摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
文献综述 | 第11-26页 |
第一章 骨髓基质细胞分离培养及诱导分化研究进展 | 第11-26页 |
·骨髓基质细胞的分离培养 | 第11-12页 |
·骨髓基质细胞概述 | 第11页 |
·骨髓基质干细胞分离及鉴定 | 第11-12页 |
·骨髓基质细胞的诱导分化 | 第12-19页 |
·细胞因子的作用 | 第12-13页 |
·化学物质的作用 | 第13页 |
·BMSCs 向神经细胞诱导分化 | 第13-16页 |
·BMSCs 向心肌细胞诱导分化 | 第16-18页 |
·BMSCs 向成软骨细胞诱导分化 | 第18-19页 |
·BMSCs 向成肌细胞、脂肪细胞、血管内皮细胞的诱导分化 | 第19页 |
·骨髓基质细胞的应用进展 | 第19-26页 |
·骨髓基质干细胞在骨组织工程学中的应用 | 第19-23页 |
·MSCs 应用于肌肉、肌腱再生 | 第23-24页 |
·MSC 应用于造血系统 | 第24页 |
·MSC 应用于神经系统 | 第24-26页 |
试验研究 | 第26-49页 |
第二章 猪BMSCS 的分离培养及生物学特性研究 | 第26-33页 |
·材料 | 第26-27页 |
·实验动物 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·主要仪器与设备 | 第26页 |
·细胞培养用试剂 | 第26-27页 |
·方法与步骤 | 第27-28页 |
·猪BMSCs 分离及原代培养 | 第27页 |
·猪BMSCs 传代培养 | 第27页 |
·猪BMSCs 生长曲线、分裂指数曲线和贴壁率的测定 | 第27-28页 |
·猪BMSCs 向成骨细胞诱导 | 第28页 |
·碱性磷酸酶(ALP)染色 | 第28页 |
·细胞免疫化学法鉴定BMSCs | 第28页 |
·衰老细胞染色 | 第28页 |
·结果 | 第28-31页 |
·细胞形态及生长特征 | 第28-29页 |
·猪BMSCs 成活率检测 | 第29页 |
·猪BMSCs 传代培养 | 第29页 |
·猪BMSCs 生长曲线、分裂指数曲线及贴壁率 | 第29页 |
·猪BMSCs 碱性磷酸酶(ALP)染色 | 第29页 |
·猪BMSCs 的免疫化学鉴定 | 第29页 |
·猪BMSCs 的衰老细胞染色结果 | 第29-31页 |
·讨论 | 第31-32页 |
·小结 | 第32-33页 |
第三章 PEGFP-C1-TGF-Β1 真核表达质粒的构建与鉴定 | 第33-43页 |
·材料 | 第33-34页 |
·质粒、细胞及主要试剂 | 第33页 |
·主要试剂配制 | 第33-34页 |
·方法 | 第34-38页 |
·猪TGFβ1 全基因的扩增、克隆及序列测定 | 第34-37页 |
·重组真核表达质粒pEGFP-C1-TGF-β1 的构建 | 第37-38页 |
·结果与分析 | 第38-40页 |
·TGF-β1 基因RT-PCR 鉴定 | 第38-39页 |
·重组质粒pMD18-T -TGF-β1 的酶切、PCR 及序列测定 | 第39-40页 |
·重组真核表达质粒pEGFP-C1-TGF-β1 的鉴定 | 第40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
·小结 | 第42-43页 |
第四章 猪骨髓基质细胞向软骨细胞分化的研究 | 第43-49页 |
·材料 | 第43-44页 |
·主要试剂 | 第43页 |
·软骨细胞诱导分化液 | 第43页 |
·主要仪器与设备 | 第43-44页 |
·方法 | 第44-45页 |
·pEGFP-C1-TGF-β1 质粒纯度和浓度的检测 | 第44页 |
·pEGFP-C1-TGF-β1 质粒转染猪骨髓基质细胞 | 第44-45页 |
·结果 | 第45-46页 |
·pCI-neo-hTERT 质粒纯度和浓度的检测 | 第45页 |
·新霉素(G418)对猪骨髓基质细胞最佳维持浓度的确定 | 第45页 |
·转染细胞形态和特征 | 第45页 |
·分组诱导分化结果 | 第45-46页 |
·Ⅱ型胶原免疫组化染色 | 第46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
·小结 | 第47-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
个人简历 | 第57页 |