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L-抗坏血酸芳香酸酯酶法合成及微生物角蛋白酶研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-16页
第1章 绪论第16-54页
   ·有机相酶催化L—抗坏血酸酯类合成的研究综述第16-25页
     ·L—抗坏血酸有机酸酯类的应用第16-18页
       ·L—抗坏血酸有机酸酯作为抗氧化剂的应用第17页
       ·L—抗坏血酸有机酸酯作为表面活性剂的应用第17页
       ·L—抗坏血酸有机酸酯作为药物载体的应用第17-18页
       ·L—抗坏血酸有机酸酯的潜在抗癌价值第18页
     ·有机相酶催化L—抗坏血酸酯类合成的研究进展第18-23页
       ·L—抗坏血酸不饱和脂肪酸酯的合成研究第18-21页
       ·有机相酶催化L—抗坏血酸饱和脂肪酸酯的合成研究第21-23页
       ·有机相酶催化L—抗坏血酸天然产物混合酸酯类的合成研究第23页
     ·本研究的主要内容和意义第23-25页
   ·微生物角蛋白酶研究综述第25-45页
     ·角蛋白酶的微生物来源第25-27页
       ·细菌来源角蛋白酶第25-26页
       ·放线菌来源角蛋白酶第26页
       ·真菌来源角蛋白酶第26-27页
     ·角蛋白酶的生产状况第27-30页
       ·不同微生物降解角蛋白和产酶的特性第27-28页
       ·角蛋白酶发酵过程的研究现状第28-30页
       ·角蛋白酶产生的诱导理论第30页
     ·角蛋白酶的酶学性质研究进展第30-35页
       ·角蛋白的分子量大小第31页
       ·pH、等电点和温度第31-33页
       ·角蛋白酶降解底物的特异性第33页
       ·抑制剂和激活剂第33-34页
       ·还原剂第34-35页
     ·角蛋白酶催化机理的研究状况第35-36页
       ·微生物降解角蛋白的作用机制第35-36页
       ·角蛋白酶降解角蛋白的复合酶理论第36页
     ·角蛋白酶的分子生物学研究进展第36-40页
       ·角蛋白酶基因的比较鉴别第36-38页
       ·角蛋白酶基因水平的诱导调控第38-39页
       ·角蛋白酶的基因工程生产第39-40页
     ·角蛋白酶的应用第40-44页
       ·角蛋白酶在饲料和肥料生产中的应用第40-41页
       ·角蛋白酶在医药和化妆品行业中的应用第41-42页
       ·角蛋白酶在毛纺工业中的应用第42页
       ·角蛋白酶在制革工业中的应用第42-43页
       ·角蛋白酶在去污剂工业中的应用第43页
       ·角蛋白酶在其他领域中的应用第43-44页
     ·微生物角蛋白酶研究的内容和意义第44-45页
 参考文献第45-54页
第2章 有机相酶催化L—抗坏血酸芳香酯的合成研究第54-82页
   ·引言第54页
   ·材料与方法第54-59页
     ·材料第54-56页
       ·微生物菌种和酶第54-55页
       ·主要试剂第55页
       ·主要培养基第55页
       ·主要仪器第55-56页
     ·方法第56-59页
       ·L—抗坏血酸苯甲酸酯标准品的制备第56-57页
       ·L—抗坏血酸苯甲酸酯的检测方法第57页
       ·L—抗坏血酸苯甲酸酯生物合成研究的通用方法第57-58页
       ·不同log P有机溶剂的筛选第58页
       ·水活度对生物合成反应的影响第58页
       ·溶剂的pH值对生物合成反应的影响第58页
       ·L—抗坏血酸苯甲酸酯抗氧化性能的检测第58-59页
       ·L—抗坏血酸苯甲酸酯抗菌性能的检测第59页
   ·结果与讨论第59-79页
     ·L—抗坏血酸芳香酸酯合成的主要影响因素研究第59-66页
       ·L—抗坏血酸苯甲酸酯HPLC检测的标准曲线第59-60页
       ·有机溶剂的筛选与反应体系的构建第60-61页
       ·pH值对反应速度和转化率的影响第61-62页
       ·水活度对反应速度和转化率的影响第62-63页
