| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 上篇 文献综述 | 第15-60页 |
| 第一章 溶杆菌防治植物病害的研究进展 | 第15-39页 |
| 1 分类和鉴定 | 第15-18页 |
| 2 生境及生态学 | 第18页 |
| 3 溶杆菌的拮抗及生防机理 | 第18-25页 |
| ·胞外酶 | 第18-21页 |
| ·次生代谢 | 第21-24页 |
| ·诱导抗性 | 第24页 |
| ·Clp调控的性状 | 第24页 |
| ·三型泌出系统(T3SS) | 第24-25页 |
| 4 生物防治系统 | 第25-28页 |
| 5 菌剂创制 | 第28-29页 |
| 6 前景展望 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-39页 |
| 第二章 细菌群体感应与群体淬灭 | 第39-60页 |
| 1 细菌群体感应 | 第39-44页 |
| ·AHL介导的QS系统 | 第39-42页 |
| ·DSF型QS系统 | 第42页 |
| ·寡肽介导的革兰氏阳性菌中的QS系统 | 第42-43页 |
| ·LuxS/AI-2型QS系统 | 第43-44页 |
| ·AI-3型的QS系统 | 第44页 |
| 2 细菌群体淬灭 | 第44-52页 |
| ·阻断细菌信号分子合成 | 第44-45页 |
| ·利用信号分子类似物作为拮抗物实现细菌群体淬灭 | 第45-46页 |
| ·降解细菌信号分子 | 第46-50页 |
| ·细菌群体淬灭系统在植物病害防治中的应用 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 下篇 研究报告 | 第60-207页 |
| 第一章 产酶溶杆菌OH11新型遗传操作系统的建立及应用 | 第61-90页 |
| 1 材料与方法 | 第64-73页 |
| ·材料 | 第64-67页 |
| ·方法 | 第67-73页 |
| 2. 结果分析 | 第73-83页 |
| ·菌株OH11对抗生素耐受水平分析 | 第73页 |
| ·菌株OH11突变株文库的构建及几丁质酶缺失突变株的筛选 | 第73-74页 |
| ·Arbitrary PCR技术的建立及几丁质酶缺失突变株中插入位点的鉴定 | 第74-75页 |
| ·重组载体PMW91CM和含有chiA内部片段的重组自杀载体的酶切验证 | 第75页 |
| ·chiA插入失活突变株的获得及蔗糖敏感性测试结果 | 第75-78页 |
| ·chiA基因缺失突变株获得 | 第78-80页 |
| ·chiA互补载体和gfp表达载体的构建及验证 | 第80-81页 |
| ·chiA互补菌株及gfp标记菌株的表型观察 | 第81-82页 |
| ·chiA缺失突变株及互补菌株的拮抗活性检测 | 第82-83页 |
| 3 讨论 | 第83-86页 |
| 本章小结 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-90页 |
| 第二章 产酶溶杆菌色素合成相关基因hmgA和acp的克隆与功能分析 | 第90-129页 |
| 1 材料与方法 | 第92-102页 |
| ·材料 | 第92-95页 |
| ·方法 | 第95-102页 |
| 2 结果分析 | 第102-123页 |
| ·色素突变株的筛选及鉴定 | 第102-103页 |
| ·色素突变株中插入位点的鉴定 | 第103-105页 |
| ·含有hmgA内部片段的重组自杀载体的验证 | 第105-106页 |
| ·hmgA插入失活突变株的获得及蔗糖敏感性测试结果 | 第106-108页 |
| ·hmgA和acp双交换突变株获得 | 第108-114页 |
| ·hmgA互补菌株的构建与验证 | 第114-115页 |
| ·acp互补菌株的构建与验证 | 第115-116页 |
| ·hmgA和acp的突变改变了OH11的细胞形态 | 第116页 |
| ·hmgA和acp的突变改变生物膜的形成 | 第116-117页 |
| ·hmgA和acp的突变不改变OH11胞外多糖的产生 | 第117-118页 |
| ·hmgA和acp的突变不改变主要胞外酶的分泌量 | 第118-119页 |
| ·hmgA和acp的突变不改变OH11的拮抗能力 | 第119-121页 |
| ·hmgA突变提高OH11对水稻纹枯病的防效和定殖能力 | 第121页 |
| ·acp突变降低OH11对水稻纹枯病的防效和定殖能力 | 第121-123页 |
| 3 讨论 | 第123-125页 |
