| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-21页 |
| ·研究目的及意义 | 第14页 |
| ·国内外研究现状 | 第14-20页 |
| ·病毒的发展进程 | 第14-15页 |
| ·病毒的基因组结构特点 | 第15页 |
| ·病毒的分类特征 | 第15-16页 |
| ·病毒的亚群特性 | 第16页 |
| ·病毒的流行病学特点 | 第16-17页 |
| ·AL 的诊断 | 第17-19页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第17页 |
| ·琼脂双向扩散试验 | 第17页 |
| ·免疫荧光试验 | 第17-18页 |
| ·双抗夹心ELISA 试验 | 第18页 |
| ·间接补体结合试验 | 第18页 |
| ·PCR 方法 | 第18-19页 |
| ·AL 的遗传抗性 | 第19-20页 |
| ·B-F 基因 | 第19-20页 |
| ·B-L 基因 | 第20页 |
| ·B-G 基因 | 第20页 |
| ·Rfp-Y 基因 | 第20页 |
| ·研究内容和方法 | 第20-21页 |
| 第二章 研究内容 | 第21-48页 |
| ·试验材料和方法 | 第21-32页 |
| ·试验动物、感受态细胞和病毒 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第21-22页 |
| ·病毒的增殖和半数组织感染量（TCID50）的测定 | 第22页 |
| ·重组质粒的构建 | 第22-24页 |
| ·引物的设计与合成 | 第22页 |
| ·病毒RNA 和鸡胚基因组的提取 | 第22-23页 |
| ·病毒RNA 反转录 | 第23页 |
| ·基因的PCR 扩增 | 第23-24页 |
| ·PCR 产物的连接 | 第24页 |
| ·转化 | 第24页 |
| ·阳性重组克隆的筛选和鉴定 | 第24页 |
| ·斑点杂交检测方法的建立 | 第24-26页 |
| ·地高辛标记探针的制备 | 第24-25页 |
| ·斑点杂交检测方法 | 第25页 |
| ·斑点杂交条件的优化 | 第25-26页 |
| ·斑点杂交的特异性试验 | 第26页 |
| ·斑点杂交的敏感性试验 | 第26页 |
| ·现地应用及其符合性检测 | 第26页 |
| ·内外源性ALV 三重鉴别PCR 检测方法的建立 | 第26-27页 |
| ·三重PCR 反应的优化 | 第26-27页 |
| ·三重PCR 反应的特异性试验 | 第27页 |
| ·三重PCR 反应的敏感性试验 | 第27页 |
| ·三重PCR 的初步应用 | 第27页 |
| ·A、B 亚群ALV 二重荧光定量RT-PCR 方法的建立 | 第27-30页 |
| ·引物和探针的设计与合成 | 第28页 |
| ·RAV-1 和β-actin 基因的RT-PCR 扩增 | 第28页 |
| ·RAV-1 和β-actin 基因的克隆 | 第28-29页 |
| ·二重荧光定量RT-PCR 反应的优化 | 第29页 |
| ·二重荧光定量RT-PCR 的标准曲线的构建 | 第29-30页 |
| ·二重荧光定量RT-PCR 的特异性试验 | 第30页 |
| ·二重荧光定量RT-PCR 和常规RT-PCR 的灵敏度比较 | 第30页 |
| ·二重荧光定量RT-PCR 的重复性试验 | 第30页 |
| ·二重荧光定量RT-PCR 方法的临床病料检测 | 第30页 |
| ·G1、G5、G6、G8系SPF雏鸡的ALV人工感染试验 | 第30-32页 |
| ·G1、G5、G6、G8 系SPF 雏鸡的攻毒 | 第30-31页 |
| ·临床症状观察及病变指数的测定 | 第31页 |
| ·死亡率的测定 | 第31页 |
| ·相对体重增长率的测定及动态曲线的绘制 | 第31页 |