       ·底物对转化率和最终产率影响第63-64页
       ·不同温度下催化反应的时程曲线第64-65页
       ·摇床转速对反应初速度的影响第65-66页
       ·终产物的核磁共振结果分析第66页
     ·L—抗坏血酸苯甲酸酯合成过程的优化研究第66-76页
       ·中心组合实验的统计分析第66-70页
       ·单因素对合成过程影响的综合分析第70-71页
       ·合成中双因素协同作用和相互关系研究第71-73页
       ·微分法在研究固定与优化因素关系中的应用第73-74页
       ·三因素相互作用研究第74页
       ·合成过程的最终优化与结果检验第74-76页
     ·L—抗坏血酸苯甲酸酯的性质研究第76-79页
       ·L—抗坏血酸苯甲酸酯的抗菌性能研究第76-78页
       ·L—抗坏血酸苯甲酸酯的抗氧化性能研究第78-79页
   ·小结第79-80页
 参考文献第80-82页
第3章 角蛋白酶生产菌的分离鉴定第82-108页
   ·引言第82页
   ·材料与方法第82-88页
     ·材料第82-84页
       ·菌种筛选材料第82页
       ·主要试剂第82-83页
       ·培养基第83页
       ·主要仪器与设备第83-84页
     ·方法第84-88页
       ·羽毛粉和偶氮角蛋白的制备第84页
       ·菌种分离选育方法第84页
       ·形态及生理生化实验方法第84-85页
       ·16S rDNA测定及系统进化树构建方法第85页
       ·全细胞脂肪酸的测定方法第85页
       ·发酵培养种子的制备第85页
       ·生物量的测量方法第85-86页
       ·氨基氮和可溶性蛋白检测方法第86页
       ·角蛋白酶酶活检测方法第86页
       ·酪蛋白活性的快速检测方法第86-87页
       ·温度、pH和化学试剂对酶活影响的研究方法第87页
       ·菌种水解角蛋白能力的检测第87页
       ·数据的统计分析第87-88页
   ·结果与讨论第88-104页
     ·菌株的筛选第88-96页
       ·菌种的大小与形状第88-89页
       ·生理生化特性分析第89-90页
       ·全细胞脂肪酸分析第90-93页
       ·菌种的系统进化分析第93-96页
     ·菌株的产酶和生长特性研究第96-97页
     ·粗酶液的性质初探第97-101页
       ·缓冲液种类和pH值对粗酶液酶活和稳定性的影响第97-98页
       ·温度对粗酶液酶活和稳定性的影响第98-99页
       ·金属离子、有机溶剂等对酶活的影响第99-100页
       ·还原剂对酶活影响第100-101页
     ·不同角蛋白酶酶活与底物特异性比较第101-102页
     ·角蛋白生产菌发酵降解角蛋白研究第102-104页
   ·小结第104-105页
 参考文献第105-108页
第4章 角蛋白酶发酵生产过程的优化第108-144页
   ·引言第108页
   ·材料与方法第108-110页
     ·材料第108-109页
       ·供试菌株第108页
       ·主要试剂第108页
       ·培养基第108-109页
       ·主要仪器与设备第109页
     ·方法第109-110页
       ·培养方法第109页
       ·生物量的测定第109页
       ·还原糖测定方法第109页
       ·角蛋白酶活的测定第109页
       ·实验设计与统计分析方法第109-110页
       ·响应面等三维图形的绘制第110页
       ·比生长速率等的计算第110页
   ·结果与讨论第110-138页
     ·角蛋白酶发酵培养基的优化第110-123页
       ·种子培养基的生长特性研究第110-111页
       ·高固含物培养基的生物量检测方法研究第111-112页
       ·单独添加碳源对发酵过程的影响第112-113页
       ·单独添加氮源对发酵过程的影响第113-114页
       ·同时添加碳氮源对发酵过程的影响第114-116页
