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鬼臼毒素单克隆抗体制备及其应用初步研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 文献综述第11-29页
   ·沙地柏中鬼臼毒素及其类似物农用研究进展第11-13页
   ·农药分析测定技术研究进展第13-15页
     ·气相色谱分析(Gas Chomatography,GC)第13页
     ·液相色谱法(Liquid Chomatography,LC)第13-14页
     ·色质联用技术(GC-MS, LC-MS )第14页
     ·超临界流体色谱(SFC)技术第14页
     ·直接光谱分析技术第14页
     ·毛细管电泳(CE)第14-15页
     ·生物传感器(Biosensorand)第15页
     ·免疫测定法(Immunoassay)第15页
   ·免疫分析技术第15-26页
     ·农药检测免疫分析技术的建立第16-22页
       ·半抗原的设计与改造第16页
       ·人工抗原的合成第16-17页
       ·抗体的制备第17-20页
       ·免疫测定技术第20-22页
     ·免疫检测技术研究新进展第22-24页
       ·免疫亲和层析柱(IAC)第22-23页
       ·流动注射免疫分析(Flow Injection, FIIA)第23页
       ·免疫传感器(immunosensors,IS)第23页
       ·多残留组分免疫测定技术(multiple immunoassays,MIAs)第23-24页
       ·分子印迹技术第24页
     ·免疫检测技术在农药学研究中应用第24-26页
       ·在农药作用机理研究中的应用第24页
       ·在害虫抗药性测定中的应用第24-25页
       ·在农药残留分析中的应用第25页
       ·在化合物分离、纯化中的应用第25页
       ·在农用微生物发酵液活性筛选研究中的应用第25-26页
   ·本研究的提出第26-27页
   ·本研究的主要内容和技术路线第27-29页
第二章 鬼臼毒素单克隆抗体制备第29-42页
   ·材料与方法第29-36页
     ·试剂与试材第29-31页
       ·实验材料第29页
       ·人工抗原合成试剂第29-31页
       ·器械及用具第31页
     ·试验方法第31-36页
       ·人工抗原的合成方法第31-33页
       ·鬼臼毒素单克隆抗体的制备步骤第33-36页
   ·结果与分析第36-40页
     ·人工抗原的合成第36-38页
     ·小鼠免疫结果第38页
     ·杂交瘤细胞的融合第38-40页
     ·杂交瘤细胞的扩大培养及抗体制备第40页
     ·抗体亚类的鉴定第40页
   ·讨论第40-42页
     ·人工抗原的改造是制备单抗的基础第40页
     ·小鼠的免疫效果直接影响杂交瘤分泌的McAb 的质量第40-41页
     ·细胞融合是单抗制备的关键第41-42页
第三章 鬼臼毒素单克隆抗体ELISA 检测方法的建立第42-50页
   ·材料与方法第42-44页
     ·试验试剂第42-43页
     ·试验仪器第43页
     ·间接竞争ELISA(IC-ELISA)第43页
     ·鬼臼毒素IC-ELISA 检测方法的建立第43-44页
       ·单克隆抗体及包被原工作浓度的确定第43页
       ·单克隆抗体效价测定第43页
       ·有机溶剂对IC-ELISA 分析的影响第43-44页
       ·IC-ELISA 敏感度的测定第44页
       ·IC-ELISA 特异性分析第44页
   ·结果与分析第44-48页
     ·单克隆抗体及包被原工作浓度的确定第44页
     ·单克隆抗体效价测定第44-45页
     ·有机溶剂对IC-ELISA 分析的影响第45-46页
     ·标准曲线的建立第46-47页
     ·抗体特异性分析第47-48页
   ·讨论第48-50页
     ·IC-ELISA 工作条件的选择需要综合考虑第48页
     ·如何选择有机溶剂的对实际检测有重要影响第48-49页
     ·交叉反应率是衡量抗体质量的重要标准第49-50页
第四章 鬼臼毒素单克隆抗体在青菜残留检测上的应用第50-59页
   ·材料与方法第50-52页
     ·试验试剂第50-51页
     ·供试蔬菜第51页
     ·仪器设备第51页
     ·样品前处理方法第51页
     ·工作条件的筛选方法第51页
       ·ELISA 检测第51页
       ·高效液相色谱检测系统第51页
     ·测定步骤第51-52页
       ·间接竞争ELISA(IC-ELISA)检测第51页
       ·高效液相色谱检测系统第51-52页
     ·建立标准曲线方法第52页
       ·ELISA 分析方法第52页
       ·HPLC 分析方法第52页
     ·蔬菜样品中的鬼臼毒素IC-ELISA 和HPLC 分析方法第52页
     ·添加回收率的测定第52页
   ·结果与分析第52-57页
     ·工作条件的筛选结果第52-53页
       ·ELISA 检测第52-53页
       ·高效液相色谱检测系统第53页
     ·标准曲线第53-55页
       ·ELISA 分析第53-54页
       ·HPLC 分析第54-55页
     ·分析方法的准确度、精密度和灵敏度测定第55-57页
   ·讨论第57-59页
     ·反应基质对检测的影响第57页
     ·ELISA 法用于鬼臼毒素检测的优缺点第57-59页
第五章 总结第59-61页
   ·获得了鬼臼毒素阳性单克隆抗体第59页
   ·建立了优化的间接竞争性ELISA 方法第59页
   ·建立了鬼臼毒素在蔬菜上的残留检测方法第59页
   ·本研究建立的IC-ELISA 检测方法优于HPLC 法第59-60页
   ·本试验为后续研究工作奠定了一定基础第60-61页
参考文献第61-68页
附录第68-71页
致谢第71-72页
作者简介第72页

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