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人胰岛素原基因的设计、分子克隆、构建及其对马铃薯的遗传转化

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
英文缩写词表第12-13页
第1章 绪论第13-30页
   ·糖尿病的现状及治疗药物第13页
   ·胰岛素第13-18页
     ·胰岛素的研究进展第14-15页
     ·重组人胰岛素的研究进展第15-18页
   ·植物生物反应器第18-28页
     ·植物生物反应器的概念第19页
     ·转基因植物的遗传转化的研究进展第19-23页
     ·利用植物生物反应器生产疫苗的研究进展第23-26页
     ·利用植物生物反应器生产疫苗的优势第26页
     ·马铃薯作为生物反应器生产疫苗研究进展第26-27页
     ·马铃薯作为生物反应器生产植物疫苗的特点第27-28页
     ·马铃薯作为生物反应器生产疫苗的应用前景第28页
   ·本研究的目的和意义第28-30页
第2章 patatin启动子驱动的人胰岛素原基因表达载体的构建及其对农杆菌的转化第30-59页
   ·材料第30-34页
     ·菌株、质粒和植物材料第30页
     ·工具酶和试剂第30页
     ·主要仪器第30-31页
     ·培养基与缓冲液第31-34页
   ·方法第34-49页
     ·patatin启动子的克隆第34-38页
     ·Patatin启动子的亚克隆第38-40页
     ·人胰岛素原基因的分子克隆第40-44页
     ·植物表达载体的构建第44-46页
     ·patatin启动子驱动的人胰岛素原基因表达载体转化农杆菌第46-49页
   ·结果与分析第49-56页
     ·patatin启动子的克隆第49-52页
     ·Patatin启动子的亚克隆第52-53页
     ·马铃薯偏好的人胰岛素原基因的克隆第53-55页
     ·植物表达载体的构建第55-56页
     ·patatin启动子驱动的人胰岛素原基因表达载体转化农杆菌第56页
   ·讨论第56-59页
     ·马铃薯核DNA的提取第56-57页
     ·启动子的选择第57-58页
     ·人胰岛素原基因的设计第58页
     ·p1303P05h和p1303P06h的测序分析第58-59页
第3章 马铃薯再生体系的建立第59-67页
   ·材料第59-60页
     ·植物材料第59页
     ·试剂第59页
     ·仪器设备第59页
     ·常用溶液的配制第59-60页
   ·方法第60-61页
     ·马铃薯脱毒苗的快繁第60页
     ·愈伤组织的诱导发生和继代培养第60页
     ·马铃薯愈伤组织的分化第60-61页
   ·结果与分析第61-65页
     ·不同激素配比对愈伤组织诱导率的影响第61-63页
     ·不同激素配比对愈伤组织分化率的影响第63-65页
   ·讨论第65-67页
     ·激素配比对马铃薯再生体系的影响第65页
     ·基因型对马铃薯再生体系的影响第65-66页
     ·外植体及愈伤的状态对马铃薯再生体系的影响第66-67页
第4章 农杆菌介导的人胰岛素原基因对马铃薯遗传转化第67-77页
   ·材料第67-68页
     ·植物材料第67页
     ·农杆菌菌株第67页
     ·抗生素及分子生物学试剂第67页
     ·仪器设备第67页
     ·常用溶液的配制第67-68页
     ·培养基第68页
   ·方法第68-70页
     ·受体材料对潮霉素(Hyg)敏感性试验第68页
     ·遗传转化系统的优化第68-69页
     ·农杆菌工程菌转化外植体的方法第69-70页
   ·结果与分析第70-74页
     ·潮霉素选择压力的确定第70-71页
     ·预培养时间对茎段转化的影响第71-72页
     ·浸染时间对茎段转化的影响第72页
     ·共培养时间对遗传转化的影响第72-73页
     ·乙酰丁香酮对遗传转化的影响第73页
     ·羧苄青霉素(Carb)浓度对遗传转化的影响第73页
     ·抗性植株的获得第73-74页
   ·讨论第74-77页
     ·预培养和共培养时间对遗传转化的影响第74-75页
     ·选择压力的确定第75页
     ·抑菌剂的选择第75-77页
结论第77-78页
参考文献第78-88页
致谢第88-89页
附录A (攻读硕士学位期间所发表的论文)第89-90页
附录B 马铃薯的密码子偏好表第90页

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