| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-28页 |
| ·引言 | 第11页 |
| ·蛋白质包涵体体外复性研究 | 第11-17页 |
| ·包涵体的形成 | 第11-13页 |
| ·包涵体的分离纯化和溶解 | 第13-14页 |
| ·蛋白质体外复性条件的选择 | 第14-15页 |
| ·蛋白质体外复性常用方法 | 第15-17页 |
| ·温敏型聚合物 | 第17-24页 |
| ·温敏型聚合物简介 | 第17-18页 |
| ·线性聚N-异丙基丙烯酰胺 | 第18-22页 |
| ·温敏型聚合物在协助蛋白质复性中的应用 | 第22-24页 |
| ·重组人γ-干扰素 | 第24-26页 |
| ·人γ-干扰素 | 第24页 |
| ·重组人γ-干扰素的结构和物化性质 | 第24-25页 |
| ·重组人γ-干扰素包涵体的体外复性 | 第25-26页 |
| ·本文的研究思路和内容 | 第26-28页 |
| 第二章 线性聚N-异丙基丙烯酰胺的制备和温敏性能研究 | 第28-37页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·实验材料和仪器 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·实验仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-30页 |
| ·聚N-异丙基丙烯酰胺的制备 | 第29页 |
| ·聚N-异丙基丙烯酰胺分子量测定 | 第29-30页 |
| ·聚N-异丙基丙烯酰胺的红外光谱表征 | 第30页 |
| ·聚N-异丙基丙烯酰胺LCST测定 | 第30页 |
| ·实验结果及讨论 | 第30-36页 |
| ·聚N-异丙基丙烯酰胺的制备 | 第30页 |
| ·聚N-异丙基丙烯酰胺分子量测定 | 第30-31页 |
| ·聚N-异丙基丙烯酰胺红外光谱表征 | 第31-34页 |
| ·影响聚N-异丙基丙烯酰胺LCST的因素 | 第34-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 聚N-异丙基丙烯酰胺协助溶菌酶复性机理研究 | 第37-52页 |
| ·引言 | 第37-38页 |
| ·实验材料和仪器 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·实验仪器 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·溶菌酶的变性 | 第39页 |
| ·溶菌酶的复性 | 第39页 |
| ·溶菌酶活性测定——F.I.P法 | 第39-40页 |
| ·天然溶菌酶活力 | 第40-41页 |
| ·溶菌酶结构分析——荧光分光光度法 | 第41页 |
| ·实验结果与讨论 | 第41-47页 |
| ·初始溶菌酶浓度对复性的影响 | 第41-42页 |
| ·尿素浓度对复性的影响 | 第42-43页 |
| ·复性温度的影响 | 第43-44页 |
| ·PNIPAM与溶菌酶浓度比对复性的影响 | 第44-45页 |
| ·PNIPAM介导体系与稀释复性的比较 | 第45-47页 |
| ·聚N-异丙基丙烯酰胺协助溶菌酶复性机理探讨 | 第47-50页 |
| ·本章小结 | 第50-52页 |
| 第四章 重组人γ-干扰素包涵体的发酵、纯化和溶解 | 第52-60页 |
| ·引言 | 第52-53页 |
| ·实验材料与仪器 | 第53页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·实验仪器 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·重组人γ-干扰素的发酵 | 第53-54页 |
| ·菌体收集与破碎 | 第54页 |
| ·重组人γ-干扰素包涵体的洗涤纯化 | 第54页 |
| ·重组人γ-干扰素包涵体的溶解 | 第54-55页 |
| ·分析方法 | 第55-56页 |
| ·还原性SDS-PAGE | 第55页 |
| ·蛋白质浓度测定——考马斯亮蓝法 | 第55-56页 |
| ·实验结果与讨论 | 第56-59页 |
| ·重组人γ-干扰素的发酵 | 第56-57页 |
| ·细胞破碎重组人γ-干扰素包涵体的洗涤溶解 | 第57-59页 |
| ·本章小结 | 第59-60页 |
| 第五章 聚N-异丙基丙烯酰胺协助重组人γ-干扰素包涵体复性研究 | 第60-72页 |
| ·引言 | 第60页 |
| ·实验材料和仪器 | 第60-61页 |
| ·实验材料 | 第60-61页 |
| ·实验仪器 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61-65页 |
| ·重组人γ-干扰素的复性 | 第61页 |
| ·重组人γ-干扰素的活性测定 | 第61-64页 |
| ·重组人γ-干扰素复性过程的结构分析 | 第64页 |
| ·非还原性SDS-PAGE | 第64-65页 |
| ·实验结果和讨论 | 第65-70页 |
| ·聚N-异丙基丙烯酰胺的阻聚作用 | 第65页 |
| ·聚N-异丙基丙烯酰胺分子量的影响 | 第65-66页 |
| ·聚N-异丙基酰胺与rhIFN-γ浓度比的影响 | 第66-67页 |
| ·温度对聚N-异丙基酰胺协助复性的影响 | 第67-69页 |
| ·聚N-异丙基丙烯酰胺协助复性rhIFN-γ结构变化 | 第69-70页 |
| ·聚N-异丙基丙烯酰胺协助溶菌酶和重组人γ-干扰素复性的比较 | 第70-71页 |
| ·本章小结 | 第71-72页 |
| 第六章 结论与建议 | 第72-74页 |
| ·结论 | 第72-73页 |
| ·建议 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
