第一章 文献综述 | 第1-22页 |
1.1 病原及发病机理 | 第12-16页 |
1.1.1 病原生理特性 | 第12-13页 |
1.1.2 病原的分子生物学特性 | 第13-16页 |
1.2 诊断 | 第16-17页 |
1.2.1 血清学诊断 | 第16-17页 |
1.2.2 分子生物学技术诊断 | 第17页 |
1.3 布鲁氏菌疫苗的研究现状 | 第17-22页 |
1.3.1 弱毒活菌苗 | 第17-19页 |
1.3.2 死菌苗 | 第19页 |
1.3.3 组份苗(化学苗) | 第19-20页 |
1.3.4 新型苗 | 第20-22页 |
第二章 新疆绵羊种布鲁氏菌omp31基因的克隆及序列分析 | 第22-31页 |
2.1 材料和方法 | 第22-26页 |
2.1.1 材料 | 第22-23页 |
2.1.2 方法 | 第23-26页 |
2.2 结果 | 第26-29页 |
2.2.1 布鲁氏菌基因组的提取 | 第26页 |
2.2.2 omp31基因片段的PCR扩增 | 第26页 |
2.2.3 omp31基因片段的克隆及酶切鉴定 | 第26-27页 |
2.2.4 omp31基因片段的核苷酸序列测定及分析 | 第27-29页 |
2.3 讨论 | 第29-31页 |
2.3.1 选择omp31基因的意义 | 第29页 |
2.3.2 关于绵羊种布鲁氏菌基因组的提取及omp31基因片段的扩增 | 第29-30页 |
2.3.3 测序结果和讨论 | 第30-31页 |
第三章 新疆绵羊种布鲁氏菌omp31基因在大肠杆菌BL21中的表达 | 第31-39页 |
3.1 材料与方法 | 第31-35页 |
3.1.1 材料 | 第31-32页 |
3.1.2 方法 | 第32-35页 |
3.2 结果 | 第35-37页 |
3.2.1 omp31基因片段原核表达载体的构建和鉴定 | 第35页 |
3.2.2 序列分析 | 第35页 |
3.2.3 SDS-PAGE检测PET-28a-omp31重组质粒表达蛋白 | 第35-36页 |
3.2.4 Western-blot检测结果见图3-4 | 第36-37页 |
3.3 讨论 | 第37-39页 |
3.3.1 关于目的蛋白的表达 | 第37页 |
3.3.2 关于表达目的蛋白的检测 | 第37-39页 |
第四章 布鲁氏菌omp31DNA疫苗的构建及免疫动物的抗体应答 | 第39-46页 |
4.1 材料与方法 | 第39-42页 |
4.1.1 材料 | 第39页 |
4.1.2 方法 | 第39-42页 |
4.2 结果 | 第42-44页 |
4.2.1 omp31基因片段真核表达载体的构建和鉴定 | 第42页 |
4.2.2 序列分析 | 第42页 |
4.2.3 虎红平板凝集试验 | 第42-43页 |
4.2.4 试管凝集试验 | 第43-44页 |
4.3 讨论 | 第44-46页 |
4.3.1 布鲁氏菌DNA疫苗的构建 | 第44页 |
4.3.2 疫苗免疫后免疫效果评价 | 第44-46页 |
第五章 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
附录一 | 第51-56页 |
1.1 常用培养基的配制: | 第51页 |
1.2 常用溶液的配制: | 第51-52页 |
1.3 主要试剂的配置 | 第52-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简历 | 第57-58页 |
导师评语 | 第58页 |