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红松抗氧化成分分析及对60Co射线诱导损伤防护作用

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第18-37页
    1.1 课题背景及研究的目的和意义第18-19页
    1.2 电离辐射损伤与自由基反应第19-22页
        1.2.1 辐射损伤的直接效应与旁效应第20-21页
        1.2.2 抗氧化与辐射损伤防护/修复作用概述第21页
        1.2.3 合成辐射防护剂应用的局限性第21-22页
    1.3 植物化学物质防辐射损伤研究第22-28页
        1.3.1 植物化学物质体外抗氧化作用第22页
        1.3.2 植物化学物质的免疫增强作用第22-23页
        1.3.3 植物化学物质减轻辐射造成的器官萎缩第23页
        1.3.4 植物化学物质调节抗氧化酶的活性与表达第23页
        1.3.5 植物化学物质调节氧化应激损伤标志物的含量第23页
        1.3.6 调节MAPK/ERK信号途径实现辐射防护/修复第23-24页
        1.3.7 植物化学物质通过调节MAPK/PI3/AKT途径实现辐射损伤修复第24-25页
        1.3.8 植物化学物质通过调节Nrf2/ARE信号途径实现体内抗氧化辐射防护/修复作用第25-26页
        1.3.9 植物化学物质通过多信号通路调节实现器官损伤修复第26-28页
    1.4 松科植物化学成分与生物学活性以及开发价值研究第28-35页
        1.4.1 松科松属类植物挥发性化学成分研究概况第29-32页
        1.4.2 松科多酚类化学成分研究现状第32-33页
        1.4.3 松科植物生物学活性与林产化工应用研究第33-35页
    1.5 本课题主要研究内容第35-37页
第2章 实验材料与研究方法第37-56页
    2.1 实验原料/材料与分析仪器设备第37-40页
        2.1.1 实验原料第37页
        2.1.2 实验动物第37页
        2.1.3 主要仪器设备第37-38页
        2.1.4 实验应用试剂第38-40页
    2.2 红松提取物的制备、分级第40-44页
        2.2.1 原料预处理第40页
        2.2.2 红松提取物的制备第40页
        2.2.3 红松粗提物的分级第40-42页
        2.2.4 红松提取物分级萃取物的柱色谱分段与分离第42-43页
        2.2.5 红松提取物DMEPKB组分分级产物的结晶产物核磁共振分析第43页
        2.2.6 红松提取物与分级组分的多酚含量的测定第43页
        2.2.7 红松提取物与分级组分的黄酮含量的测定第43-44页
        2.2.8 红松提取物与分级组分的原花青素含量的测定第44页
    2.3 石油醚组分分析(GC/MS)第44页
    2.4 液质联用分析(Q-TOF)第44-45页
    2.5 体外抗氧化活性测定第45-47页
        2.5.1 超氧自由基(O~(2-)·)清除能力测定第45页
        2.5.2 DPPH自由基清除能力测定第45页
        2.5.3 ABTS~+·清除能力测定第45-46页
        2.5.4 红细胞保护作用的测定第46页
        2.5.5 总还原能力测定第46页
        2.5.6 铜离子(Cu~(2+))-还原活性第46-47页
    2.6 细胞实验第47-50页
        2.6.1 大鼠脾脏原代淋巴细胞的制备第47页
        2.6.2 辐射模型的建立第47-48页
        2.6.3 刀豆蛋白A诱导的大鼠脾细胞增殖第48-49页
        2.6.4 单细胞凝胶电泳第49-50页
        2.6.5 最佳抗辐射组分稳定性实验第50页
    2.7 动物实验第50-55页
        2.7.1 ~(60) Co辐照损伤ICR小鼠模型第50-51页
        2.7.2 脏器指数测定第51页
        2.7.3 体重和存活率变化第51页
        2.7.4 外周血象和白细胞损伤分析第51-52页
        2.7.5 小鼠骨髓细胞微核实验第52页
        2.7.6 小鼠骨髓细胞染色体畸变实验第52-53页
        2.7.7 ICR小鼠碳廓清指数的计算第53-54页
        2.7.8 ICR小鼠脾/小肠损伤形态观察第54页
        2.7.9 ICR小鼠生化指标检测第54页
        2.7.10 小鼠免疫组化分析第54-55页
    2.8 统计分析第55-56页
第3章 红松不同提取物体外抗氧化/抗辐射活性比较第56-72页
    3.1 引言第56-57页
    3.2 红松提取物提取溶剂的选择第57-58页
    3.3 三种溶剂提取物体外抗氧化活性第58-64页
        3.3.1 三种溶剂提取物清除超氧自由基能力第58页
        3.3.2 三种不同溶剂提取物清除ABTS+·能力第58-59页
        3.3.3 三种不同溶剂提取物总还原力第59-60页
        3.3.4 三种不同溶剂提取物清除非生理自由基DPPH·能力第60-61页
        3.3.5 三种不同溶剂提取物对H_2O_2诱导红细胞损伤的保护作用第61-62页
        3.3.6 三种不同溶剂提取物的铜离子还原作用第62-63页
        3.3.7 多酚与黄酮含量的测定以及不同抗氧化评价体系的EC_(50)第63-64页
    3.4 三种不同溶剂提取物对脾细胞的毒性/增殖作用第64-65页
    3.5 三种不同溶剂的提取物对原代肝细胞辐射48小时后MDA含量的影响第65-67页
    3.6 三种不同溶剂的提取物对大鼠大脑原代细胞辐射后培养72小时后脂褐素含量的影响第67页
    3.7 95 EEP、40AEP以及芦丁对脾细胞的辐射防护比较第67-68页
    3.8 分级萃取物的制备第68-69页
    3.9 分级萃取物的多酚黄酮的含量的测定第69-70页
    3.10 本章小结第70-72页
第4章 功能示踪法筛选红松95%乙醇提取物组分第72-87页
    4.1 引言第72-73页
    4.2 分级萃取物的总还原力第73-74页
    4.3 分级萃取物的DPPH清除能力第74页
    4.4 分级萃取物的对脾细胞的增殖/毒性分析第74-75页
    4.5 95 EEP分级萃取物的对脾细胞的辐射防护作用第75-76页
    4.6 EAEPKB与NBEPKB对辐射引起脾细胞微核发生率的影响第76-78页
    4.7 正丁醇组分ODS反相柱甲醇洗脱物的抗氧化和抗辐射作用第78-86页
        4.7.1 正丁醇组分ODS反相柱甲醇洗脱物的DPPH自由基清除作用第78页
        4.7.2 NBEPKB分级萃取物的原花青素含量分析第78-79页
        4.7.3 NBEPKB分级萃取物的对脾细胞的辐射防护作用第79-80页
        4.7.4 NBEPKB对脾细胞的DNA损伤的保护作用第80-82页
        4.7.5 NBEPKB-50ME对脾细胞辐射后的MDA,SOD,CAT含量/活力的影响第82-84页
        4.7.6 NBEPKB-50ME对外周血中白细胞分型的影响第84-86页
    4.8 本章小结第86-87页
第5章 各组分分析、鉴定及原花青素组分稳定性研究第87-103页
    5.1 引言第87页
    5.2 石油醚组分的气质联用分析第87-89页
    5.3 二氯甲烷组分硅胶柱层析第89-90页
    5.4 二氯甲烷组分核磁共振解析第90-94页
    5.5 NBEPKB-50ME的液质联用分析第94-98页
    5.6 NBEPKB-50ME的稳定性研究第98-101页
        5.6.1 温度对NBEPKB-50ME中原花青素含量的影响第98页
        5.6.2 pH值对NBEPKB-50ME中原花青素含量的影响第98-99页
        5.6.3 光照对NBEPKB-50ME中原花青素含量的影响第99-100页
        5.6.4 金属离子对NBEPKB-50ME中原花青素含量的影响第100-101页
    5.7 本章小结第101-103页
第6章 红松原花青素组分对辐射诱导氧化应激的防护第103-134页
    6.1 引言第103-104页
    6.2 NBEPKB-50ME对辐照ICR小鼠存活率/体重的改变第104-105页
    6.3 NBEPKB-50ME对~(60)Co辐照ICR小鼠血象的改变第105-108页
    6.4 NBEPKB-50ME对辐照ICR小鼠脏器指数的改变第108-109页
    6.5 NBEPKB-50ME对碳廓清指数和脾淋巴细胞增殖的影响第109页
    6.6 NBEPKB-50ME对小肠形态学的影响第109-110页
    6.7 NBEPKB-50ME对辐射小鼠体内相关氧化酶活性影响第110-116页
        6.7.1 NBEPKB-50ME对SOD的影响第110-112页
        6.7.2 NBEPKB-50ME对CAT的影响第112-113页
        6.7.3 NBEPKB-50ME对GSH-PX的影响第113-114页
        6.7.4 NBEPKB-50ME对髓过氧物酶(MPO)的影响第114-116页
    6.8 NBEPKB-50ME对丙二醛(MDA)含量的影响第116-117页
    6.9 NBEPKB-50ME对乳酸脱氢酶(LDH)影响第117-119页
    6.10 NBEPKB-50ME对GSH含量的影响第119-120页
    6.11 NBEPKB-50ME对小鼠细胞DNA损伤的影响第120-124页
        6.11.1 NBEPKB-50ME对骨髓细胞微核率的影响第120-122页
        6.11.2 NBEPKB-50ME对小鼠骨髓细胞染色体畸变的影响第122-123页
        6.11.3 NBEPKB-50ME对小鼠脾细胞DNA损伤的影响第123-124页
    6.12 抗(促)氧化酶与脾细胞增殖/突变相关性分析第124-126页
    6.13 脾组织中ERK、p-ERK、AKT、P-AKT、Nrf2、HO-1的表达第126-132页
    6.14 本章小结第132-134页
结论第134-136页
创新点第136页
展望第136-137页
参考文献第137-167页
附录一第167-168页
附录二第168-178页
缩略语第178-179页
攻读博士学位期间发表的论文及其它成果第179-183页
致谢第183-184页
个人简历第184页

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