| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 第一章 LjGAP2突变体筛选及稳定转化表型鉴定 | 第12-46页 |
| 1 前言 | 第12-25页 |
| 1.1 生物固氮与共生固氮简介 | 第12页 |
| 1.2 豆科植物与根瘤菌共生固氮系统 | 第12-16页 |
| 1.2.1 根瘤的形成过程 | 第13-14页 |
| 1.2.2 结瘤因子 | 第14-15页 |
| 1.2.3 结瘤因子受体蛋白激酶 | 第15-16页 |
| 1.3 小G蛋白 | 第16-18页 |
| 1.3.1 小G蛋白家族 | 第16-17页 |
| 1.3.2 小G蛋白的分类 | 第17-18页 |
| 1.4 ROP蛋白 | 第18-21页 |
| 1.4.1 ROP蛋白的结构 | 第18-19页 |
| 1.4.2 ROP蛋白的分类 | 第19-20页 |
| 1.4.3 ROP蛋白在植物体内的功能多样性 | 第20页 |
| 1.4.4 ROP蛋白的调控机制 | 第20-21页 |
| 1.5 GAP蛋白 | 第21-24页 |
| 1.5.1 RopGAPs的结构和功能 | 第21页 |
| 1.5.2 RopGAPs蛋白的分类 | 第21-22页 |
| 1.5.3 CRIB结构域 | 第22-23页 |
| 1.5.4 RopGAPs在植物中的功能 | 第23-24页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-35页 |
| 2.1 材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-35页 |
| 2.2.1 CTAB法提取植物基因组DNA | 第26页 |
| 2.2.2 GATEWAY方法构建载体 | 第26-27页 |
| 2.2.3 百脉根稳定转化 | 第27-32页 |
| 2.2.4 表达分析 | 第32-33页 |
| 2.2.5 百脉根的共生表型鉴定 | 第33-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-44页 |
| 3.1 LjGAP2 LORE1插入突变体鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2 LjGAP2超表达和RNAi稳定转化植株的培育 | 第36-37页 |
| 3.2.1 LjGAP2超表达和RNAi稳定转化载体构建 | 第36页 |
| 3.2.2 LjGAP2超表达和RNAi稳定转化 | 第36-37页 |
| 3.3 LjGAP2超表达和RNAi稳定转化植株的鉴定 | 第37-38页 |
| 3.4 LjGAP2超表达和RNAi植株的共生表型 | 第38-44页 |
| 3.4.1 转基因阳性苗的筛选 | 第38-39页 |
| 3.4.2 转基因表型鉴定及分析 | 第39-42页 |
| 3.4.3 LjGAP2超表达可能影响植株发育 | 第42-44页 |
| 4 总结讨论及展望 | 第44-46页 |
| 4.1 总结讨论 | 第44-45页 |
| 4.2 展望 | 第45-46页 |
| 第二章 苜蓿nad1突变体互补及蛋白结构域功能分析 | 第46-60页 |
| 1 研究背景 | 第46-49页 |
| 1.1 NAD1蛋白的发现 | 第46-47页 |
| 1.2 NAD1蛋白的生物学功能 | 第47-48页 |
| 1.3 研究意义和目的 | 第48-49页 |
| 2 材料与方法 | 第49-53页 |
| 2.1 材料 | 第49-50页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第49页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第49-50页 |
| 2.2 方法 | 第50-53页 |
| 2.2.1 Gibson等温一步克隆法 | 第50-51页 |
| 2.2.2 种子消毒及萌发 | 第51页 |
| 2.2.3 苜蓿毛根转化和鉴定 | 第51-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-59页 |
| 3.1 MtNAD1功能结构域探索 | 第53-57页 |
| 3.1.1 克隆构建 | 第53-54页 |
| 3.1.2 结构域替换 | 第54-55页 |
| 3.1.3 CT结构域点突变 | 第55-56页 |
| 3.1.4 跨膜结构域点突变 | 第56-57页 |
| 3.2 筛选抑制Mtnad1突变体表型的根瘤菌基因 | 第57-59页 |
| 4 总结讨论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 附录一: 本研究所用引物 | 第69-72页 |
| 附录二: cDNA和氨基酸序列 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
