摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第1章 绪论 | 第10-25页 |
1.1 细菌胞外多糖 | 第10页 |
1.2 含葡萄糖醛酸的细菌胞外多糖及细菌葡萄糖醛酸转移酶 | 第10-23页 |
1.2.1 野油菜黄单胞菌葡萄糖醛酸转移酶 | 第11-13页 |
1.2.2 多杀性巴氏杆菌葡萄糖醛酸转移酶 | 第13-18页 |
1.2.3 大肠杆菌葡萄糖醛酸转移酶 | 第18-21页 |
1.2.4 少动鞘氨醇单胞菌葡萄糖醛酸转移酶 | 第21-22页 |
1.2.5 链球菌葡萄糖醛酸转移酶 | 第22-23页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
第2章 大肠杆菌K4菌株软骨素聚合酶K4CP研究 | 第25-50页 |
2.1 引言 | 第25-26页 |
2.2 实验材料 | 第26-29页 |
2.2.1 细菌菌株 | 第26页 |
2.2.2 工具酶及抗体 | 第26页 |
2.2.3 主要仪器设备 | 第26-27页 |
2.2.4 主要试剂及试剂盒 | 第27页 |
2.2.5 主要培养基 | 第27-28页 |
2.2.6 主要溶液 | 第28-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-36页 |
2.3.1 大肠杆菌K4菌株活化 | 第29-30页 |
2.3.2 大肠杆菌K4菌株基因组提取 | 第30页 |
2.3.3 目的基因KfoC的克隆 | 第30页 |
2.3.4 K4CP-pET-28a(+)表达载体构建 | 第30-31页 |
2.3.5 K4CP蛋白表达、纯化及鉴定 | 第31-32页 |
2.3.6 K4CP蛋白活性测定 | 第32-34页 |
2.3.7 K4CP蛋白底物特异性研究 | 第34-35页 |
2.3.8 体外酶法合成NH_2-7的研究 | 第35-36页 |
2.4 结果与讨论 | 第36-49页 |
2.4.1 K4CP-pET-28a(+)表达载体构建 | 第36-37页 |
2.4.2 K4CP蛋白表达与纯化 | 第37页 |
2.4.3 K4CP蛋白含量测定与鉴定 | 第37-38页 |
2.4.4 K4CP酶活性测定 | 第38-42页 |
2.4.5 K4CP酶底物特异性研究 | 第42-49页 |
2.4.6 体外酶法合成NH_2-7的研究 | 第49页 |
2.5 小结 | 第49-50页 |
第3章 大肠杆菌K4菌株软骨素聚合酶K4CP△57研究 | 第50-61页 |
3.1 引言 | 第50页 |
3.2 实验材料 | 第50-53页 |
3.2.1 细菌菌株 | 第50页 |
3.2.2 工具酶及抗体 | 第50页 |
3.2.3 主要仪器设备 | 第50-51页 |
3.2.4 主要试剂及试剂盒 | 第51页 |
3.2.5 主要培养基 | 第51-52页 |
3.2.6 主要溶液 | 第52-53页 |
3.3 实验方法 | 第53-54页 |
3.4 结果与讨论 | 第54-60页 |
3.5 小结 | 第60-61页 |
总结和展望 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第76-77页 |
附录 | 第77-80页 |
附1:主要引物序列表 | 第77页 |
附2:缩略词表 | 第77-78页 |
附3:NH_2-7的NMR谱图 | 第78-80页 |
学位论文评阅及辩情况表 | 第80页 |