| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-33页 |
| ·葡聚糖概述 | 第19-20页 |
| ·葡聚糖对制糖工业的影响及对策 | 第20-26页 |
| ·制糖工业中的葡聚糖 | 第20-21页 |
| ·葡聚糖对制糖工业的负面影响 | 第21-22页 |
| ·制糖工业中葡聚糖的形成与预防 | 第22-23页 |
| ·制糖工业中葡聚糖的清除 | 第23页 |
| ·制糖工业中葡聚糖的测定 | 第23-25页 |
| ·右旋糖酐的制备与应用 | 第25-26页 |
| ·a-葡聚糖酶的性质及研究进展 | 第26-30页 |
| ·葡聚糖酶 | 第26-27页 |
| ·a-葡聚糖酶的性质 | 第27-29页 |
| ·a-葡聚糖酶的研究进展 | 第29-30页 |
| ·项目研究内容 | 第30-33页 |
| ·选题的目的意义 | 第30-31页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第31-33页 |
| 第二章 高效分泌表达a-葡聚糖酶工程菌的构建与筛选 | 第33-45页 |
| ·材料与仪器 | 第33-35页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·培养基以及各种溶液 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-38页 |
| ·a-葡聚糖酶基因的克隆 | 第35页 |
| ·质粒pPICZaA-DEX的构建 | 第35-36页 |
| ·工程菌X-33/pPICZaA-DEX的构建和筛选 | 第36-37页 |
| ·质粒pGAPZaA-DEX的构建 | 第37页 |
| ·工程菌KM71H/pGAPZaA-DEX的构建和筛选 | 第37-38页 |
| ·结果与讨论 | 第38-44页 |
| ·a-葡聚糖酶基因的克隆 | 第38-39页 |
| ·质粒pPICZaA-DEX的构建 | 第39页 |
| ·工程菌X-33/pPICZaA-DEX的构建和筛选 | 第39-42页 |
| ·质粒pGAPZaA-DEX的构建 | 第42-43页 |
| ·工程菌KM71H/pGAPZaA-DEX的构建和筛选 | 第43-44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 第三章 毕赤酵母工程菌产a-葡聚糖酶的研究 | 第45-73页 |
| ·材料与仪器 | 第45-49页 |
| ·实验材料 | 第45-47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·培养基以及各种溶液 | 第47-49页 |
| ·实验方法 | 第49-54页 |
| ·工程菌X-33/pPICZaA-DEX的摇瓶发酵 | 第49页 |
| ·产酶培养基的优化 | 第49页 |
| ·温度、溶氧、初始pH、接种量对产酶的影响 | 第49-50页 |
| ·诱导阶段甲醇浓度和补料间隔时间的影响 | 第50页 |
| ·发酵罐流加培养工程菌X-33/pPICZaA-DEX产酶 | 第50-53页 |
| ·工程菌KM71H/pGAPZaA-DEX的摇瓶发酵 | 第53页 |
| ·发酵罐流加培养工程菌KM71H/pGAPZaA-DEX产酶 | 第53-54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-71页 |
| ·工程菌株X-33/pPICZaA-DEX生长和产酶曲线 | 第54-55页 |
| ·产酶培养基的优化 | 第55-56页 |
| ·温度、溶氧、初始pH、接种量对产酶的影响 | 第56-60页 |
| ·诱导阶段甲醇浓度和补料间隔时间的影响 | 第60-62页 |
| ·发酵罐流加培养X-33/pPICZaA-DEX产酶 | 第62-68页 |
| ·工程菌KM71H/pGAPZaA-DEX生长和产酶曲线 | 第68页 |
| ·发酵罐流加培养KM71H/pGAPZaA-DEX产酶 | 第68-71页 |
| ·本章小结 | 第71-73页 |
| 第四章 a-葡聚糖特异性单克隆抗体的研究 | 第73-83页 |
