基于LC-MS/MS法的色氨酸合成代谢组学分析平台的构建
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 前言 | 第7-13页 |
| ·微生物代谢组学与研究方法 | 第7-8页 |
| ·微生物代谢组学样品前处理研究概况 | 第8-9页 |
| ·菌体培养 | 第8页 |
| ·快速取样 | 第8页 |
| ·淬灭 | 第8-9页 |
| ·胞内代谢物的提取 | 第9页 |
| ·微生物代谢组学分析平台研究概况 | 第9-11页 |
| ·气质联用(GC-MS) | 第9-10页 |
| ·液质联用(LC-MS) | 第10页 |
| ·毛细管电泳质谱联用(CE-MS) | 第10页 |
| ·核磁共振(NMR) | 第10-11页 |
| ·本课题立体依据和意义 | 第11-12页 |
| ·本课题研究内容 | 第12-13页 |
| 2 材料与方法 | 第13-16页 |
| ·实验材料 | 第13页 |
| ·试剂 | 第13页 |
| ·设备与仪器 | 第13页 |
| ·实验方法 | 第13-16页 |
| ·分析检测 | 第13-14页 |
| ·供试菌株及培养条件 | 第14页 |
| ·样品前处理 | 第14-16页 |
| 3 结果与讨论 | 第16-44页 |
| ·LC-MS/MS 分析方法的建立 | 第16-25页 |
| ·高效液相分析条件的选择 | 第16-19页 |
| ·质谱分析条件的选择 | 第19-21页 |
| ·各代谢物检测的线性关系、线性范围及检测限 | 第21-22页 |
| ·各代谢物的加标回收率和精密度 | 第22-24页 |
| ·实际样品分析 | 第24-25页 |
| ·样品前处理方法的建立 | 第25-39页 |
| ·样品淬灭方式的选择 | 第25-28页 |
| ·菌体洗涤溶液的选择 | 第28-31页 |
| ·代谢物不同提取方法的比较 | 第31-33页 |
| ·进样和提取方法的重复性 | 第33-35页 |
| ·细胞破碎方法的选择 | 第35-37页 |
| ·液氮冻融法冻融次数的考察 | 第37-38页 |
| ·样品浓缩对代谢物稳定性的影响 | 第38页 |
| ·冷甲醇法的基体效应及质谱响应线性 | 第38-39页 |
| ·代谢通量分析 | 第39-44页 |
| ·大肠杆菌合成L-色氨酸的代谢流平衡模型的建立 | 第40-42页 |
| ·代谢网络中重要节点的比较分析 | 第42-44页 |
| 4 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |
