| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-38页 |
| ·甜菜的生物学特性及甜菜种植业在国民经济中的意义 | 第14页 |
| ·甜菜抽苔机理的研究 | 第14-22页 |
| ·栽培甜菜当年抽苔的研究进展 | 第15-18页 |
| ·植物春化作用和光周期的分子生物学研究进展概述 | 第18-21页 |
| ·分子生物学在甜菜抽苔相关基因研究中的应用 | 第21-22页 |
| ·植物基因差异表达(DGE)分析方法 | 第22-27页 |
| ·差异显示技术(DDRT) | 第23-24页 |
| ·cDNA代表性差示分析(cDNA-RDA) | 第24页 |
| ·抑制消减杂交法(SSH) | 第24-25页 |
| ·交互扣除RNA差别显示技术(RSDD) | 第25-26页 |
| ·基因表达系统分析(SAGE) | 第26页 |
| ·GeneCalling | 第26-27页 |
| ·各种差异表达分析技术比较 | 第27页 |
| ·植物基因克隆的方法及研究进展 | 第27-32页 |
| ·根据基因差异表达分析进行克隆 | 第27页 |
| ·结合分子标记的染色体定位克隆 | 第27-28页 |
| ·根据已知基因序列PCR扩增克隆基因 | 第28-29页 |
| ·根据已知蛋白序列的进行功能克隆 | 第29页 |
| ·转座子或T-DNA标签法 | 第29-30页 |
| ·表达序列标签法(EST) | 第30-31页 |
| ·应用DNA芯片技术筛选新基因 | 第31页 |
| ·人工合成并克隆基因 | 第31-32页 |
| ·植物全长基因的获得方法进展 | 第32-33页 |
| ·基因文库筛选 | 第32页 |
| ·RACE技术 | 第32-33页 |
| ·植物基因内含子及其对基因表达水平的影响 | 第33-35页 |
| ·内含子的产生 | 第33-34页 |
| ·植物基因内含子的结构特点 | 第34页 |
| ·植物基因内含子对基因表达模式及表达水平的影响 | 第34-35页 |
| ·本研究意义、研究内容、预期目标和技术路线 | 第35-38页 |
| ·研究意义 | 第35页 |
| ·研究内容 | 第35-36页 |
| ·预期目标 | 第36-37页 |
| ·技术路线 | 第37-38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-67页 |
| ·cDNA代表性差示分析(cDNA-RDA) | 第38-50页 |
| ·试验材料 | 第39-40页 |
| ·试验方法 | 第40-47页 |
| ·差异片段的克隆 | 第47-49页 |
| ·酶切鉴定 | 第49页 |
| ·测序 | 第49-50页 |
| ·cDNA末端快速扩增(RACE) | 第50-56页 |
| ·引物设计和合成 | 第50页 |
| ·cDNA 3′末端快速扩增(3′ RACE) | 第50-53页 |
| ·cDNA 5′末端快速扩增(5′ RACE) | 第53-55页 |
| ·3′RACE和5′RACE扩增产物的测序 | 第55-56页 |
| ·RACE扩增产物序列的拼接 | 第56页 |
| ·甜菜cDNA和基因组DNA的PCR扩增及克隆、测序 | 第56-59页 |
| ·引物设计 | 第56页 |
| ·cDNA的PCR扩增及克隆、测序 | 第56-57页 |
| ·基因组DNA的PCR扩增及克隆、测序 | 第57-59页 |
| ·差异片段RT-PCR分析和RNA、DNA杂交 | 第59-63页 |
| ·RT-PCR分析 | 第59页 |
| ·RNA杂交(Northern Blot) | 第59-61页 |
| ·DNA杂交(Southern Blot) | 第61-63页 |
| ·目的片段的原核表达及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第63-67页 |
| ·目的片段的原核表达 | 第63-65页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第65-67页 |
| 3 结果与分析 | 第67-94页 |
| ·甜菜抽苔相关基因cDNA代表性差示分析(cDNA-RDA) | 第67-72页 |
| ·RNA的提取 | 第67页 |
| ·cDNA第一链及cDNA第二链的合成 | 第67-68页 |
| ·Tester和Driver cDNA的扩增 | 第68-69页 |
| ·杂交-扩增 | 第69页 |
| ·差异片段的克隆 | 第69-71页 |
| ·测序及同源性比较 | 第71-72页 |
| ·cDNA末端快速扩增 | 第72-75页 |
| ·cDNA 3′末端快速扩增(3′ RACE) | 第72-73页 |
| ·cDNA 5′末端快速扩增(5′ RACE) | 第73-74页 |
| ·3′ RACE和5′ RACE测序结果与靶序列DP3的双拼接 | 第74-75页 |
| ·cDNA和基因组DNA的PCR扩增及克隆、测序 | 第75-80页 |
| ·cDNA的PCR扩增及克隆、测序 | 第75-78页 |
| ·基因组DNA的PCR扩增及克隆、测序 | 第78-80页 |
| ·cDNA差异片段的同源性比较分析 | 第80-83页 |
| ·Ty7Br600 cDNA在GenBank基因数据库中同源性检索 | 第80-82页 |
| ·Ty7Br900 DNA中的内含子序列 | 第82页 |
| ·TA33Br600 DNA与特异cDNA片段Ty7Br600的比较 | 第82-83页 |
| ·差异cDNA片段蛋白产物结构、功能预测 | 第83-87页 |
| ·cDNA差异片段蛋白产物氨基酸序列的预测 | 第83页 |
| ·Ty7Br600基因推断的蛋白结构分析 | 第83-87页 |
| ·差异片段RT-PCR分析和RNA、DNA杂交 | 第87-91页 |
| ·RT-PCR分析 | 第87-88页 |
| ·RNA杂交(Northern Blot) | 第88-89页 |
| ·DNA杂交(Southern Blot) | 第89-91页 |
| ·目的片段的原核表达及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第91-94页 |
| ·目的片段的原核表达 | 第91-92页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第92-94页 |
| 4 讨论 | 第94-99页 |
| ·实验选材与方法选择 | 第94-95页 |
| ·实验选材 | 第94页 |
| ·方法选择 | 第94-95页 |
| ·cDNA-RDA与RACE结合的优越性 | 第95-96页 |
| ·蛋白质在大肠杆菌中的表达 | 第96页 |
| ·甜菜抽苔相关基因的克隆 | 第96-97页 |
| ·甜菜抽苔的可能机制 | 第97-98页 |
| ·存在的问题及展望 | 第98-99页 |
| 5 结论 | 第99-101页 |
| ·低温诱导甜菜抽苔差异表达基因片段的克隆 | 第99页 |
| ·cDNA和基因组DNA的PCR扩增及克隆 | 第99页 |
| ·差异表达基因Ty7Br600的特性 | 第99-100页 |
| ·差异表达基因Ty7Br600的蛋白表达 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-113页 |
| 在读期间发表的文章 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