| ·死亡鸡各组织脏器的PCR 检测 | 第31页 |
| ·外周血血清ALV 抗体效价的测定及动态曲线的绘制 | 第31页 |
| ·外周血淋巴细胞中病毒载量的测定及动态曲线的绘制 | 第31-32页 |
| ·G1、G5、G6 系SPF 鸡胚的人工感染试验 | 第32页 |
| ·G1、G5、G6 系SPF 鸡胚的攻毒 | 第32页 |
| ·各鸡系肝脏细胞中病毒载量的测定 | 第32页 |
| ·各鸡系病毒的阳性检测率的测定 | 第32页 |
| ·试验结果 | 第32-48页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的测序 | 第33页 |
| ·斑点杂交 | 第33-35页 |
| ·斑点杂交最佳反应条件的确定 | 第33页 |
| ·斑点杂交的特异性试验 | 第33页 |
| ·斑点杂交的敏感性试验 | 第33-34页 |
| ·现地应用和符合性检测 | 第34-35页 |
| ·三重PCR 反应 | 第35-37页 |
| ·三重 PCR 的最佳反应条件的确定 | 第35页 |
| ·三重PCR反应的特异性试验 | 第35页 |
| ·三重PCR反应的敏感性试验 | 第35-36页 |
| ·现地样品的检测 | 第36-37页 |
| ·二重荧光定量RT-PCR 方法 | 第37-40页 |
| ·RAV-1 和β-actin 基因的重组质粒的PCR 鉴定 | 第37页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第37页 |
| ·二重荧光定量RT-PCR 方法各反应条件的确定 | 第37页 |
| ·二重荧光定量RT-PCR 的标准曲线的构建 | 第37-38页 |
| ·二重荧光定量RT-PCR 的特异性试验 | 第38页 |
| ·二重荧光定量RT-PCR 和常规RT-PCR 的敏感性试验 | 第38-39页 |
| ·二重荧光定量RT-PCR 的重复性试验 | 第39-40页 |
| ·现地样品的检测 | 第40页 |
| ·G1、G5、G6 及 G8 系雏鸡的人工感染实验 | 第40-46页 |
| ·试验鸡临床症状及病变指数的测定 | 第40页 |
| ·死亡率的测定及死亡鸡的剖检病变 | 第40-41页 |
| ·绝对体重和相对体重增长率的测定及动态曲线的绘制 | 第41-42页 |
| ·死亡鸡各组织脏器的PCR 检测 | 第42-44页 |
| ·各鸡系抗体阳性率和抗体效价的测定及动态曲线的绘制 | 第44-45页 |
| ·各鸡系平均病毒载量的测定及动态曲线的绘制 | 第45-46页 |
| ·G1、G5、G6 鸡系 SPF 鸡胚的人工感染实验 | 第46-48页 |
| ·各鸡系鸡胚肝脏细胞中病毒载量和病毒阳性检测率的测定 | 第46页 |
| ·攻毒后各鸡系 SPF 鸡胚的肝脏病毒载量 | 第46-47页 |
| ·攻毒后各鸡系 SPF 鸡胚的病毒阳性检测率 | 第47-48页 |
| 第三章 结论与讨论 | 第48-53页 |
| ·讨论 | 第48-52页 |
| ·斑点杂交检测技术在 ALV 临床检测中的应用 | 第48页 |
| ·内、外源性 ALV 鉴别诊断的意义 | 第48页 |
| ·二重荧光定量 RT-PCR 与常规 RT-PCR 方法在检测 ALV 中的比较 | 第48-49页 |
| ·死亡、病变指数与抗病性的相关性 | 第49页 |
| ·生长发育与抗病性的相关性 | 第49-50页 |
| ·ALV 在不同组织中的分布与感染时间 | 第50页 |
| ·体液免疫与抗病性的相关性 | 第50-51页 |
| ·病毒复制与抗病性的相关性 | 第51页 |
| ·G1、G5 和G6 系病毒载量和抗体效价的关系 | 第51-52页 |
| ·全文结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
