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抗赤霉病相关基因转化小麦和转基因聚合杂交的研究

摘要第7-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略语表第10-11页
1 前言第11-22页
    1.1 小麦赤霉病概述第11页
    1.2 小麦遗传转化第11-14页
        1.2.1 小麦基因枪转化第11-12页
        1.2.2 影响基因枪转化效率的因素第12-13页
        1.2.3 最小表达框技术的应用第13页
        1.2.4 小麦农杆菌转化第13-14页
        1.2.5 其他转化方法第14页
    1.3 筛选标记基因第14-15页
        1.3.1 筛选标记基因Bar第14-15页
        1.3.2 筛选标记基因Pmi第15页
    1.4 小麦抗赤霉病基因工程第15-17页
        1.4.1 抗菌肽第16页
        1.4.2 抗菌蛋白第16-17页
        1.4.3 抗体融合蛋白第17页
        1.4.4 RNAi技术在小麦抗赤霉病育种中的应用第17页
    1.5 丰原素(Fengycin)相关研究第17-20页
        1.5.1 Fengycin概述第18页
        1.5.2 Fengycin合成酶第18-19页
        1.5.3 Fengycin合成酶各基因的功能第19页
        1.5.4 Fengycin的抑菌机理第19-20页
    1.6 多基因聚合育种第20-21页
        1.6.1 植物多基因共转化第20页
        1.6.2 基因聚合杂交第20-21页
    1.7 研究目的和意义第21-22页
2 实验材料与方法第22-32页
    2.1 实验材料第22-25页
        2.1.1 实验主要仪器及设备第22页
        2.1.2 菌株和质粒第22页
        2.1.3 菌体扩大培养所用培养基第22页
        2.1.4 DNA提取相关试剂第22-23页
        2.1.5 试剂盒和限制性内切酶第23页
        2.1.6 转化基因第23页
        2.1.7 小麦幼胚愈伤转化所用培养基第23页
        2.1.8 小麦材料第23-24页
        2.1.9 引物第24-25页
    2.2 实验方法第25-32页
        2.2.1 基因枪转化片段的制备第25-27页
        2.2.2 转化受体的准备第27页
        2.2.3 幼胚愈伤的高渗处理及基因枪轰击第27-28页
        2.2.4 幼胚愈伤的恢复培养第28页
        2.2.5 愈伤组织的再生及筛选第28页
        2.2.6 小麦基因组DNA提取试剂的配制第28-29页
        2.2.7 转基因小麦叶片DNA的提取第29页
        2.2.8 转基因小麦的PCR鉴定第29-30页
        2.2.9 转基因材料快速加代法第30页
        2.2.10 转丰原素基因材料聚合杂交育种第30-32页
3 结果与分析第32-50页
    3.1 最小表达框的制备第32-33页
    3.2 Bar筛选体系下襄麦76幼胚基因枪转化第33-36页
        3.2.1 小麦幼胚基因枪转化及阳性植株的获得第33-34页
        3.2.2 转RNAi- Chs3bAs2As3基因材料的获得和PCR鉴定第34-36页
    3.3 Pmi筛选体系下襄麦76幼胚的基因枪转化第36-43页
        3.3.1 小麦幼胚转化和转基因植株的获得第36-38页
        3.3.2 转RNAi-Chs3bAs5As1基因材料的获得和PCR鉴定第38-40页
        3.3.3 转RNAi-Chs3bAs2As3基因材料的获得和PCR鉴定第40-43页
    3.4 转丰原素基因高世代材料聚合杂交第43-50页
        3.4.1 高世代转基因材料PCR鉴定第43-44页
        3.4.2 基因聚合材料的组配第44页
        3.4.3 加代及聚合杂交材料PCR鉴定第44-45页
        3.4.4 聚合杂交材料及加代材料的组配第45-46页
        3.4.5 第二轮聚合材料PCR鉴定第46-49页
        3.4.6 丰原素基因聚合杂交在不同世代的遗传组成第49-50页
4 讨论第50-53页
    4.1 小麦遗传转化是提高抗赤霉病分子育种的有效手段第50-51页
    4.2 聚合丰原素基因有望获得抗赤霉病资源第51-53页
参考文献第53-61页
致谢第61页

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