| 摘要 | 第9-14页 |
| ABSTRACT | 第14-19页 |
| 第1章 文献综述 | 第20-30页 |
| 1.1 持久性有机污染物的概况 | 第20-21页 |
| 1.2 TCBQ的来源 | 第21-22页 |
| 1.3 TCBQ的性质及其毒性作用 | 第22页 |
| 1.4 内质网应激 | 第22-23页 |
| 1.5 细胞凋亡信号通路 | 第23-24页 |
| 1.6 NRF2信号通路 | 第24-25页 |
| 1.7 铁死亡信号通路 | 第25-26页 |
| 1.8 立题依据和研究目的 | 第26-27页 |
| 1.9 研究内容 | 第27-30页 |
| 第2章 TCBQ诱导PC12细胞内质网应激的机制研究 | 第30-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-32页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第31页 |
| 2.1.3 常用试剂制备 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-35页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第32-33页 |
| 2.2.2 全蛋白提取物的制备 | 第33页 |
| 2.2.3 Western blot实验 | 第33-34页 |
| 2.2.4 透射电镜观察细胞超微结构 | 第34页 |
| 2.2.5 RT-qPCR和RT-PCR分析 | 第34-35页 |
| 2.2.6 细胞内钙离子浓度检测 | 第35页 |
| 2.2.7 数据分析 | 第35页 |
| 2.3 实验结果 | 第35-41页 |
| 2.3.1 TCBQ对PC12细胞内质网应激的影响 | 第35-36页 |
| 2.3.2 TCBQ对PERK/eIF2α信号通路的影响 | 第36-37页 |
| 2.3.3 TCBQ对ATF4-ATF3-CHOP信号通路的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.4 TCBQ对IRE1α/XBP-1信号通路的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.5 TCBQ对ATF6活化的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.6 TCBQ对PC12细胞钙离子水平和Caspase12活化的影响 | 第40-41页 |
| 2.4 小结 | 第41-42页 |
| 2.5 讨论 | 第42-44页 |
| 第3章 TCBQ通过DR5信号通路诱导细胞凋亡的机制研究 | 第44-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第44-45页 |
| 3.1.2 主要仪器与设备 | 第45页 |
| 3.1.3 常用试剂制备 | 第45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-47页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第45页 |
| 3.2.2 DAPI和Hoechst 33258染色 | 第45页 |
| 3.2.3 透射电镜观察细胞超微结构 | 第45页 |
| 3.2.4 AnnexinV-FITC/PI法检测凋亡 | 第45页 |
| 3.2.5 Western blot实验 | 第45页 |
| 3.2.6 Small RNA(siRNA)转染 | 第45-46页 |
| 3.2.7 免疫荧光双染实验 | 第46页 |
| 3.2.8 细胞存活率实验 | 第46页 |
| 3.2.9 细胞内ROS检测 | 第46页 |
| 3.2.10 RT-qPCR分析 | 第46页 |
| 3.2.11 免疫共沉淀实验 | 第46-47页 |
| 3.2.12 数据分析 | 第47页 |
| 3.3 实验结果 | 第47-54页 |
| 3.3.1 TCBQ诱导PC12细胞凋亡 | 第47-48页 |
| 3.3.2 TCBQ上调DR5的表达并增强DISC的形成 | 第48-50页 |
| 3.3.3 DR5参与TCBQ诱导的细胞凋亡 | 第50页 |
| 3.3.4 TCBQ调控DR5的表达需要转录激活 | 第50-51页 |
| 3.3.5 TCBQ通过ATF4-ATF3-CHOP信号轴调控DR5的表达 | 第51-53页 |
| 3.3.6 TCBQ诱导的凋亡和DR5上调与活性氧有关 | 第53-54页 |
| 3.4 小结 | 第54-55页 |
| 3.5 讨论 | 第55-56页 |
| 第4章 TCBQ通过PDI的异位诱导细胞凋亡的机制研究 | 第56-70页 |
| 4.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第56-57页 |
| 4.1.2 主要仪器与设备 | 第57页 |
| 4.1.3 常用试剂制备 | 第57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-60页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第57-58页 |
| 4.2.2 乳酸脱氢酶(LDH)活性的检测 | 第58页 |
| 4.2.3 生物素转化法检测PDI-SNO的表达 | 第58页 |
| 4.2.4 细胞亚组份分离 | 第58页 |
| 4.2.5 Western blot实验 | 第58-59页 |
| 4.2.6 Small RNA(siRNA)转染 | 第59页 |
