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大肠杆菌K4菌株软骨素聚合酶的表达及应用研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第1章 绪论第10-25页
    1.1 细菌胞外多糖第10页
    1.2 含葡萄糖醛酸的细菌胞外多糖及细菌葡萄糖醛酸转移酶第10-23页
        1.2.1 野油菜黄单胞菌葡萄糖醛酸转移酶第11-13页
        1.2.2 多杀性巴氏杆菌葡萄糖醛酸转移酶第13-18页
        1.2.3 大肠杆菌葡萄糖醛酸转移酶第18-21页
        1.2.4 少动鞘氨醇单胞菌葡萄糖醛酸转移酶第21-22页
        1.2.5 链球菌葡萄糖醛酸转移酶第22-23页
    1.3 本研究的目的和意义第23-25页
第2章 大肠杆菌K4菌株软骨素聚合酶K4CP研究第25-50页
    2.1 引言第25-26页
    2.2 实验材料第26-29页
        2.2.1 细菌菌株第26页
        2.2.2 工具酶及抗体第26页
        2.2.3 主要仪器设备第26-27页
        2.2.4 主要试剂及试剂盒第27页
        2.2.5 主要培养基第27-28页
        2.2.6 主要溶液第28-29页
    2.3 实验方法第29-36页
        2.3.1 大肠杆菌K4菌株活化第29-30页
        2.3.2 大肠杆菌K4菌株基因组提取第30页
        2.3.3 目的基因KfoC的克隆第30页
        2.3.4 K4CP-pET-28a(+)表达载体构建第30-31页
        2.3.5 K4CP蛋白表达、纯化及鉴定第31-32页
        2.3.6 K4CP蛋白活性测定第32-34页
        2.3.7 K4CP蛋白底物特异性研究第34-35页
        2.3.8 体外酶法合成NH_2-7的研究第35-36页
    2.4 结果与讨论第36-49页
        2.4.1 K4CP-pET-28a(+)表达载体构建第36-37页
        2.4.2 K4CP蛋白表达与纯化第37页
        2.4.3 K4CP蛋白含量测定与鉴定第37-38页
        2.4.4 K4CP酶活性测定第38-42页
        2.4.5 K4CP酶底物特异性研究第42-49页
        2.4.6 体外酶法合成NH_2-7的研究第49页
    2.5 小结第49-50页
第3章 大肠杆菌K4菌株软骨素聚合酶K4CP△57研究第50-61页
    3.1 引言第50页
    3.2 实验材料第50-53页
        3.2.1 细菌菌株第50页
        3.2.2 工具酶及抗体第50页
        3.2.3 主要仪器设备第50-51页
        3.2.4 主要试剂及试剂盒第51页
        3.2.5 主要培养基第51-52页
        3.2.6 主要溶液第52-53页
    3.3 实验方法第53-54页
    3.4 结果与讨论第54-60页
    3.5 小结第60-61页
总结和展望第61-63页
参考文献第63-75页
致谢第75-76页
攻读硕士学位期间发表的论文第76-77页
附录第77-80页
    附1:主要引物序列表第77页
    附2:缩略词表第77-78页
    附3:NH_2-7的NMR谱图第78-80页
学位论文评阅及辩情况表第80页

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