摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-17页 |
1.1 手性和手性药物 | 第8页 |
1.2 羰基还原酶 | 第8-11页 |
1.2.1 羰基还原酶的分类及组成特征 | 第9-10页 |
1.2.2 羰基还原酶的资源挖掘 | 第10-11页 |
1.3 大分子底物研究进展 | 第11-15页 |
1.3.1 芳香酮 | 第12-13页 |
1.3.2 酮酯 | 第13-14页 |
1.3.3 杂环酮 | 第14-15页 |
1.4 论文的研究意义和内容 | 第15-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-25页 |
2.1 实验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 主要试剂 | 第17页 |
2.1.2 培养基 | 第17-18页 |
2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
2.1.4 菌种与质粒 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-25页 |
2.2.1 醛酮还原酶同源基因的克隆与表达 | 第19-21页 |
2.2.2 大分子酮还原酶工具箱的催化性能分析 | 第21-23页 |
2.2.3 OPBE不对称转化反应的影响因素 | 第23-24页 |
2.2.4 1-苄基-3-吡咯烷酮不对称转化反应的影响因素 | 第24-25页 |
第三章 结果与讨论 | 第25-41页 |
3.1 醛酮还原酶的基因挖掘与序列分析 | 第25-27页 |
3.2 大分子酮还原酶工具箱的构建 | 第27-34页 |
3.2.1 醛酮还原酶的基因克隆 | 第27-28页 |
3.2.2 醛酮还原酶的诱导表达 | 第28-29页 |
3.2.3 重组羰基还原酶的纯化 | 第29-30页 |
3.2.4 重组羰基还原酶催化大分子底物的活性分析 | 第30-31页 |
3.2.5 重组羰基还原酶催化大分子底物的动力学性质研究 | 第31-33页 |
3.2.6 重组羰基还原酶催化大分子底物的立体选择性 | 第33-34页 |
3.3 反应体系和条件对OPBE不对称转化反应的影响 | 第34-38页 |
3.3.1 目的酶的确定 | 第34页 |
3.3.2 反应初始pH对F285A/W286A催化还原OPBE的影响 | 第34-35页 |
3.3.3 反应温度对F285A/W286A催化还原OPBE的影响 | 第35页 |
3.3.4 底物浓度对F285A/W286A催化还原OPBE的影响 | 第35-36页 |
3.3.5 助溶剂对F285A/W286A催化还原OPBE的影响 | 第36-37页 |
3.3.6 最适助溶剂添加比例对F285A/W286A催化还原OPBE的影响 | 第37页 |
3.3.7 反应时间对F285A/W286A催化还原OPBE的影响 | 第37-38页 |
3.4 反应体系和条件对1-苄基-3-吡咯烷酮不对称转化反应的影响 | 第38-41页 |
3.4.1 目的酶的确定 | 第38页 |
3.4.2 有机溶剂对W116A催化还原1-苄基-3-吡咯烷酮的影响 | 第38-39页 |
3.4.3 有机溶剂比例对W116A催化还原1-苄基-3-吡咯烷酮的影响 | 第39-40页 |
3.4.4 底物浓度对W116A催化还原1-苄基-3-吡咯烷酮的影响 | 第40-41页 |
主要结论与展望 | 第41-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |