| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| 1.1 角质酶概述 | 第8-11页 |
| 1.1.1 角质酶的来源 | 第8-9页 |
| 1.1.2 角质酶的酶学性质 | 第9页 |
| 1.1.3 角质酶的克隆表达及制备 | 第9-10页 |
| 1.1.4 角质酶的应用 | 第10-11页 |
| 1.2 棉纤维生物精炼概述 | 第11-14页 |
| 1.2.1 棉纤维的结构与组成 | 第11页 |
| 1.2.2 角质层与角质 | 第11-12页 |
| 1.2.3 蜡质与角质层水分渗透结构模型 | 第12-13页 |
| 1.2.4 精炼酶在棉织物前处理中的应用 | 第13-14页 |
| 1.3 大肠杆菌表达系统概述 | 第14-15页 |
| 1.4 立题依据及意义 | 第15页 |
| 1.5 本论文的主要研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂和工具酶 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第18页 |
| 2.1.4 培养基 | 第18-19页 |
| 2.2 基因工程相关操作方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 分子生物学相关操作方法 | 第19页 |
| 2.2.2 重组质粒的构建 | 第19-20页 |
| 2.2.3 大肠杆菌感受态的制备 | 第20-21页 |
| 2.2.4 大肠杆菌热激转化方法 | 第21页 |
| 2.3 培养及发酵方法 | 第21页 |
| 2.3.1 重组菌摇瓶发酵方法 | 第21页 |
| 2.3.2 3-L发酵罐扩大培养方法 | 第21页 |
| 2.4 分析方法 | 第21-23页 |
| 2.4.1 酶活力测定方法 | 第21-22页 |
| 2.4.2 SDS-PAGE凝胶电泳检测 | 第22页 |
| 2.4.3 重组酶最适温度及温度稳定性测定 | 第22页 |
| 2.4.4 重组酶最适pH及pH稳定性测定 | 第22页 |
| 2.4.5 菌体浓度的测定 | 第22页 |
| 2.4.6 蛋白纯化方法 | 第22-23页 |
| 2.4.7 蛋白浓度测定 | 第23页 |
| 2.4.8 磷脂酶活性测定 | 第23页 |
| 2.5 棉纤维的生物精练相关方法 | 第23-26页 |
| 2.5.1 棉织物酶法处理工艺 | 第23-24页 |
| 2.5.2 棉织物化学法处理工艺 | 第24页 |
| 2.5.3 棉织物染色工艺 | 第24页 |
| 2.5.4 纺织品润湿性测定方法 | 第24页 |
| 2.5.5 上染速率曲线绘制方法 | 第24-25页 |
| 2.5.6 染色颜色深度(K/S值) | 第25页 |
| 2.5.7 纺织品失重率测定 | 第25页 |
| 2.5.8 扫描电子显微镜(SEM)测试棉织物形态结构 | 第25-26页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第26-46页 |
| 3.1 Humicola insolens角质酶在E.coli中的重组表达和酶学性质研究 | 第26-30页 |
| 3.1.1 重组质粒pET-20b(+)/hic的构建 | 第26-27页 |
| 3.1.2 重组菌E.coli BL21(DE3)/pET-20b(+)/hic的构建和摇瓶发酵 | 第27-28页 |
| 3.1.3 重组角质酶的分离纯化 | 第28页 |
| 3.1.4 重组角质酶酶学性质研究 | 第28-30页 |
| 3.2 重组菌E.coli BL21(DE3)/pET-20b(+)/hic在3-L罐中的发酵优化 | 第30-37页 |
| 3.2.1 重组菌高密度发酵的诱导条件初步优化 | 第30-34页 |
| 3.2.2 重组角质酶的磷脂活性测定 | 第34-35页 |
| 3.2.3 高诱导菌体浓度和高诱导强度的发酵策略对重组菌高密度发酵的影响 | 第35-37页 |
| 3.3 重组角质酶在棉织物精练中的应用 | 第37-46页 |
| 3.3.1 H.insolens角质酶单酶处理工艺优化 | 第37-41页 |
| 3.3.2 H.insolens角质酶和T.fusca角质酶复配处理工艺优化 | 第41-42页 |
| 3.3.3 酶处理对棉织物失重率的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.4 酶处理对棉织物染色性能的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.5 酶处理对棉织物表面结构的影响 | 第44-46页 |
| 主要结论与展望 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 致谢 | 第52-54页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |
