| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 橡胶树简介 | 第9页 |
| 1.2 橡胶树转基因研究进展 | 第9-10页 |
| 1.3 植物筛选标记研究进展 | 第10-11页 |
| 1.4 橡胶树报告基因研究 | 第11-12页 |
| 1.5 花青素是一种新型高效的转基因筛选标记 | 第12-17页 |
| 1.5.1 花青素简介 | 第12-13页 |
| 1.5.2 花青素作为报告基因的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.5.3 物种间花青素合成调控基因的表达受物种遗传背景影响 | 第16页 |
| 1.5.4 植物花青素合成调控基因高度保守 | 第16-17页 |
| 1.6 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 1.7 本研究的技术路线 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-39页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株与载体 | 第19页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-39页 |
| 2.2.1 橡胶树花青素合成通路同源结构基因克隆及功能鉴定 | 第20-30页 |
| 2.2.2 橡胶树花青素合成相关转录因子克隆及载体构建 | 第30-33页 |
| 2.2.3 GV3101农杆菌介导烟草遗传转化 | 第33-35页 |
| 2.2.4 同源结构基因启动子克隆及序列分析 | 第35-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-70页 |
| 3.1 橡胶树花青素关键同源结构基因克隆及载体构建 | 第39-49页 |
| 3.1.1 总RNA质量检测 | 第39页 |
| 3.1.2 同源结构基因ORF克隆 | 第39-41页 |
| 3.1.3 橡胶树不同组织花青素合成途径同源结构基因的荧光定量分析 | 第41-42页 |
| 3.1.4 同源结构基因3'RACE | 第42-43页 |
| 3.1.5 重组表达载体pCAMBIA2301-35s-nos的构建 | 第43-45页 |
| 3.1.6 中间载体的构建 | 第45-47页 |
| 3.1.7 重组表达载体pCAMBIA2301-35s-nos-FT2的构建 | 第47-48页 |
| 3.1.9 pCAMBIA2301-35s-Gene-nos-FT2构建 | 第48-49页 |
| 3.2 转录因子的克隆及载体构建 | 第49-54页 |
| 3.2.1 MYB转录因子的克隆 | 第49页 |
| 3.2.2 MYB转录因子进化树分析 | 第49-51页 |
| 3.2.3 MYB转录因子3'RACE结果 | 第51-52页 |
| 3.2.4 pCAMBIA2301-35s-MYB-nos-FT2载体的构建 | 第52-53页 |
| 3.2.5 bHLH转录因子 | 第53-54页 |
| 3.3 转基因植株的鉴定及定量结果 | 第54-61页 |
| 3.3.1 GUS转基因植株鉴定 | 第54-55页 |
| 3.3.2 同源结构基因转基因植株鉴定及定量结果 | 第55-56页 |
| 3.3.3 MYB转录因子转基因植株鉴定及定量结果 | 第56-61页 |
| 3.4 同源结构基因启动子克隆及序列分析 | 第61-70页 |
| 3.4.1 橡胶树DNA的提取 | 第61页 |
| 3.4.2 同源结构基因启动子的扩增 | 第61-62页 |
| 3.4.3 同源结构基因启动子结构分析 | 第62-68页 |
| 3.4.4 启动子驱动的LUC植物表达载体的构建 | 第68-70页 |
| 4 讨论 | 第70-73页 |
| 4.1 结构基因对花青素累积的影响 | 第70页 |
| 4.2 转录因子对花青素累积的影响 | 第70-71页 |
| 4.3 花青素合成同源结构基因启动子序列分析 | 第71-73页 |
| 5 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 附录Ⅰ | 第82-83页 |
| 附录Ⅱ | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
