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马铃薯α-淀粉酶基因和黑曲霉γ-淀粉酶基因的分子克隆及其在毕赤酵母菌中的表达

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
英文缩写词表(Abbreviations)第12-14页
第1章 绪论第14-37页
   ·淀粉酶研究进展第14-27页
     ·淀粉的性质及分类第14页
     ·淀粉酶第14-27页
   ·毕赤酵母表达系统的研究第27-32页
     ·毕赤酵母的生物学特征第27页
     ·赤酵母表达系统的特点第27-28页
     ·赤酵母表达系统的组成第28-31页
     ·毕赤酵母表达外源蛋白的研究第31-32页
   ·燃料乙醇生产状况与存在问题第32-35页
     ·燃料乙醇生产现状及意义第32-33页
     ·传统的发酵工艺及存在问题第33-34页
     ·高淀粉含量马铃薯在燃料酒精发酵中的应用前景第34-35页
   ·本课题研究的目的和意义第35页
   ·本文构想第35-37页
第2章 马铃薯α-淀粉酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达第37-74页
   ·材料第37-44页
     ·植物材料、菌种和质粒第37页
     ·主要试剂第37-38页
     ·主要仪器第38页
     ·培养基与缓冲液第38-44页
   ·方法第44-57页
     ·马铃薯α-淀粉酶基因的克隆及序列分析第44-49页
     ·马铃薯α-淀粉酶成熟肽基因在毕赤酵母中的表达第49-56页
     ·重组马铃薯α-淀粉酶粗酶的酶学性质的研究第56-57页
   ·结果第57-72页
     ·马铃薯总RNA的提取第57-58页
     ·RT-PCR扩增α-淀粉酶基因第58页
     ·α-淀粉酶基因的克隆及鉴定第58-59页
     ·α-淀粉酶基因测序及序列分析结果第59-64页
     ·α-淀粉酶成熟肽基因的克隆第64-65页
     ·含α-淀粉酶成熟肽基因的酵母重组质粒的构建及鉴定第65-67页
     ·α-淀粉酶成熟肽基因在毕赤酵母GS115中的表达第67-69页
     ·α-淀粉酶酶学性质分析第69-72页
   ·讨论第72页
   ·本章小结第72-74页
第3章 黑曲霉γ-淀粉酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达第74-98页
   ·材料第74-75页
     ·菌种和质粒第74页
     ·主要试剂第74页
     ·主要仪器第74页
     ·培养基与缓冲液第74-75页
   ·方法第75-83页
     ·黑曲霉γ-淀粉酶基因的克隆第75-79页
     ·黑曲霉γ-淀粉酶基因在毕赤酵母中的表达第79-82页
     ·重组黑曲霉γ-淀粉酶粗酶的酶学性质的研究第82-83页
   ·结果第83-96页
     ·黑曲霉总RNA的提取第83页
     ·RT-PCR扩增γ-淀粉酶基因第83-84页
     ·γ-淀粉酶基因的克隆及鉴定第84-86页
     ·γ-淀粉酶基因测序及序列分析结果第86-90页
     ·含γ-淀粉酶基因(amyc)的酵母重组质粒的构建及鉴定第90-91页
     ·γ-淀粉酶基因(amyc)在毕赤酵母GS115中的表达第91-93页
     ·γ-淀粉酶酶学性质分析第93-96页
   ·讨论第96-97页
   ·本章小结第97-98页
第4章 重组α-淀粉酶及重组γ-淀粉酶毕赤酵母的混合厌氧发酵第98-106页
   ·材料第98-99页
     ·菌种及原料第98页
     ·主要试剂第98页
     ·培养基第98-99页
     ·主要仪器第99页
   ·方法第99-102页
     ·菌种活化、培养第99-100页
     ·马铃薯淀粉培养基液化、糖化、发酵酒精生产工艺流程第100页
     ·测定方法第100-101页
     ·液化酶、γ-淀粉酶和酿酒酵母复合发酵第101-102页
   ·结果第102-104页
     ·不同发酵时间对马铃薯淀粉出酒率及水解率的影响第102页
     ·不同发酵温度对马铃薯淀粉出酒率及水解率的影响第102-103页
     ·不同接种量对马铃薯淀粉出酒率及水解率的影响第103-104页
   ·讨论第104页
   ·本章小结第104-106页
主要结论第106-108页
 不足与展望第106-108页
参考文献第108-118页
致谢第118-119页
附录A:攻读学位期间所发表的学术论文及成果第119页

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