| ·材料与仪器 | 第73-74页 |
| ·实验材料 | 第73-74页 |
| ·主要仪器 | 第74页 |
| ·实验方法 | 第74-76页 |
| ·a-葡聚糖抗体的制备 | 第74-76页 |
| ·抗体特异性的鉴定 | 第76页 |
| ·a-葡聚糖竞争ELISA标准曲线的建立 | 第76页 |
| ·结果与讨论 | 第76-81页 |
| ·Dextran T-40-BSA交联物的制备 | 第76-77页 |
| ·血清效价测定 | 第77-78页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第78-79页 |
| ·单抗腹水的效价测定 | 第79页 |
| ·抗体特异性鉴定 | 第79-80页 |
| ·a-葡聚糖抑制标准曲线 | 第80-81页 |
| ·本章小结 | 第81-83页 |
| 第五章 a-葡聚糖定量检测试剂盒的研制 | 第83-97页 |
| ·材料与仪器 | 第83-84页 |
| ·实验材料 | 第83页 |
| ·主要仪器 | 第83-84页 |
| ·实验方法 | 第84-87页 |
| ·抗体的生产 | 第84页 |
| ·抗体的纯化 | 第84页 |
| ·a-葡聚糖检测试剂标准品配制 | 第84页 |
| ·比浊反应抗体的选择 | 第84-85页 |
| ·比浊反应时间特性研究 | 第85页 |
| ·a-葡聚糖检测体系条件优化 | 第85页 |
| ·a-葡聚糖比浊反应体系特性研究 | 第85-87页 |
| ·结果与讨论 | 第87-95页 |
| ·抗体的纯化 | 第87-88页 |
| ·比浊反应抗体的选择 | 第88-89页 |
| ·比浊反应时间特性研究 | 第89页 |
| ·a-葡聚糖检测体系条件优化 | 第89-91页 |
| ·a-葡聚糖比浊反应体系特性研究 | 第91-95页 |
| ·a-葡聚糖免疫沉淀比浊法反应体系的优化 | 第95页 |
| ·本章小结 | 第95-97页 |
| 第六章 a-葡聚糖酶的酶学性质及其稳定性研究 | 第97-109页 |
| ·材料与仪器 | 第97-98页 |
| ·实验材料 | 第97页 |
| ·主要仪器 | 第97-98页 |
| ·实验方法 | 第98-99页 |
| ·a-葡聚糖酶的分离纯化和酶学性质表征 | 第98-99页 |
| ·结果与讨论 | 第99-106页 |
| ·a-葡聚糖酶的分离纯化和酶学性质表征 | 第99-106页 |
| ·本章小结 | 第106-109页 |
| 第七章 a-葡聚糖酶在制糖过程中的应用研究 | 第109-121页 |
| ·材料与仪器 | 第109-110页 |
| ·实验材料 | 第109页 |
| ·主要仪器 | 第109-110页 |
| ·实验方法 | 第110-111页 |
| ·a-葡聚糖酶在实验室的应用研究 | 第110-111页 |
| ·a-葡聚糖酶在制糖过程中的应用研究 | 第111页 |
| ·结果与讨论 | 第111-119页 |
| ·a-葡聚糖酶在实验室的应用研究 | 第111-117页 |
| ·a-葡聚糖酶在制糖过程中的应用研究 | 第117-119页 |
| ·本章小结 | 第119-121页 |
| 第八章 a-葡聚糖酶在合成微分子右旋糖酐中的应用 | 第121-139页 |
| ·材料与仪器 | 第121-122页 |
| ·实验材料 | 第121页 |
| ·主要仪器 | 第121-122页 |
| ·培养基以及各种溶液 | 第122页 |
| ·实验方法 | 第122-125页 |
| ·摇瓶培养 | 第122页 |
| ·5L发酵罐发酵 | 第122-123页 |
| ·分子量控制方法 | 第123页 |
| ·分离纯化 | 第123页 |
| ·分析方法 | 第123-125页 |
| ·结果与讨论 | 第125-136页 |
| ·摇瓶培养优化工艺 | 第125-130页 |
| ·5L发酵罐发酵产右旋糖酐 | 第130-135页 |
| ·产物右旋糖酐的分离纯化 | 第135-136页 |
| ·本章小结 | 第136-139页 |
| 结论 | 第139-141页 |
| 参考文献 | 第141-150页 |
| 攻读学位期间发表论文及其他成果 | 第150-153页 |
| 致谢 | 第153-154页 |