| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第9-21页 |
| 1.1 泛素化途径 | 第9页 |
| 1.2 E3泛素连接酶MARCH蛋白 | 第9-13页 |
| 1.3 冠状病毒简介 | 第13-14页 |
| 1.4 冠状病毒分类 | 第14-16页 |
| 1.5 冠状病毒的结构蛋白 | 第16-17页 |
| 1.6 刺突蛋白S介导冠状病毒的进入过程 | 第17-18页 |
| 1.7 冠状病毒的生命周期 | 第18-19页 |
| 1.8 冠状病毒与泛素化修饰的密切关系 | 第19页 |
| 1.9 小结与技术路线 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-34页 |
| 2.1 主要试剂及培养基 | 第21页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.3 主要耗材 | 第22页 |
| 2.4 菌株、质粒和细胞 | 第22-23页 |
| 2.5 常用溶液的配方及配制 | 第23-24页 |
| 2.6 突变质粒的构建 | 第24-27页 |
| 2.7 AxyPrep质粒提取试剂盒细胞转染 | 第27-28页 |
| 2.8 AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒 | 第28-29页 |
| 2.9 HIV-1 p24抗原定量检测试剂盒(酶联免疫法) | 第29-30页 |
| 2.10 细胞转染 | 第30页 |
| 2.11 Western-blot检测冠状病毒S蛋白在细胞内的表达 | 第30-31页 |
| 2.12 MHV、SARS-CoV、MERS-Cov慢病毒的包装及慢病毒颗粒中S蛋白的检测 | 第31-32页 |
| 2.13 通过免疫共沉淀、Western-blot检测MERS-CoV S蛋白多聚泛素化链的类型 | 第32页 |
| 2.14 通过Promegas Steady-Glo(?)荧光素酶检测试剂盒检测MARCH8蛋白对MHV、SARS-CoV、MERS-CoV慢病毒转导效率影响 | 第32-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-48页 |
| 3.1 过表达MARCH8蛋白对MHV、SARS-CoV和MERS-CoV S蛋白表达、S蛋白包装入慢病毒颗粒及其慢病毒转导效率的影响 | 第34-36页 |
| 3.2 MARCH8蛋白的E3泛素连接酶活性对其降解SARS-CoV和MERS-CoV S蛋白的影响 | 第36-37页 |
| 3.3 S蛋白胞浆区域上的氨基酸截断或突变对MARCH8蛋白介导的MERS-CoV S蛋白降解作用的影响 | 第37-40页 |
| 3.4 MARCH8蛋白通过泛素溶酶体途径介导SARS-CoV和MERS-CoV S蛋白降解 | 第40-42页 |
| 3.5 利用泛素分子突变体确定MARCH8蛋白多聚泛素化MERS-CoV S蛋白的方式 | 第42-44页 |
| 3.6 讨论 | 第44-48页 |
| 第四章 全文总结 | 第48-49页 |
| 4.1 结论 | 第48页 |
| 4.2 研究中的不足及进一步待解决的问题 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录一 英文缩写词对照表缩略语 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-58页 |
| 个人简历及所发表的文章 | 第58页 |
