产单核细胞李斯特菌PCR检测方法的建立及溶血素基因的克隆与表达
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 文献综述 | 第9-36页 |
| 第一章 产单核细胞李斯特菌研究进展 | 第9-25页 |
| ·产单核细胞李斯特菌的危害 | 第9-11页 |
| ·LM 的生物学特征 | 第11-13页 |
| ·LM 的形态及培养特性 | 第11-12页 |
| ·LM 的生化特性 | 第12页 |
| ·LM 的理化特性 | 第12-13页 |
| ·LM 传播途径 | 第13页 |
| ·临床症状 | 第13-14页 |
| ·人群临床症状 | 第13-14页 |
| ·动物临床症状 | 第14页 |
| ·LM 的致病机理及其毒力基因 | 第14-19页 |
| ·LM 的致病机理 | 第14-15页 |
| ·LM 的毒力基因 | 第15-19页 |
| ·LM 分型 | 第19-23页 |
| ·LM 的传统表型亚分型法 | 第19-20页 |
| ·LM 的分子亚分型 | 第20-23页 |
| ·LM 作为活疫苗载体的研究进展 | 第23-25页 |
| 第二章 产单核细胞李斯特菌检测技术研究进展 | 第25-36页 |
| ·LM 的检测方法 | 第25-34页 |
| ·传统分离鉴定法 | 第25-26页 |
| ·免疫学检测 | 第26-29页 |
| ·分子生物学检测 | 第29-34页 |
| ·展望 | 第34-36页 |
| 试验研究 | 第36-62页 |
| 第三章 产单核细胞李斯特菌PCR 检测方法的建立 | 第36-41页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·菌种 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·引物的设计与合成 | 第36页 |
| ·特异性试验 | 第36-37页 |
| ·灵敏度试验 | 第37页 |
| ·人工污染样的检测 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-39页 |
| ·PCR 扩增条件优化 | 第38页 |
| ·特异性试验结果 | 第38页 |
| ·灵敏度试验结果 | 第38页 |
| ·人工污染样的检测结果 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第四章 产单核细胞李斯特菌溶血素基因的克隆与表达 | 第41-62页 |
| ·材料 | 第41-45页 |
| ·菌种和载体 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·主要溶液配方 | 第41-45页 |
| ·方法 | 第45-55页 |
| ·细菌DNA 的制备 | 第45页 |
| ·hlyA 基因的扩增 | 第45-46页 |
| ·hlyA 基因的克隆 | 第46-49页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第49-51页 |
| ·重组菌的诱导表达 | 第51-52页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第52-54页 |
| ·重组蛋白的检测 | 第54-55页 |
| ·结果 | 第55-60页 |
| ·引物A PCR 扩增结果 | 第55页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第55页 |
| ·引物B PCR 扩增结果 | 第55页 |
| ·hlyA 表达载体的构建 | 第55-58页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 电泳检测 | 第58-59页 |
| ·重组蛋白可溶性分析及纯化结果 | 第59页 |
| ·重组蛋白的检测 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 缩略语 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72页 |
