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羊口蹄疫病毒Asia 1型多表位疫苗的研制

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
第一章 前言第13-26页
   ·研究的目的和意义第13页
   ·国内外研究现状第13-25页
     ·口蹄疫和口蹄疫病毒第13-14页
     ·口蹄疫病毒疫苗研究概况第14-19页
     ·口蹄疫病毒表位疫苗研究进展第19-25页
   ·研究内容和方法第25-26页
第二章 羊IgG 重链恒定区基因、Asia I 型口蹄疫病毒VP1 和3D 基因的克隆第26-37页
   ·实验材料第26-28页
     ·病毒、组织材料、载体及菌株第26页
     ·酶和主要试剂第26页
     ·实验所用溶液及其配制第26-28页
     ·仪器第28页
   ·实验方法第28-32页
     ·引物设计与合成第28-29页
     ·RNA 的提取第29页
     ·RT-PCR第29-30页
     ·PCR 产物的回收与纯化第30页
     ·目的基因的克隆第30-31页
     ·重组质粒的鉴定第31-32页
   ·实验结果第32-36页
     ·基因扩增第32页
     ·基因克隆第32-33页
     ·基因序列测定第33-36页
   ·讨论第36-37页
第三章 Asia I 型口蹄疫病毒中和表位与羊IgG 重链恒定区的融合蛋白和3D 蛋白的原核表达第37-58页
   ·试验材料第37-43页
     ·感受态细胞和原核表达载体第37页
     ·酶和主要试剂第37页
     ·实验所用溶液及其配制第37-43页
     ·实验仪器第43页
   ·实验方法第43-50页
     ·FMDV 抗原表位编码基因的合成第43页
     ·引物设计合成第43页
     ·原核表达重组质粒的构建第43-47页
     ·重组质粒的诱导表达第47-48页
     ·表达蛋白质的纯化第48-50页
     ·表达蛋白的Western blotting 分析第50页
   ·实验结果第50-56页
     ·FMDV 抗原表位基因的设计、化学合成第50-51页
     ·表位基因片段获得和表达用引物 PCR 扩增产物第51页
     ·重组表达质粒的鉴定第51-52页
     ·蛋白表达、可溶性分析与纯化第52页
     ·表达蛋白的Western blotting 分析第52-56页
   ·讨论第56-58页
第四章 绵羊 IgG 重链恒定区蛋白携带 Asia 1 型 FMDV 中和表位融合蛋白免疫原性的测定第58-69页
   ·实验材料第58页
     ·病毒、细胞和实验动物第58页
     ·主要试剂第58页
   ·实验方法第58-62页
     ·抗原制备第58-59页
     ·动物免疫第59页
     ·血清抗体动态监测第59-60页
     ·中和抗体效价测定第60页
     ·动物保护性试验第60-61页
     ·免疫效果的细胞水平检测第61-62页
     ·绵羊免疫效果监测第62页
   ·实验结果第62-67页
     ·豚鼠血清抗体的测定第62-63页
     ·豚鼠血清中和抗体效价的测定第63-64页
     ·豚鼠攻毒试验第64-65页
     ·淋巴细胞增殖能力第65页
     ·疫苗免疫绵羊的抗体效价检测第65-67页
   ·讨论第67-69页
第五章 全文结论第69-70页
参考文献第70-75页
致谢第75-77页
附录第77-79页
作者简历第79页

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