| 4.2.7 免疫荧光双染实验 | 第59页 |
| 4.2.8 细胞存活率实验 | 第59页 |
| 4.2.9 线粒体膜电位(MMP)检测 | 第59页 |
| 4.2.10 线粒体膜上Bak和Bax寡聚化的检测 | 第59-60页 |
| 4.2.11 TUNEL法检测细胞凋亡 | 第60页 |
| 4.2.12 数据分析 | 第60页 |
| 4.3 实验结果 | 第60-67页 |
| 4.3.1 PDIA1/PDIA3对TCBQ神经毒性的影响 | 第60-61页 |
| 4.3.2 TCBQ对PDIA1/PDIA3蛋白表达和S-亚硝基化(SNO)的影响 | 第61-63页 |
| 4.3.3 TCBQ对PDIA1/PDIA3蛋白亚细胞易位的影响 | 第63-64页 |
| 4.3.4 PDIA1/PDIA3对TCBQ诱导线粒体膜通透性的影响 | 第64-65页 |
| 4.3.5 PDIA1/PDIA3对TCBQ诱导线粒体膜上Bak寡聚化的影响 | 第65-66页 |
| 4.3.6 TCBQ诱导的细胞凋亡和PDI蛋白异位与活性氧有关 | 第66-67页 |
| 4.4 小结 | 第67-68页 |
| 4.5 讨论 | 第68-70页 |
| 第5章 NRF2参与PC12细胞抵抗TCBQ诱导内质网应激的机制研究 | 第70-86页 |
| 5.1 实验材料 | 第71页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第71页 |
| 5.1.2 主要仪器与设备 | 第71页 |
| 5.1.3 常用试剂制备 | 第71页 |
| 5.2 实验方法 | 第71-74页 |
| 5.2.1 细胞培养 | 第71页 |
| 5.2.2 乳酸脱氢酶(LDH)活性的检测 | 第71页 |
| 5.2.3 核质蛋白提取和Western blot实验 | 第71-72页 |
| 5.2.4 细胞亚组份分离 | 第72页 |
| 5.2.5 RT-qPCR分析 | 第72页 |
| 5.2.6 Small RNA(siRNA)转染 | 第72页 |
| 5.2.7 免疫荧光实验 | 第72-73页 |
| 5.2.8 细胞存活率实验 | 第73页 |
| 5.2.9 Annexin V-FITC/PI法检测凋亡 | 第73页 |
| 5.2.10 谷胱甘肽(GSH)含量的检测 | 第73页 |
| 5.2.11 荧光标记法检测蛋白巯基(protein-SH) | 第73页 |
| 5.2.12 数据分析 | 第73-74页 |
| 5.3 实验结果 | 第74-82页 |
| 5.3.1 TCBQ诱导PC12细胞中Nrf2的活化 | 第74-75页 |
| 5.3.2 Nrf2在TCBQ诱导细胞毒性中的作用 | 第75-76页 |
| 5.3.3 Nrf2-GSH降低PC12细胞对TCBQ毒性的敏感性 | 第76-77页 |
| 5.3.4 Nrf2参与TCBQ对system x_c~-表达的调控 | 第77-78页 |
| 5.3.5 Nrf2参与TCBQ对GCL表达的调控 | 第78-79页 |
| 5.3.6 Nrf2-GSH降低TCBQ对蛋白质巯基的损伤 | 第79-80页 |
| 5.3.7 Nrf2调控内质网中蛋白巯基的稳态,从而降低内质网应激的程度 | 第80-82页 |
| 5.4 小结 | 第82-83页 |
| 5.5 讨论 | 第83-86页 |
| 第6章 NRF2参与PC12细胞抵抗TCBQ诱导铁死亡的机制研究 | 第86-98页 |
| 6.1 实验材料 | 第86-87页 |
| 6.1.1 主要试剂 | 第86-87页 |
| 6.1.2 主要仪器与设备 | 第87页 |
| 6.1.3 常用试剂制备 | 第87页 |
| 6.2 实验方法 | 第87-89页 |
| 6.2.1 细胞培养 | 第87页 |
| 6.2.2 细胞存活率实验 | 第87页 |
| 6.2.3 透射电镜观察细胞超微结构 | 第87页 |
| 6.2.4 Western blot实验 | 第87页 |
| 6.2.5 Small RNA(siRNA)转染 | 第87页 |
| 6.2.6 RT-qPCR分析 | 第87-88页 |
| 6.2.7 细胞内ROS检测 | 第88页 |
| 6.2.8 游离铁浓度的检测 | 第88页 |
| 6.2.9 谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性的检测 | 第88页 |
| 6.2.10 丙二醛(MDA)的检测 | 第88-89页 |
| 6.2.11 数据分析 | 第89页 |
| 6.3 实验结果 | 第89-95页 |
| 6.3.1 铁死亡的特异性诱导剂可以导致PC12细胞发生铁死亡 | 第89-90页 |
| 6.3.2 铁死亡参与TCBQ诱导的神经毒性 | 第90页 |
| 6.3.3 TCBQ诱导的铁死亡不依赖于铁自噬,p53和NOX2信号通路 | 第90-91页 |
| 6.3.4 PKCα和VDAC2/3信号通路参与TCBQ对铁死亡的调控 | 第91-92页 |
| 6.3.5 Nrf2参与TCBQ对细胞内游离铁离子的调控 | 第92-93页 |
| 6.3.6 Nrf2-GSH参与TCBQ对脂质过氧化物的调控 | 第93-95页 |
| 6.4 小结 | 第95-96页 |
| 6.5 讨论 | 第96-98页 |
| 全文总结与展望 | 第98-100页 |
| 创新点与意义 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-118页 |
| 附录 ：中英文缩略词对照表 | 第118-120页 |
| 致谢 | 第120-122页 |
| 博士期间科研成果 | 第122页 |