       ·金属离子对产酶和生长的作用第116-117页
       ·培养基各组份含量的初步确定第117-118页
       ·培养基中重要影响组分的筛选第118-119页
       ·培养基优化的中心组合实验和模型拟合第119-122页
       ·重要因素相互关系的响应面分析第122-123页
     ·角蛋白酶发酵工艺的优化第123-138页
       ·重要培养条件的分析筛选第123-124页
       ·发酵温度对角蛋白酶合成和菌体生长的影响第124-126页
       ·发酵温度对比生长和产酶速率的影响第126-127页
       ·接种量对产酶和菌体生长的影响第127-129页
       ·接种量对比生长速率和产酶速率的影响第129-130页
       ·培养条件中心组合实验和模型拟合第130-133页
       ·培养条件间的相互关系的相应面分析第133-135页
       ·分批添加碳源对发酵的影响第135-137页
       ·分批添加氮源对发酵的影响第137-138页
   ·小结第138-140页
 参考文献第140-144页
第5章 角蛋白酶的酶学研究第144-170页
   ·引言第144页
   ·材料与方法第144-150页
     ·材料第144-145页
       ·供试菌株第144页
       ·主要试剂第144-145页
       ·培养基第145页
       ·主要仪器与设备第145页
     ·方法第145-150页
       ·培养方法第145页
       ·可溶性蛋白测定方法第145-146页
       ·角蛋白酶酶活测定方法第146页
       ·盐析的研究方法第146页
       ·有机溶剂—丙酮沉淀的研究方法第146-147页
       ·Q Sepharose Fast Flow离子交换层析第147页
       ·Sephadex G-75凝胶过滤第147页
       ·蛋白浓缩和SDS—PAGE第147页
       ·纯酶的酶学性质研究方法第147-148页
       ·酶催化的动力学研究方法第148页
       ·羊毛织物处理方法第148页
       ·羊毛织物的参数检测第148-150页
   ·结果与分析第150-166页
     ·角蛋白酶的分离纯化第150-156页
       ·硫酸铵分级沉淀第150-152页
       ·有机溶剂—丙酮沉淀第152-154页
       ·离子交换层析第154页
       ·凝胶过滤分离第154-155页
       ·角蛋白酶分离纯化效果的电泳检测第155-156页
     ·角蛋白酶的酶学性质研究第156-163页
       ·角蛋白酶纯酶的最适温度和热稳定性第156-157页
       ·角蛋白酶纯酶的最适pH和酸碱稳定性第157-158页
       ·不同金属离子对角蛋白酶酶活的影响第158-159页
       ·表面活性剂对角蛋白酶酶活的影响第159页
       ·抑制剂、有机溶剂等对角蛋白酶酶活的影响第159-160页
       ·角蛋白底物的酶解时程曲线第160页
       ·角蛋白酶的底物特异性研究第160-163页
     ·角蛋白酶在羊毛织物后整理中的应用初探第163-166页
       ·角蛋白酶处理对毡缩率的影响第163-164页
       ·角蛋白酶处理的减量率变化第164页
       ·角蛋白处理对撕破强力的影响第164-165页
       ·角蛋白酶处理对定向摩擦效应的影响第165-166页
   ·小结第166-167页
 参考文献第167-170页
第6章 研究成果与展望第170-172页
   ·主要研究成果第170-171页
     ·L-抗坏血酸芳香酸酯酶法合成的主要研究成果第170页
     ·微生物角蛋白酶的主要研究成果第170-171页
   ·本论文的不足之处和后续研究展望第171-172页
     ·L-抗坏血酸芳香酸酯酶法合成研究的不足与展望第171页
     ·角蛋白酶的后续研究的不足与展望第171-172页
缩略词一览表第172-174页
攻读博士学位期间发表的论文及其他成果第174-176页
致谢第176页

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