| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 主要缩略语中英文对照 | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-37页 |
| 1.1 玉米弯孢叶斑病发生与研究现状 | 第13-14页 |
| 1.1.1 发生与危害 | 第13页 |
| 1.1.2 病原学研究 | 第13-14页 |
| 1.1.3 发生规律与防治 | 第14页 |
| 1.2 植物病原真菌致病因子 | 第14-19页 |
| 1.2.1 角质酶 | 第14-15页 |
| 1.2.2 细胞壁降解酶 | 第15-16页 |
| 1.2.3 黑色素 | 第16-17页 |
| 1.2.4 毒素 | 第17-19页 |
| 1.3 植物病原真菌信号转导 | 第19-24页 |
| 1.3.1 G蛋白偶联受体 | 第19-20页 |
| 1.3.2 异源三聚体G蛋白(αβγ) | 第20-21页 |
| 1.3.3 真菌发育和次生代谢信号转导途径 | 第21-24页 |
| 1.4 病原真菌Velvet复合体研究 | 第24-30页 |
| 1.4.1 发育和次生代谢调控Velvet家族 | 第24-27页 |
| 1.4.2 LaeA与Velvet蛋白互作 | 第27-30页 |
| 1.5 BTB蛋白研究进展 | 第30-32页 |
| 1.5.1 结构与进化 | 第30-31页 |
| 1.5.2 功能研究 | 第31-32页 |
| 1.6 植物病原真菌木聚糖代谢与毒素合成 | 第32-34页 |
| 1.6.1 木聚糖代谢 | 第32页 |
| 1.6.2 基于PKS途径相关毒素合成机理 | 第32-34页 |
| 1.7 科学问题的提出 | 第34-35页 |
| 1.7.1 挖掘弯孢菌毒素合成调控因子 | 第34-35页 |
| 1.7.2 明确Clt-1调控弯孢菌毒素合成分子机制 | 第35页 |
| 1.8 研究意义和主要内容 | 第35-37页 |
| 第二章 ClvelB基因调控玉米弯孢叶斑病菌毒素产生与致病性分析 | 第37-66页 |
| 2.1 材料 | 第37-40页 |
| 2.1.1 菌株、载体和植物材料 | 第37页 |
| 2.1.2 引物设计与合成 | 第37-38页 |
| 2.1.3 培养基 | 第38-39页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第39-40页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第40页 |
| 2.2 方法 | 第40-47页 |
| 2.2.1 clvelB基因克隆 | 第40-42页 |
| 2.2.2 clvelB基因拷贝数分析 | 第42页 |
| 2.2.3 clvelB基因生物信息学分析 | 第42-43页 |
| 2.2.4 clvelB基因敲除 | 第43-46页 |
| 2.2.5 clvelB基因互补子构建 | 第46页 |
| 2.2.6 clvelB基因对菌落形态、生长速度、分生孢子形成的影响 | 第46-47页 |
| 2.2.7 clvelB基因对弯孢菌毒素产生影响 | 第47页 |
| 2.2.8 clvelB基因对弯孢菌细胞壁降解酶活性影响 | 第47页 |
| 2.2.9 clvelB基因对弯孢菌致病性影响 | 第47页 |
| 2.3 结果与分析 | 第47-64页 |
| 2.3.1 clvelB基因扩增 | 第47-48页 |
| 2.3.2 clvelB基因拷贝数分析 | 第48页 |
| 2.3.3 clvelB基因生物信息学分析 | 第48-52页 |
| 2.3.4 clvelB基因敲除 | 第52-55页 |
| 2.3.5 clvelB基因互补子构建和验证 | 第55-58页 |
| 2.3.6 clvelB基因对弯孢菌生物学性状影响 | 第58页 |
| 2.3.7 clvelB基因对弯孢菌毒素产生影响 | 第58-61页 |
| 2.3.8 clvelB基因对弯孢菌细胞壁降解酶活性影响 | 第61-63页 |
| 2.3.9 clvelB基因对弯孢菌致病性影响 | 第63-64页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第64-66页 |
| 第三章 玉米弯孢叶斑病菌Clt-1互作蛋白筛选其互作机理 | 第66-114页 |
| 3.1 材料 | 第66-70页 |
| 3.1.1 菌株、载体和植物材料 | 第66页 |
| 3.1.2 引物设计与合成 | 第66页 |
| 3.1.3 培养基 | 第66-69页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第69页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第69-70页 |
| 3.2 方法 | 第70-85页 |
| 3.2.1 Clt-1蛋白亚细胞定位 | 第70页 |
| 3.2.2 弯孢菌双杂交cDNA文库构建 | 第70-74页 |
| 3.2.3 诱饵载体构建 | 第74-75页 |
| 3.2.4 重组质粒自激活检测 | 第75-76页 |
| 3.2.5 文库中筛选与Clt-1互作的蛋白 | 第76-78页 |
| 3.2.6 Y2H验证Clt-1和筛选蛋白互作 | 第78页 |
| 3.2.7 BiFC验证Clt-1和筛选蛋白互作 | 第78-80页 |
| 3.2.8 GST Pull-down验证Clt-1和筛选蛋白互作 | 第80-83页 |
| 3.2.9 clxyn24和claxe43基因敲除 | 第83-84页 |
| 3.2.10 clxyn24和claxe43基因对弯孢菌生物学性状影响 | 第84-85页 |
| 3.2.11 clxyn24和claxe43基因对弯孢菌致病相关性状影响 | 第85页 |
| 3.3 结果与分析 | 第85-111页 |
| 3.3.1 Clt-1蛋白亚细胞定位 | 第85-86页 |
| 3.3.2 弯孢菌cDNA文库构建及质量鉴定 | 第86-87页 |
| 3.3.3 pGBKT-Clt1诱饵载体构建与自激活检测 | 第87-88页 |
| 3.3.4 文库中筛选与Clt-1互作蛋白质 | 第88-91页 |
| 3.3.5 筛选蛋白全长基因克隆 | 第91-93页 |
| 3.3.6 clxyn24和claxe43基因生物信息学分析 | 第93-95页 |
| 3.3.7 Y2H验证Clt-1和筛选蛋白互作 | 第95-96页 |
| 3.3.8 BiFC验证Clt-1和筛选蛋白互作 | 第96-97页 |
| 3.3.9 GST Pull-down验证Clt-1和筛选蛋白互作 | 第97-99页 |
| 3.3.10 Clt-1与ClXyn24、ClAxe43蛋白互作区确定 | 第99-101页 |
| 3.3.11 clxyn24和claxe43对弯孢菌生物学性状影响 | 第101-106页 |
| 3.3.12 clxyn24和claxe43对弯孢菌致病相关性状的影响 | 第106-111页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第111-114页 |
| 第四章 Clt-1调控玉米弯孢叶斑病菌转录组及代谢组分析 | 第114-146页 |
| 4.1 材料 | 第114-116页 |
| 4.1.1 菌株、载体和植物材料 | 第114页 |
| 4.1.2 引物的设计与合成 | 第114页 |
| 4.1.3 培养基 | 第114页 |
| 4.1.4 主要试剂 | 第114-115页 |
| 4.1.5 主要仪器 | 第115-116页 |
| 4.2 方法 | 第116-119页 |
| 4.2.1 RNA-Seq | 第116-117页 |
| 4.2.2 pks18基因功能分析 | 第117-118页 |
| 4.2.3 代谢组分析 | 第118-119页 |
| 4.3 结果与分析 | 第119-143页 |
| 4.3.1 RNA-seq分析T806转录组表达变化 | 第119-126页 |
| 4.3.2 pks18基因功能分析 | 第126-136页 |
| 4.3.3 代谢组分析 | 第136-143页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第143-146页 |
| 第五章 论文的主要结论、创新点和工作展望 | 第146-149页 |
| 5.1 主要结论 | 第146-148页 |
| 5.1.1 clvelB基因调控弯孢菌M5HF2C毒素合成与致病性 | 第146页 |
| 5.1.2 Clt-1通过调控木聚糖代谢影响弯孢菌毒素的合成与致病性 | 第146页 |
| 5.1.3 PKS基因簇参与弯孢菌毒素生物合成 | 第146-148页 |
| 5.2 论文创新点 | 第148页 |
| 5.3 工作展望 | 第148-149页 |
| 参考文献 | 第149-162页 |
| 附录 | 第162-164页 |
| 一、攻读博士学位期间发表论文(第一作者) | 第162-163页 |
| 二、学术会议论文(第一作者) | 第163页 |
| 三、教材编写 | 第163-164页 |
| 致谢 | 第164-167页 |