| 本章小结 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-129页 |
| 第三章 产酶溶杆菌胞外多糖合成相关基因tonB的克隆与功能分析 | 第129-156页 |
| 1 材料与方法 | 第131-136页 |
| ·材料 | 第131-133页 |
| ·方法 | 第133-136页 |
| 2 结果分析 | 第136-150页 |
| ·胞外多糖缺失突变株的筛选及鉴定 | 第136-137页 |
| ·EPS缺失突变株中转座子插入位点的鉴定 | 第137-139页 |
| ·tonB缺失突变株(ΔtonB)的获得 | 第139-141页 |
| ·tonB互补菌株的构建与验证 | 第141-143页 |
| ·tonB突变改变了OH11的菌落形态,但不改变菌体细胞形态 | 第143页 |
| ·tonB突变降低了菌株OH11的滑行能力 | 第143-144页 |
| ·tonB突变株降低了OH11的生物膜形成能力 | 第144-145页 |
| ·tonB突变使OH11对紫外光更加敏感 | 第145-146页 |
| ·tonB突变不改变OH11的胞外酶产生能力 | 第146-147页 |
| ·tonB突变不改变OH11的拮抗能力 | 第147-148页 |
| ·tonB突变降低了OH11在水稻叶片上的定殖能力及对水稻纹枯病的防效 | 第148-150页 |
| 3 讨论 | 第150-152页 |
| 本章小结 | 第152-153页 |
| 参考文献 | 第153-156页 |
| 第四章 具有降解AHL类信号分子能力的产酶溶杆菌工程菌株的构建与初步应用 | 第156-207页 |
| 第一节 利用lpp启动子实现aiiA基因在产酶溶杆菌中重组表达 | 第159-177页 |
| 1 材料与方法 | 第159-166页 |
| ·材料 | 第159-161页 |
| ·方法 | 第161-166页 |
| 2 结果分析 | 第166-175页 |
| ·融合片段Plpp-aiiA的构建 | 第166页 |
| ·重组载体pBBRA的构建及工程菌株OH11A的获得 | 第166-167页 |
| ·菌株OH11A中aiiA的转录分析 | 第167-168页 |
| ·菌株OH11A能显著降解外源AHL类信号分子 | 第168-169页 |
| ·菌株OH11A能降低软腐病菌对大白菜的致病性,不改变病菌在寄主组织中的繁殖数量 | 第169-171页 |
| ·菌株OH11A降低软腐病菌对仙人掌的致病性 | 第171-172页 |
| ·菌株OH11A能降低西瓜果斑病菌对甜瓜苗的致病性 | 第172-173页 |
| ·aiiA的导入不改变OH11胞外酶的产生和对油菜菌核病菌及辣椒疫霉的拮抗活性 | 第173-175页 |
| 3 讨论 | 第175-177页 |
| 第二节 以lacZ为报告基因的启动子探针载体的构建及应用 | 第177-190页 |
| 1 材料与方法 | 第177-180页 |
| ·材料 | 第177-178页 |
| ·方法 | 第178-180页 |
| 2 结果分析 | 第180-188页 |
| ·lacZ基因片断的扩增及启动子探针的构建 | 第180-182页 |
| ·OH11基因DNA启动子基因文库的构建及强启动子片断的克隆 | 第182-184页 |
| ·pBBRLACZRl中外源插入片段的测序及启动子功能片段分析 | 第184-186页 |
| ·启动子功能片段的亚克隆及验证 | 第186-188页 |
| 3 讨论 | 第188-190页 |
| 第三节 具有降解AHL类信号分子能力的产酶溶杆菌无标记工程 | 第190-201页 |
| 1 材料与方法 | 第190-194页 |
| ·材料 | 第190-191页 |
| ·方法 | 第191-194页 |
| 2 结果分析 | 第194-199页 |
| ·融合片段PB500-aiiA的构建 | 第194页 |
| ·重组载体pEX18PAT的构建 | 第194-195页 |
| ·无标记工程菌株OH11PA的获得 | 第195-196页 |
| ·菌株OH11PA能显著降解信号分子AHLA | 第196-198页 |
| ·菌株OH11PA能降低软腐病菌对大白菜的致病性 | 第198-199页 |
| 3 讨论 | 第199-201页 |
| 本章小结 | 第201-202页 |
| 参考文献 | 第202-207页 |
| 全文总结 | 第207-209页 |
| 本论文创新点 | 第209-211页 |
| 攻读博士学位期间上传GENBANK的基因序列 | 第211-213页 |
| 发表的论文 | 第213-215页 |
| 致谢 | 第215页 |
