| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-12页 |
| 1.前言 | 第12-16页 |
| 2.材料与方法 | 第16-44页 |
| 2.1 病例资料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 病例来源 | 第16页 |
| 2.1.2 病例活检组织中GDF15 表达的检测 | 第16-18页 |
| 2.2 实验相关设备 | 第18-19页 |
| 2.3 实验相关试剂 | 第19-21页 |
| 2.4 实验相关耗材 | 第21页 |
| 2.5 口腔鳞癌细胞系的培养 | 第21-24页 |
| 2.5.1 细胞系来源 | 第21-22页 |
| 2.5.2 细胞培养条件 | 第22页 |
| 2.5.3 细胞复苏 | 第22-23页 |
| 2.5.4 细胞传代 | 第23页 |
| 2.5.5 细胞换液 | 第23-24页 |
| 2.5.6 细胞冻存 | 第24页 |
| 2.6 Real-time PCR检测口腔鳞癌细胞系中GDF15mRNA相对表达量 | 第24-27页 |
| 2.6.1 细胞总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.6.2 逆转录反应 | 第25-26页 |
| 2.6.3 Real-time PCR反应 | 第26-27页 |
| 2.7 Western blot检测口腔鳞癌细胞系中GDF15 蛋白质表达水平 | 第27-33页 |
| 2.7.1 细胞总蛋白的提取 | 第27-28页 |
| 2.7.2 BCA比色法测定蛋白浓度 | 第28页 |
| 2.7.3 Western blot 实验 | 第28-33页 |
| 2.8 口腔鳞癌细胞系GDF15 基因表达干预 | 第33-39页 |
| 2.8.1 质粒载体构建及GDF15 过表达 | 第33-38页 |
| 2.8.2 GDF15 基因干扰序列设计及RNA干扰技术 | 第38-39页 |
| 2.9 干预GDF15 基因表达对TPF诱导化疗药物细胞毒性的影响 | 第39-43页 |
| 2.9.1 TPF诱导化疗药物 | 第39-40页 |
| 2.9.2 CCK-8 法检测药物细胞毒性 | 第40-42页 |
| 2.9.3 Western blot检测Caspase活化依赖的凋亡 | 第42-43页 |
| 2.10 统计学分析 | 第43-44页 |
| 3.结果 | 第44-59页 |
| 3.1 口腔鳞癌患者长期临床随访结果 | 第44页 |
| 3.2 口腔鳞癌组织中GDF15 表达水平与TPF诱导化疗疗效预测的相关性 | 第44-50页 |
| 3.3 口腔鳞癌细胞系中GDF15 mRNA和蛋白表达水平 | 第50-51页 |
| 3.4 干扰及过表达GDF15 效果 | 第51页 |
| 3.5 GDF15 表达对多西他赛、顺铂、5-氟尿嘧啶细胞毒性的影响 | 第51-55页 |
| 3.6 GDF15 表达对化疗药物引起的Caspase活化依赖的细胞凋亡的影响 | 第55-59页 |
| 4.讨论 | 第59-63页 |
| 5.结论 | 第63-64页 |
| 6.后续研究工作 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
| 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第79-81页 |
