| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| ·性别控制的必要性及研究进展 | 第13-15页 |
| ·性别控制的必要性 | 第13页 |
| ·性别控制技术的研究进展 | 第13-15页 |
| ·PCR 技术方法的类型及引物设计 | 第15-18页 |
| ·常规PCR 与多重PCR | 第15-16页 |
| ·巢式PCR | 第16-17页 |
| ·两温度梯度PCR | 第17页 |
| ·PCR 引物设计 | 第17-18页 |
| ·PCR 技术应用前景与展望 | 第18页 |
| ·本项目立题的目的和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 两温度梯度快速PCR 方法的探索及优化 | 第20-31页 |
| ·引言 | 第20页 |
| ·试验材料 | 第20-22页 |
| ·血液、精液和毛囊的采集 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| ·主要试剂和酶 | 第21-22页 |
| ·试验方法 | 第22-24页 |
| ·主要试剂的配制 | 第22页 |
| ·血液、毛囊、精子DNA 模板的制备 | 第22-23页 |
| ·引物的设计与合成 | 第23页 |
| ·PCR 扩增程序 | 第23-24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第24页 |
| ·实验结果与分析 | 第24-29页 |
| ·两温度梯度PCR 方法扩增能力的探索 | 第24-26页 |
| ·两温度梯度PCR 反应体系的优化 | 第26-28页 |
| ·不同聚合酶和实验仪器对两温度梯度PCR 的影响 | 第28-29页 |
| ·两温度梯度快速PCR 在牛性别鉴定中的有效性检验 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 利用单精子快速PCR 检测牛X、Y 精液的纯度 | 第31-43页 |
| ·引言 | 第31页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·血液、精液的采集 | 第31-32页 |
| ·仪器设备 | 第32页 |
| ·试剂和酶 | 第32页 |
| ·试验方法 | 第32-36页 |
| ·主要试剂的配制 | 第32页 |
| ·引物设计 | 第32-33页 |
| ·血液DNA 模板的PCR 性别鉴定分析 | 第33-34页 |
| ·性控精液或常规冷冻精液的洗涤 | 第34页 |
| ·大量精子DNA 模板的制备及PCR 反应 | 第34-36页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第36页 |
| ·实验结果与分析 | 第36-41页 |
| ·牛血液基因组DNA 和常规冷冻精液PCR 扩增结果 | 第36-37页 |
| ·牛和人血液基因组DNA 模板的扩增结果 | 第37页 |
| ·常规精液的单精子快速PCR 扩增结果 | 第37-38页 |
| ·性控精液X-精子的单精子快速PCR 扩增结果 | 第38-39页 |
| ·性控精液Y-精子的单精子快速PCR 扩增结果 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 成纤维细胞和胚胎细胞的快速PCR 性别鉴定 | 第43-50页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·成纤维细胞的获取和DNA 模板的制备 | 第43-44页 |
| ·胚胎细胞的获取和DNA 模板的制备 | 第44页 |
| ·试剂盒的制备 | 第44页 |
| ·引物设计 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-45页 |
| ·成纤维细胞的 PCR 反应 | 第44-45页 |
| ·胚胎细胞DNA 为模板进行的PCR 反应 | 第45页 |
| ·试剂盒的胚胎性别鉴定检测分析 | 第45页 |
| ·实验结果与分析 | 第45-48页 |
| ·成纤维细胞PCR 性别鉴定结果 | 第45-46页 |
| ·胚胎细胞PCR 性别鉴定结果 | 第46-47页 |
| ·试剂盒PCR 性别鉴定结果 | 第47页 |
| ·试剂盒冻存后PCR 性别鉴定结果 | 第47-48页 |
| ·单重PCR 方法胚胎性别鉴定的部分结果 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简历 | 第58页 |
