| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| Chapter 1: Introduction | 第13-19页 |
| 1.1 Transgenic Bt cotton development | 第13-15页 |
| 1.2 Types of insecticidal crystal (Cry) proteins | 第15页 |
| 1.3 Expression of Bt gene | 第15-16页 |
| 1.4 Strategies to develop the elite Bt cotton genotypes | 第16页 |
| 1.5 Use of different promoter combinations with Bt genes | 第16-17页 |
| 1.6 Introduction of elite Bt germplasm and CLCuD | 第17页 |
| 1.7 Approaches to develop the CLCuD tolerance | 第17-18页 |
| 1.8 Objectives | 第18-19页 |
| Chapter 2: Materials and Methods | 第19-34页 |
| 2.1 Experiment No.1 | 第19-29页 |
| 2.1.1 Construct development and evaluation for high Bt toxin level | 第19页 |
| 2.1.2 Construction of gene cassettes | 第19页 |
| 2.1.3 Extraction of plasmid | 第19页 |
| 2.1.4 Restriction and purification of plasmid | 第19-22页 |
| 2.1.5 Ligation of plasmid | 第22页 |
| 2.1.6 Transformation and cloning of ligated plasmid in E. coli | 第22页 |
| 2.1.7 Selection of positive colonies and confirmation of ligated fragment | 第22-23页 |
| 2.1.8 Development of expression vector | 第23-26页 |
| 2.1.9 Stable transformation of tobacco transformation | 第26-27页 |
| 2.1.10 Characterization of transgenic tobacco plants | 第27页 |
| 2.1.11 Expression analysis | 第27-29页 |
| 2.2 Experiment No.2 | 第29-34页 |
| 2.2.1 Plant material | 第29页 |
| 2.2.2 Development of breeding population and experimental design | 第29-30页 |
| 2.2.3 Field evaluation and disease rating | 第30-31页 |
| 2.2.4 Sample collection for biochemical analysis | 第31页 |
| 2.2.5 Leaf chlorophyll (Chl) and carotenoid contents determination | 第31页 |
| 2.2.6 Determination of total soluble proteins (TSP) contents | 第31页 |
| 2.2.7 Determination of total soluble sugar (TSS) contents | 第31-32页 |
| 2.2.8 Enzymatic antioxidants assay | 第32-33页 |
| 2.2.9 Statistical analysis and data representation | 第33-34页 |
| Chapter 3: Results | 第34-48页 |
| 3.1 Experiment No.1 | 第34-38页 |
| 3.1.1 Construction of gene cassette and expression vectors | 第34-35页 |
| 3.1.2 Tobacco Transformation and immunostrip analysis | 第35-37页 |
| 3.1.3 PCR based expression analysis | 第37-38页 |
| 3.2 Experiment No.2 | 第38-48页 |
| 3.2.1 Field disease rating | 第38-39页 |
| 3.2.2 Total soluble protein (TSP) contents | 第39-40页 |
| 3.2.3 Superoxide dismutase activity (SOD) | 第40-41页 |
| 3.2.4 Polyphenol oxidase activity (PPO) | 第41-42页 |
| 3.2.5 Peroxidase activity (POD) | 第42-43页 |
| 3.2.6 Catalase activity[CAT] | 第43页 |
| 3.2.7 Phenylalanine ammonia-lyase activity (PAL) | 第43-44页 |
| 3.2.8 Chl a, b and total chlorophyll (a+b) contents (mg/g of FW) | 第44-45页 |
| 3.2.9 Carotenoid contents (mg/g of FW) | 第45页 |
| 3.2.10 Total soluble sugar contents (mg/g of FW) | 第45-46页 |
| 3.2.11 Correlation Co-efficient estimates | 第46-48页 |
| Chapter 4: Discussion | 第48-51页 |
| 4.1 Development and expression of multiple gene cassettes vector | 第48-49页 |
| 4.2 Biochemical basis of CLuCD | 第49-51页 |
| Conclusions | 第51-52页 |
| References | 第52-60页 |
| Acknowledgments | 第60-61页 |
| Curriculum Vitae | 第61-70页 |
