| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第16-39页 |
| 1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 1.2 透明质酸的研究现状 | 第17-23页 |
| 1.2.1 透明质酸的生物合成 | 第18-20页 |
| 1.2.2 透明质酸酶 | 第20-21页 |
| 1.2.3 透明质酸受体 | 第21-23页 |
| 1.3 HA聚集对肿瘤发展的影响 | 第23-29页 |
| 1.3.1 HA的含量与肿瘤生长密切相关 | 第23-25页 |
| 1.3.2 HA对肿瘤细胞侵袭能力的影响 | 第25-28页 |
| 1.3.3 HA聚集促进上皮细胞-间充质转化(EMT) | 第28页 |
| 1.3.4 HA在肿瘤血管生成中的作用 | 第28-29页 |
| 1.4 HA与乳腺癌发展的关系 | 第29-32页 |
| 1.4.1 乳腺组织和乳腺癌亚型的构架 | 第29-30页 |
| 1.4.2 乳腺癌发展过程中HA的变化 | 第30-32页 |
| 1.5 靶向HA的癌症治疗策略 | 第32-33页 |
| 1.6 EHMW-HA对裸鼹鼠抗肿瘤能力的影响 | 第33-36页 |
| 1.6.1 EHMW-HA引起裸鼹鼠ECI的发生 | 第33-34页 |
| 1.6.2 裸鼹鼠的抗肿瘤机制 | 第34-36页 |
| 1.7 HA水凝胶模拟肿瘤微环境的工程化设计 | 第36-37页 |
| 1.8 本文的主要研究内容及技术路线 | 第37-39页 |
| 1.8.1 研究内容 | 第37-38页 |
| 1.8.2 技术路线 | 第38-39页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第39-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 2.1.1 实验动物和细胞系 | 第39页 |
| 2.1.2 实验试剂和仪器 | 第39-40页 |
| 2.1.3 主要分析软件 | 第40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-49页 |
| 2.2.1 实时定量PCR | 第40-41页 |
| 2.2.2 WesternBlot实验 | 第41页 |
| 2.2.3 慢病毒载体的构建 | 第41-43页 |
| 2.2.4 免疫荧光定位分析 | 第43页 |
| 2.2.5 水凝胶弹性模量检测 | 第43页 |
| 2.2.6 扫描电子显微镜的样品制备 | 第43-44页 |
| 2.2.7 溶胀率检测 | 第44页 |
| 2.2.8 细胞运动能力分析 | 第44页 |
| 2.2.9 细胞侵袭实验 | 第44页 |
| 2.2.10 细胞活力检测 | 第44-45页 |
| 2.2.11 EdU标记检测 | 第45页 |
| 2.2.12 细胞内ROS水平检测 | 第45页 |
| 2.2.13 Caspase-3活性检测 | 第45-46页 |
| 2.2.14 死活细胞染色 | 第46页 |
| 2.2.15 TUNEL表达检测 | 第46页 |
| 2.2.16 裸鼠成瘤 | 第46-47页 |
| 2.2.17 透明质酸分子量检测 | 第47页 |
| 2.2.18 组织内透明质酸含量检测 | 第47页 |
| 2.2.19 统计学分析 | 第47-49页 |
| 第3章 HA35和HA117对乳腺癌细胞侵袭行为的影响 | 第49-62页 |
| 3.1 引言 | 第49页 |
| 3.2 HA分子量和浓度对乳腺癌细胞侵袭行为的影响 | 第49-52页 |
| 3.3 HA/海藻酸钠基质材料的构建 | 第52-55页 |
| 3.3.1 HA/海藻酸钠基质力学性能检测 | 第53页 |
| 3.3.2 HA/海藻酸钠基质溶胀率检测 | 第53-54页 |
| 3.3.3 HA/海藻酸钠基质扫描电镜检测 | 第54-55页 |
| 3.4 HA/海藻酸钠基质影响乳腺癌细胞生长 | 第55-61页 |
| 3.4.1 HA/海藻酸钠基质影响4T1和SKBR3细胞生长 | 第55-59页 |
| 3.4.2 HA/海藻酸钠基质影响4T1和SKBR3细胞运动性 | 第59-61页 |
| 3.5 本章小结 | 第61-62页 |
