| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-22页 |
| ·糖苷水解酶 | 第14页 |
| ·木聚糖的研究进展 | 第14-18页 |
| ·木聚糖和木聚糖酶 | 第14-15页 |
| ·木聚糖酶基本的家族分类 | 第15页 |
| ·木聚糖酶的来源 | 第15-16页 |
| ·木聚糖酶的分子结构域 | 第16页 |
| ·木聚糖的催化机制 | 第16-17页 |
| ·木聚糖酶的性质 | 第17页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第17-18页 |
| ·β-甘露聚糖酶的研究现状 | 第18-20页 |
| ·β-甘露聚糖酶 | 第18页 |
| ·β-甘露聚糖酶的家族 | 第18页 |
| ·β-甘露聚糖酶的结构和催化机制 | 第18-19页 |
| ·β-甘露聚糖酶的酶学性质和应用 | 第19-20页 |
| ·葡聚糖酶的研究进展 | 第20-21页 |
| ·葡聚糖和葡聚糖酶 | 第20页 |
| ·葡聚糖酶的来源和酶学性质 | 第20-21页 |
| ·葡聚糖酶的应用 | 第21页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 真菌 Bispora antennata 来源的三个糖苷水解酶的基因克隆 | 第22-37页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·菌株和质粒 | 第22页 |
| ·引物合成 | 第22页 |
| ·试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·诱导培养基及各种主要溶液的配制 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-30页 |
| ·Bispora antennata 基因组 DNA 的提取 | 第23页 |
| ·三个基因简并引物的设计 | 第23页 |
| ·三个基因部分序列的克隆 | 第23-25页 |
| ·糖苷水解酶基因全长序列的克隆 | 第25-27页 |
| ·三个糖苷水解酶完整 cDNA 基因的克隆 | 第27-29页 |
| ·三个糖苷水解酶 cDNA 序列的分析 | 第29-30页 |
| ·实验结果 | 第30-35页 |
| ·三个糖苷水解酶基因的部分序列的获得 | 第30页 |
| ·三个糖苷水解酶全长基因的获得 | 第30页 |
| ·三个糖苷水解酶 cDNA 序列的克隆 | 第30页 |
| ·木聚糖酶、甘露聚糖酶和葡聚糖酶全长基因序列的分析 | 第30-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 真菌 Bispora antennata 木聚糖酶基因 xyn11 在毕赤酵母中的表达及性质研究 | 第37-51页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·菌株与质粒 | 第37页 |
| ·引物合成 | 第37页 |
| ·试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·培养基及主要溶液的配制 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-42页 |
| ·木聚糖酶突变体 t-xyn11 基因的获得 | 第38页 |
| ·重组表达载体 pPIC9-xyn11 和 pPIC9-t-xyn11 的构建 | 第38-39页 |
| ·xyn11 和 t-xyn11 在毕赤酵母中的表达 | 第39-41页 |
| ·木聚糖酶 Xyn11 和 t-Xyn11 的纯化 | 第41页 |
| ·木聚糖酶 Xyn11 和 t-Xyn11 的酶学性质的测定 | 第41-42页 |
| ·木聚糖酶 Xyn11 和 t-Xyn11 圆二色谱分析 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-47页 |
| ·突变体基因 t-xyn11 的获得 | 第42页 |
| ·pPIC9-xyn11 和 pPIC9-t-xyn11 重组表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·两个木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第43页 |
| ·两个木聚糖酶的纯化 | 第43-44页 |
| ·木聚糖酶 Xyn11 的酶学性质分析 | 第44-47页 |
| ·木聚糖酶 Xyn11 和 t-Xyn11 圆二色谱结果 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-51页 |
| 第四章 真菌 Bispora antennata 甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达及性质分析 | 第51-60页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·菌株和质粒 | 第51页 |
| ·引物合成 | 第51页 |
| ·试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·培养基和主要溶液的配制 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-54页 |
| ·真核表达载体 pPIC9-man5 的构建 | 第51-52页 |
| ·甘露聚糖酶基因 man5 在毕赤酵母中的表达 | 第52-53页 |
| ·甘露聚糖酶 Man5 的纯化和脱糖基化处理 | 第53-54页 |
| ·甘露聚糖酶 Man5 的酶学性质测定 | 第54页 |
| ·实验结果 | 第54-58页 |
| ·pPIC9-man5 重组表达载体的构建 | 第54-55页 |
| ·甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第55页 |
| ·甘露聚糖酶的纯化及脱糖基化处理 | 第55页 |
| ·甘露聚糖酶 Man5 的酶学性质分析 | 第55-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 第五章 真菌 Bispora antennata 葡聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达和性质分析 | 第60-68页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·菌株和质粒 | 第60页 |
| ·引物合成 | 第60页 |
| ·试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第60页 |
| ·主要仪器 | 第60页 |
| ·培养基和主要溶液的配制 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-63页 |
| ·真核表达载体 pPIC9-cel5 的构建 | 第60-61页 |
| ·葡聚糖酶基因 cel5 在毕赤酵母中的表达 | 第61-62页 |
| ·葡聚糖酶 Cel5 的纯化及脱糖基化处理 | 第62-63页 |
| ·葡聚糖酶 Cel5 的酶学性质测定 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-66页 |
| ·pPIC9-cel5 重组表达载体的构建 | 第63-64页 |
| ·葡聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第64页 |
| ·葡聚糖酶的纯化及脱糖基化处理 | 第64页 |
| ·葡聚糖酶 Cel5 的酶学性质分析 | 第64-66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| 第六章 全文结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |
