 | 第43页 |
| 2．3．4．9 保存特性研究 | 第43-44页 |
| 2．3．5 固定化酶酶抑制目视检测方法 | 第44-46页 |
| 2．3．5．1 显色片的制备 | 第44页 |
| 2．3．5．2 农药抑制时间的确定 | 第44页 |
| 2．3．5．3 酶促反应温度的确定 | 第44页 |
| 2．3．5．4 酶促反应时间的确定 | 第44页 |
| 2．3．5．5 水样中各种农药的测定 | 第44页 |
| 2．3．5．6 固定化酶光电比色法测定水样中几种农药的研究 | 第44-45页 |
| 2．3．5．7 实际样品的检测 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-66页 |
| 3．1 乙酰胆碱酯酶活力标准曲线的绘制 | 第46-47页 |
| 3．2 酶活力测定中影响因素的研究及参数确定 | 第47-48页 |
| 3．2．1 SDS浓度对显色反应的影响 | 第47-48页 |
| 3．2．2 底物用量及反应时间的研究 | 第48页 |
| 3．2．3 环境温度对显色稳定性影响的研究 | 第48页 |
| 3．3 游离酶酶抑制检测方法 | 第48-49页 |
| 3．3．1 抑制时间的研究 | 第48-49页 |
| 3．3．2 抑制剂用量的研究 | 第49页 |
| 3．4 乙酰胆碱酯酶固定化研究结果 | 第49-63页 |
| 3．4．1 尼龙网载体的固定化研究结果 | 第49-52页 |
| 3．4．1．1 共价交联法 | 第50-52页 |
| 3．4．1．2 交联法 | 第52页 |
| 3．4．1．3 辐照法 | 第52页 |
| 3．4．2 醋酸纤维素膜载体固定化研究结果 | 第52-53页 |
| 3．4．3 硝酸纤维素膜载体固定化研究结果 | 第53-56页 |
| 3．4．3．1 研究戊二醛、牛血清白蛋白对酶活力的影响 | 第53-54页 |
| 3．4．3．2 硝酸纤维膜浸泡时间对固定化的影响 | 第54页 |
| 3．4．3．3 戊二醛浓度的选择 | 第54-55页 |
| 3．4．3．4 牛血清白蛋白浓度的选择 | 第55页 |
| 3．4．3．5 固定化pH值的选择 | 第55页 |
| 3．4．3．6 固定化温度的选择 | 第55-56页 |
| 3．4．3．7 固定化时间的选择 | 第56页 |
| 3．4．4 滤纸载体固定化研究结果 | 第56-57页 |
| 3．4．4．1 浸泡对固定化酶的影响 | 第56-57页 |
| 3．4．4．2 牛血清白蛋白用量对固定化酶的影响 | 第57页 |
| 3．4．5 无纺布载体固定化研究结果 | 第57-58页 |
| 3．4．6 不同载体的固定化乙酰胆碱酯酶效果比较 | 第58-59页 |
| 3．4．6．1 固定化酶活回收率的比较 | 第58页 |
| 3．4．6．2 固定化酶工作稳定性研究 | 第58-59页 |
| 3．4．7 硝酸纤维素膜载体固定化酶与液游离的比较 | 第59-61页 |
| 3．4．7．1 最适pH值的比较 | 第59页 |
| 3．4．7．2 最适温度的比较 | 第59-60页 |
| 3．4．7．3 几种农药对酶抑制效果的比较 | 第60-61页 |
| 3．4．8 硝酸纤维素膜载体固定化重现性研究结果 | 第61-62页 |
| 3．4．9 保存特性的研究 | 第62-63页 |
| 3．5 固定化酯酶抑制目视检测方法研究结果 | 第63-66页 |
| 3．5．1 农药抑制时间的确定 | 第63页 |
| 3．5．2 酶促反应温度与时间的确定 | 第63页 |
| 3．5．3 水样中各种农药的测定(目测法) | 第63-64页 |
| 3．5．4 固定化酶光电比色法测定水样中几种农药的研究 | 第64页 |
| 3．5．5 实际样品中农药残留的测定结果 | 第64-66页 |
| 3．5．5．1 样品残留农药的提取 | 第64页 |
| 3．5．5．2 两种方法对实际样品中农药残留的测定 | 第64-65页 |
| 3．5．5．3 与气相色谱法的比较 | 第65-66页 |
| 4 讨论 | 第66-71页 |
| 4．1 关于酶酶活力测定的影响因素 | 第66-67页 |
| 4．2 游离酶酶抑制检测方法 | 第67页 |
| 4．3 乙酰胆碱酯酶固定化方法 | 第67-69页 |
| 4．3．1 尼龙网载体的固定化 | 第67-68页 |
| 4．3．2 醋酸纤维素膜载体固定化方法 | 第68页 |
| 4．3．3 硝酸纤维素膜载体固定化方法 | 第68-69页 |
| 4．3．4 滤纸与无纺布载体固定化 | 第69页 |
| 4．4 不同载体的固定化乙酰胆碱酯酶效果探讨 | 第69页 |
| 4．5 硝酸纤维素膜载体固定化酶与液态酶的比较 | 第69-70页 |
| 4．6 固定化乙酰胆碱酯酶酶抑制检测方法 | 第70-71页 |
| 5 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 攻读学位期间研究成果 | 第84页 |
