| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第18-39页 |
| 1.1 黄酮类化合物概述 | 第18-26页 |
| 1.1.1 黄酮类化合物的结构 | 第18-20页 |
| 1.1.2 黄酮类化合物的生物活性 | 第20-21页 |
| 1.1.3 黄酮类化合物的生物合成途径 | 第21-24页 |
| 1.1.4 黄酮类化合物的代谢调控研究现状 | 第24-26页 |
| 1.2 核糖开关研究进展 | 第26-32页 |
| 1.2.1 核糖开关的发现 | 第26-29页 |
| 1.2.2 核糖开关的结构 | 第29-30页 |
| 1.2.3 核糖开关的作用机理 | 第30-32页 |
| 1.3 生物传感器的研究与应用 | 第32-38页 |
| 1.3.1 生物传感器的工作原理 | 第32-34页 |
| 1.3.2 生物传感器的性能参数 | 第34-35页 |
| 1.3.3 生物传感器的应用 | 第35-38页 |
| 1.4 立题目的及意义 | 第38页 |
| 1.5 本论文研究内容 | 第38-39页 |
| 第二章 柚皮素核糖开关的建构 | 第39-60页 |
| 2.1 前言 | 第39页 |
| 2.2 材料与方法 | 第39-49页 |
| 2.2.1 菌种和培养基 | 第39-42页 |
| 2.2.2 主要试剂及仪器 | 第42-43页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第43-48页 |
| 2.2.3.1 实验室常用分子生物学操作技术 | 第43-44页 |
| 2.2.3.2 柚皮素响应RNA适体的体外SELEX筛选 | 第44-47页 |
| 2.2.3.3 核糖开关文库的构建 | 第47页 |
| 2.2.3.4 核糖开关的体内富集 | 第47-48页 |
| 2.2.4 核糖开关剂量反应曲线的测定 | 第48页 |
| 2.2.5 核糖开关对类黄酮生产菌的响应 | 第48-49页 |
| 2.2.6 RNA高级结构的预测 | 第49页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第49-59页 |
| 2.3.1 SELEX体外适体筛选 | 第49-51页 |
| 2.3.1.1 柚皮素的固定化 | 第49-50页 |
| 2.3.1.2 柚皮素RNA适体的SELEX筛选 | 第50-51页 |
| 2.3.2 核糖开关的胞内富集 | 第51-55页 |
| 2.3.2.1 核糖开关文库的建构 | 第51-53页 |
| 2.3.2.2 核糖开关胞内富集条件的优化 | 第53-54页 |
| 2.3.2.3 核糖开关胞内富集结果 | 第54-55页 |
| 2.3.3 核糖开关的测序结果 | 第55-57页 |
| 2.3.4 核糖开关柚皮素剂量反应曲线 | 第57-58页 |
| 2.3.5 核糖开关胞内专一性初探 | 第58-59页 |
| 2.4 小结 | 第59-60页 |
| 第三章 柚皮素核糖开关的构效关系研究 | 第60-90页 |
| 3.1 前言 | 第60页 |
| 3.2 材料与方法 | 第60-67页 |
| 3.2.1 菌种和培养基 | 第60-61页 |
| 3.2.2 主要试剂及仪器 | 第61-63页 |
| 3.2.3 实验方法 | 第63-67页 |
| 3.2.3.1 核糖开关的生物活性检验 | 第63页 |
| 3.2.3.2 类黄酮平行筛选实验条件 | 第63-64页 |
| 3.2.3.3 流式细胞仪的荧光测定 | 第64页 |
| 3.2.3.4 分析软件 | 第64页 |
| 3.2.3.5 QSPR建模方法 | 第64-67页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第67-89页 |
| 3.3.1 核糖开关的柚皮素响应特征 | 第67-68页 |
| 3.3.2 柚皮素核糖开关生物专一性平行筛选 | 第68-71页 |
| 3.3.3 基于核糖开关M1的生物传感器构效分析 | 第71-78页 |
| 3.3.3.1 模型M1的特征描述符 | 第71-72页 |
| 3.3.3.2 模型M1的评价 | 第72-74页 |
| 3.3.3.3 模型M1的生物学特征 | 第74-78页 |
| 3.3.4 基于核糖开关M2的生物传感器构效分析 | 第78-81页 |
| 3.3.4.1 模型M2的特征描述符 | 第78-79页 |
| 3.3.4.2 模型M2的评价 | 第79-80页 |
| 3.3.4.3 模型M2的生物学特征 | 第80-81页 |
| 3.3.5 基于核糖开关O的生物传感器构效分析 | 第81-85页 |
| 3.3.5.1 模型O的特征描述符 | 第81-82页 |
| 3.3.5.2 模型O的评价 | 第82-83页 |
| 3.3.5.3 模型O的生物学特征 | 第83-85页 |
| 3.3.6 核糖开关对黄酮类糖苷化合物的响应与分析 | 第85-89页 |
| 3.4 小结 | 第89-90页 |
| 第四章 柚皮素高通量筛选平台的构建 | 第90-105页 |
| 4.1 前言 | 第90页 |
| 4.2 材料与方法 | 第90-96页 |
| 4.2.1 菌种和培养基 | 第90-91页 |
| 4.2.2 主要试剂及仪器 | 第91-92页 |
| 4.2.3 实验方法 | 第92-96页 |
| 4.2.3.1 启动子对核糖开关表征的影响 | 第92页 |
| 4.2.3.2 核糖开关表征随时间的变化 | 第92-93页 |
| 4.2.3.3 宿主菌对核糖开关表征的影响 | 第93页 |
| 4.2.3.4 培养基对核糖开关表征的影响 | 第93页 |
| 4.2.3.5 柚皮素生产菌的构建 | 第93-94页 |
| 4.2.3.6 生物传感器与生产菌的共培养条件 | 第94-95页 |
| 4.2.3.7 高效液相色谱测定柚皮素含量 | 第95-96页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第96-103页 |
| 4.3.1 核糖开关表征性能的影响因素 | 第96-100页 |
| 4.3.1.1 基因元件对核糖开关表征的影响 | 第96-98页 |
| 4.3.1.2 宿主菌对核糖开关表征的影响 | 第98-99页 |
| 4.3.1.3 培养基对核糖开关表征的影响 | 第99-100页 |
| 4.3.2 双荧光生物传感器的构建 | 第100-102页 |
| 4.3.3 生物传感器在共培养体系中的应用 | 第102-103页 |
| 4.4 小结 | 第103-105页 |
| 第五章 结论与展望 | 第105-108页 |
| 参考文献 | 第108-116页 |
| 附录1 tetA序列 | 第116-117页 |
| 附录2 黄酮类化合物平行筛选的表征结果 | 第117-118页 |
| 附录3 核糖开关M1其它活性位点分子对接碰撞特性得分与荧光激发值对比 | 第118-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第121-122页 |
| 作者简介 | 第122页 |
| 导师简介 | 第122-123页 |
| 附件 | 第123-124页 |
