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α-葡聚糖酶的基因工程菌构建、发酵及其应用研究

摘要第1-7页
Abstract第7-19页
第一章 绪论第19-33页
   ·葡聚糖概述第19-20页
   ·葡聚糖对制糖工业的影响及对策第20-26页
     ·制糖工业中的葡聚糖第20-21页
     ·葡聚糖对制糖工业的负面影响第21-22页
     ·制糖工业中葡聚糖的形成与预防第22-23页
     ·制糖工业中葡聚糖的清除第23页
     ·制糖工业中葡聚糖的测定第23-25页
     ·右旋糖酐的制备与应用第25-26页
   ·a-葡聚糖酶的性质及研究进展第26-30页
     ·葡聚糖酶第26-27页
     ·a-葡聚糖酶的性质第27-29页
     ·a-葡聚糖酶的研究进展第29-30页
   ·项目研究内容第30-33页
     ·选题的目的意义第30-31页
     ·研究内容和技术路线第31-33页
第二章 高效分泌表达a-葡聚糖酶工程菌的构建与筛选第33-45页
   ·材料与仪器第33-35页
     ·实验材料第33-34页
     ·主要仪器第34页
     ·培养基以及各种溶液第34-35页
   ·实验方法第35-38页
     ·a-葡聚糖酶基因的克隆第35页
     ·质粒pPICZaA-DEX的构建第35-36页
     ·工程菌X-33/pPICZaA-DEX的构建和筛选第36-37页
     ·质粒pGAPZaA-DEX的构建第37页
     ·工程菌KM71H/pGAPZaA-DEX的构建和筛选第37-38页
   ·结果与讨论第38-44页
     ·a-葡聚糖酶基因的克隆第38-39页
     ·质粒pPICZaA-DEX的构建第39页
     ·工程菌X-33/pPICZaA-DEX的构建和筛选第39-42页
     ·质粒pGAPZaA-DEX的构建第42-43页
     ·工程菌KM71H/pGAPZaA-DEX的构建和筛选第43-44页
   ·本章小结第44-45页
第三章 毕赤酵母工程菌产a-葡聚糖酶的研究第45-73页
   ·材料与仪器第45-49页
     ·实验材料第45-47页
     ·主要仪器第47页
     ·培养基以及各种溶液第47-49页
   ·实验方法第49-54页
     ·工程菌X-33/pPICZaA-DEX的摇瓶发酵第49页
     ·产酶培养基的优化第49页
     ·温度、溶氧、初始pH、接种量对产酶的影响第49-50页
     ·诱导阶段甲醇浓度和补料间隔时间的影响第50页
     ·发酵罐流加培养工程菌X-33/pPICZaA-DEX产酶第50-53页
     ·工程菌KM71H/pGAPZaA-DEX的摇瓶发酵第53页
     ·发酵罐流加培养工程菌KM71H/pGAPZaA-DEX产酶第53-54页
   ·结果与讨论第54-71页
     ·工程菌株X-33/pPICZaA-DEX生长和产酶曲线第54-55页
     ·产酶培养基的优化第55-56页
     ·温度、溶氧、初始pH、接种量对产酶的影响第56-60页
     ·诱导阶段甲醇浓度和补料间隔时间的影响第60-62页
     ·发酵罐流加培养X-33/pPICZaA-DEX产酶第62-68页
     ·工程菌KM71H/pGAPZaA-DEX生长和产酶曲线第68页
     ·发酵罐流加培养KM71H/pGAPZaA-DEX产酶第68-71页
   ·本章小结第71-73页
第四章 a-葡聚糖特异性单克隆抗体的研究第73-83页
   ·材料与仪器第73-74页
     ·实验材料第73-74页
     ·主要仪器第74页
   ·实验方法第74-76页
     ·a-葡聚糖抗体的制备第74-76页
     ·抗体特异性的鉴定第76页
     ·a-葡聚糖竞争ELISA标准曲线的建立第76页
   ·结果与讨论第76-81页
     ·Dextran T-40-BSA交联物的制备第76-77页
     ·血清效价测定第77-78页
     ·杂交瘤细胞株的建立第78-79页
     ·单抗腹水的效价测定第79页
     ·抗体特异性鉴定第79-80页
     ·a-葡聚糖抑制标准曲线第80-81页
   ·本章小结第81-83页
第五章 a-葡聚糖定量检测试剂盒的研制第83-97页
   ·材料与仪器第83-84页
     ·实验材料第83页
     ·主要仪器第83-84页
   ·实验方法第84-87页
     ·抗体的生产第84页
     ·抗体的纯化第84页
     ·a-葡聚糖检测试剂标准品配制第84页
     ·比浊反应抗体的选择第84-85页
     ·比浊反应时间特性研究第85页
     ·a-葡聚糖检测体系条件优化第85页
     ·a-葡聚糖比浊反应体系特性研究第85-87页
   ·结果与讨论第87-95页
     ·抗体的纯化第87-88页
     ·比浊反应抗体的选择第88-89页
     ·比浊反应时间特性研究第89页
     ·a-葡聚糖检测体系条件优化第89-91页
     ·a-葡聚糖比浊反应体系特性研究第91-95页
     ·a-葡聚糖免疫沉淀比浊法反应体系的优化第95页
   ·本章小结第95-97页
第六章 a-葡聚糖酶的酶学性质及其稳定性研究第97-109页
   ·材料与仪器第97-98页
     ·实验材料第97页
     ·主要仪器第97-98页
   ·实验方法第98-99页
     ·a-葡聚糖酶的分离纯化和酶学性质表征第98-99页
   ·结果与讨论第99-106页
     ·a-葡聚糖酶的分离纯化和酶学性质表征第99-106页
   ·本章小结第106-109页
第七章 a-葡聚糖酶在制糖过程中的应用研究第109-121页
   ·材料与仪器第109-110页
     ·实验材料第109页
     ·主要仪器第109-110页
   ·实验方法第110-111页
     ·a-葡聚糖酶在实验室的应用研究第110-111页
     ·a-葡聚糖酶在制糖过程中的应用研究第111页
   ·结果与讨论第111-119页
     ·a-葡聚糖酶在实验室的应用研究第111-117页
     ·a-葡聚糖酶在制糖过程中的应用研究第117-119页
   ·本章小结第119-121页
第八章 a-葡聚糖酶在合成微分子右旋糖酐中的应用第121-139页
   ·材料与仪器第121-122页
     ·实验材料第121页
     ·主要仪器第121-122页
     ·培养基以及各种溶液第122页
   ·实验方法第122-125页
     ·摇瓶培养第122页
     ·5L发酵罐发酵第122-123页
     ·分子量控制方法第123页
     ·分离纯化第123页
     ·分析方法第123-125页
   ·结果与讨论第125-136页
     ·摇瓶培养优化工艺第125-130页
     ·5L发酵罐发酵产右旋糖酐第130-135页
     ·产物右旋糖酐的分离纯化第135-136页
   ·本章小结第136-139页
结论第139-141页
参考文献第141-150页
攻读学位期间发表论文及其他成果第150-153页
致谢第153-154页

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