| 第4章 HA35和HA117影响乳腺癌细胞侵袭行为的分子基础 | 第62-78页 |
| 4.1 引言 | 第62页 |
| 4.2 HA35和HA117影响2D/3D微环境中E-cadherin和Vimentin表达 | 第62-69页 |
| 4.2.1 HA35和HA117影响2D微环境中E-cadherin和Vimentin表达 | 第62-66页 |
| 4.2.2 HA35和HA117影响3D微环境中E-cadherin和Vimentin表达 | 第66-69页 |
| 4.3 HA35和HA117与CD44互作差异调控EMT进程 | 第69-73页 |
| 4.4 HA35和HA117调控乳腺癌细胞相关基因的表达分析 | 第73-77页 |
| 4.4.1 HA35和HA117差异调控HoxD10表达 | 第73-75页 |
| 4.4.2 HA35和HA117通过Twist-miR10b通路调控HoxD10表达 | 第75-77页 |
| 4.5 本章小结 | 第77-78页 |
| 第5章 裸鼹鼠EHMW-HA对乳腺癌细胞增殖行为的影响 | 第78-100页 |
| 5.1 引言 | 第78页 |
| 5.2 裸鼹鼠HAS2慢病毒载体的构建及表达 | 第78-80页 |
| 5.3 过表达裸鼹鼠HAS2的乳腺癌细胞分泌EHMW-HA | 第80-83页 |
| 5.3.1 4T1/BT549-nmrHAS2细胞分泌EHMW-HA的分子量鉴定 | 第80-81页 |
| 5.3.2 EHMW-HA的表征分析 | 第81-83页 |
| 5.4 EHMW-HA抑制4T1和BT549细胞增殖 | 第83-88页 |
| 5.4.1 4T1/BT549-nmrHAS2细胞的CCK-8检测 | 第85页 |
| 5.4.2 4T1/BT549-nmrHAS2细胞汇合度分析 | 第85-86页 |
| 5.4.3 4T1/BT549-nmrHAS2细胞EdU分析 | 第86-88页 |
| 5.4.4 4T1/BT549-nmrHAS2细胞PCNA表达分析 | 第88页 |
| 5.5 EHMW-HA/海藻酸钠基质水凝胶的构建 | 第88-91页 |
| 5.5.1 EHMW-HA/海藻酸钠基质力学性能检测 | 第89页 |
| 5.5.2 EHMW-HA/海藻酸钠基质溶胀率检测 | 第89-90页 |
| 5.5.3 EHMW-HA/海藻酸钠基质扫描电镜检测 | 第90-91页 |
| 5.6 EHMW-HA/海藻酸钠基质对乳腺癌细胞增殖的影响 | 第91-93页 |
| 5.7 EHMW-HA抑制4T1荷瘤鼠肿瘤生长 | 第93-99页 |
| 5.7.1 4T1荷瘤鼠的nmrHAS2过表达检测 | 第93-95页 |
| 5.7.2 4T1-nmrHAS2荷瘤鼠肿瘤形态学分析 | 第95-97页 |
| 5.7.3 4T1-nmrHAS2荷瘤鼠肿瘤增殖分析 | 第97-99页 |
| 5.8 本章小结 | 第99-100页 |
| 第6章 裸鼹鼠EHMW-HA对乳腺癌细胞凋亡行为的影响 | 第100-112页 |
| 6.1 引言 | 第100页 |
| 6.2 EHMW-HA影响4T1和BT549细胞凋亡 | 第100-104页 |
| 6.2.1 EHMW-HA影响4T1和BT549死活细胞染色分析 | 第100-102页 |
| 6.2.2 EHMW-HA影响4T1和BT549细胞Cytc释放 | 第102-103页 |
| 6.2.3 EHMW-HA影响4T1和BT549细胞的活性氧(ROS)产生 | 第103-104页 |
| 6.2.4 EHMW-HA影响4T1和BT549细胞Caspase3/7活性检测 | 第104页 |
| 6.3 EHMW-HA/海藻酸钠基质影响乳腺癌细胞凋亡 | 第104-105页 |
| 6.4 EHMW-HA影响4T1荷瘤鼠肿瘤细胞凋亡 | 第105-107页 |
| 6.5 EHMW-HA影响乳腺癌细胞凋亡行为的分子基础 | 第107-111页 |
| 6.6 本章小结 | 第111-112页 |
| 结论 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-131页 |
| 附录 | 第131-133页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文及其它成果 | 第133-135页 |
| 致谢 | 第135-136页 |
| 个人简历 | 第136页 |
