| 摘要 | 第7-10页 |
| abstract | 第10-12页 |
| 第一章 新城疫病毒感染及鸡体MDA5介导天然免疫研究进展 | 第16-34页 |
| 1.1 新城疫病研究概况 | 第16-20页 |
| 1.1.1 NDV生物学特性 | 第16-17页 |
| 1.1.2 NDV分子生物学特征 | 第17-20页 |
| 1.1.3 NDV毒力研究 | 第20页 |
| 1.2 NDV流行与防控的研究 | 第20-24页 |
| 1.2.1 ND历史与流行 | 第20-21页 |
| 1.2.2 NDV对不同物种的感染 | 第21页 |
| 1.2.3 NDV免疫 | 第21-22页 |
| 1.2.4 NDV疫苗及佐剂的研究 | 第22-24页 |
| 1.3 机体的模式识别受体 | 第24-30页 |
| 1.3.1 模式识别受体的分类 | 第24-25页 |
| 1.3.2 视黄酸受体家族 | 第25页 |
| 1.3.3 MDA5 的结构与信号转导 | 第25-27页 |
| 1.3.4 MDA5 信号通路的负调节 | 第27-28页 |
| 1.3.5 MDA5 与疾病相关性研究 | 第28-30页 |
| 1.4 鸡MDA5 研究进展 | 第30-32页 |
| 1.4.1 chMDA5 结构和功能 | 第30-31页 |
| 1.4.2 chMDA5 对抗病毒天然免疫的影响 | 第31-32页 |
| 1.4.3 chMDA5 与病毒的拮抗作用 | 第32页 |
| 1.5 本研究目的意义 | 第32-34页 |
| 第二章 chMDA5 在体外诱导干扰素表达的研究 | 第34-54页 |
| 2.1 材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1 质粒 | 第34页 |
| 2.1.2 细胞和病毒 | 第34-35页 |
| 2.1.3 鸡胚和SPF鸡 | 第35页 |
| 2.1.4 相关试剂 | 第35页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第35页 |
| 2.2 方法 | 第35-44页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第35-36页 |
| 2.2.2 不同毒力NDV感染细胞chMDA5 及干扰素表达 | 第36-40页 |
| 2.2.3 不同毒力NDV感染鸡体chMDA5 及干扰素表达 | 第40-41页 |
| 2.2.4 chMDA5 过表达对IFN-β表达的影响 | 第41-42页 |
| 2.2.5 chMDA5 过表达对NDV复制的影响 | 第42-43页 |
| 2.2.6 抑制chMDA5 表达对IFN-β表达的影响 | 第43-44页 |
| 2.2.7 数据统计分析 | 第44页 |
| 2.3 试验结果 | 第44-52页 |
| 2.3.1 不同毒力NDV感染细胞chMDA5 及干扰素表达 | 第44-46页 |
| 2.3.2 不同毒力NDV感染鸡体chMDA5 及干扰素表达 | 第46-49页 |
| 2.3.3 chMDA5过表达对干扰素表达的影响 | 第49-51页 |
| 2.3.4 抑制chMDA5表达对干扰素表达的影响 | 第51-52页 |
| 2.4 讨论 | 第52-53页 |
| 2.5 小结 | 第53-54页 |
| 第三章 诱导干扰素表达的ch MDA5 功能域研究 | 第54-64页 |
| 3.1 材料 | 第54-55页 |
| 3.1.1 质粒和细胞 | 第54-55页 |
| 3.1.2 相关试剂 | 第55页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第55页 |
| 3.2 方法 | 第55-59页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第55-56页 |
| 3.2.2 真核表达质粒的构建 | 第56-58页 |
| 3.2.3 质粒的转染 | 第58页 |
| 3.2.4 干扰素表达检测 | 第58页 |
| 3.2.5 数据统计分析 | 第58-59页 |
| 3.3 试验结果 | 第59-62页 |
| 3.3.1 引物设计 | 第59页 |
| 3.3.2 PCR结果 | 第59-60页 |
| 3.3.3 PCR产物双酶切 | 第60页 |
| 3.3.4 菌液PCR | 第60-61页 |
| 3.3.5 质粒的双酶切鉴定及测序 | 第61页 |
| 3.3.6 鸡IFN-β表达检测 | 第61-62页 |
| 3.4 讨论 | 第62-63页 |
| 3.5 小结 | 第63-64页 |
| 第四章 chMDA5 影响NDV对鸡致病性的研究 | 第64-81页 |
| 4.1 材料 | 第65页 |
| 4.1.1 质粒 | 第65页 |
| 4.1.2 细胞、病毒和SPF鸡 | 第65页 |
| 4.1.3 相关试剂 | 第65页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第65页 |
| 4.2 方法 | 第65-71页 |
| 4.2.1 表达chMDA5(483 aa)重组腺病毒的包装 | 第65-67页 |
| 4.2.2 重组腺病毒rAd-MDA5 的包装 | 第67-68页 |
| 4.2.3 rAd-MDA5 的鉴定 | 第68页 |
| 4.2.4 重组腺病毒rAd-shM5 的包装 | 第68-70页 |
| 4.2.5 鸡体攻毒 | 第70-71页 |
| 4.2.6 细胞因子表达和病毒载量测定 | 第71页 |
| 4.2.7 数据统计分析 | 第71页 |
| 4.3 试验结果 | 第71-79页 |
| 4.3.1 rAd-MDA5 重组腺病毒的包装 | 第71-74页 |
| 4.3.2 rAd-shM5 重组腺病毒包装 | 第74-76页 |
| 4.3.3 chMDA5 不同表达状态影响NDV对 SPF鸡致病性的研究 | 第76-79页 |
| 4.4 讨论 | 第79-80页 |
| 4.5 小结 | 第80-81页 |
| 第五章 chMDA5 辅助激活适应性免疫反应的研究 | 第81-95页 |
| 5.1 材料 | 第81-82页 |
| 5.1.1 SPF鸡胚和SPF鸡 | 第81-82页 |
| 5.1.2 病毒和细胞 | 第82页 |
| 5.1.3 相关试剂 | 第82页 |
| 5.1.4 实验仪器 | 第82页 |
| 5.2 方法 | 第82-86页 |
| 5.2.1 病毒的扩增 | 第82页 |
| 5.2.2 灭活疫苗的准备 | 第82页 |
| 5.2.3 鸡体免疫 | 第82-84页 |
| 5.2.4 体液免疫反应 | 第84页 |
| 5.2.5 细胞免疫反应 | 第84-85页 |
| 5.2.6淋巴细胞增殖实验 | 第85页 |
| 5.2.7 鸡体攻毒 | 第85-86页 |
| 5.2.8 病理检查 | 第86页 |
| 5.2.9 病毒载量和排毒检测 | 第86页 |
| 5.2.10 数据统计分析 | 第86页 |
| 5.3 试验结果 | 第86-93页 |
| 5.3.1 病毒的增殖和NDV灭活疫苗的准备 | 第86页 |
| 5.3.2 体液免疫反应 | 第86-87页 |
| 5.3.3 细胞免疫反应 | 第87-88页 |
| 5.3.4 攻毒后的临床症状、发病率和存活率 | 第88-89页 |
| 5.3.5 组织病理检查 | 第89-91页 |
| 5.3.6 器官的病毒载量和排毒检查 | 第91-93页 |
| 5.4 讨论 | 第93-94页 |
| 5.5 小结 | 第94-95页 |
| 全文结论 | 第95-96页 |
| 本研究的创新点 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-108页 |
| 附录 常用试剂配制 | 第108-109页 |
| 主要缩略词及中英文对照表 | 第109-111页 |
| 致谢 | 第111-113页 |
| 作者简介 | 第113页 |
