致谢 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-18页 |
1.1 转基因研究 | 第9-15页 |
1.1.1 转基因作物的种植面积 | 第9-11页 |
1.1.2 转基因作物的性状 | 第11页 |
1.1.3 转基因作物的安全管理 | 第11-12页 |
1.1.4 转基因成分蛋白检测技术 | 第12-13页 |
1.1.5 转基因成分核酸检测技术 | 第13-15页 |
1.1.6 多重PCR技术在转基因检测中的应用 | 第15页 |
1.2 胞质不育鉴定的研究 | 第15-17页 |
1.2.1 玉米雄性不育的概述 | 第15-16页 |
1.2.2 玉米叶绿体和雄性不育的关系 | 第16-17页 |
1.3 本研究目的和意义 | 第17-18页 |
2 玉米转基因事件多重检测体系的建立 | 第18-30页 |
2.1 前言 | 第18页 |
2.2 材料和方法 | 第18-21页 |
2.2.1 试验材料 | 第18页 |
2.2.2 试验方法 | 第18-21页 |
2.2.2.1 DNA提取 | 第18-19页 |
2.2.2.2 引物的设计 | 第19页 |
2.2.2.3 PCR扩增 | 第19-20页 |
2.2.2.4 电泳 | 第20页 |
2.2.2.5 数据采集 | 第20页 |
2.2.2.6 主要试剂 | 第20页 |
2.2.2.7 实验仪器及耗材 | 第20-21页 |
2.3 结果与分析 | 第21-28页 |
2.3.1 新设计引物的评估 | 第21-22页 |
2.3.2 新设计引物5重PCR的建立 | 第22-23页 |
2.3.3 新设计引物和国标引物的比较 | 第23-25页 |
2.3.3.1 单重PCR比较 | 第23-24页 |
2.3.3.2 多重PCR比较 | 第24-25页 |
2.3.4 转基因多重体系的优化 | 第25-28页 |
2.3.4.1 N+1 峰的消除 | 第25-26页 |
2.3.4.2 PCR循环数的确定 | 第26-27页 |
2.3.4.3 引物间的浓度调整 | 第27页 |
2.3.4.4 玉米转基因5重PCR检测体系的建立 | 第27-28页 |
2.4 结论与讨论 | 第28-30页 |
2.4.1 多重PCR的优势 | 第28页 |
2.4.2 荧光毛细光电泳的优势 | 第28-30页 |
3 利用叶绿体InDel标记对玉米S型胞质不育种质鉴定的研究 | 第30-40页 |
3.1 前言 | 第30页 |
3.2 材料与方法 | 第30-35页 |
3.2.1 试验材料 | 第30-31页 |
3.2.2 试验方法 | 第31-35页 |
3.2.2.1 总DNA提取 | 第31-32页 |
3.2.2.2 玉米S型胞质不育鉴定叶绿体InDel引物的开发 | 第32-33页 |
3.2.2.3 PCR扩增 | 第33-34页 |
3.2.2.4 电泳 | 第34页 |
3.2.2.5 数据采集与分析 | 第34-35页 |
3.3 结果与分析 | 第35-38页 |
3.3.1 玉米叶绿体InDel引物的评估 | 第35页 |
3.3.2 玉米S型细胞质不育鉴定特异引物的确定 | 第35页 |
3.3.3 玉米S型细胞质不育鉴定特异引物特征 | 第35-38页 |
3.4 讨论 | 第38-40页 |
3.4.1 利用叶绿体InDel标记进行玉米S型胞质不育制种鉴定方法的特点 | 第38页 |
3.4.2 本研究公布的InDel特异鉴定位点具备检测平台可扩展性和广泛适用性 | 第38页 |
3.4.3 正常胞质黄改群(唐四平头群)材料是否对S型胞质雄性不育制种鉴定存在影响 | 第38-39页 |
3.4.4 建立S型胞质不育制种快速鉴定方法对我国玉米杂交种生产具有不可或缺的作用 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
ABSTRACT | 第45-46页 |