| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 引言 | 第12-19页 |
| 0.1 MGP是细胞外基质钙化的决定蛋白 | 第12-13页 |
| 0.2 MGP基因 | 第13页 |
| 0.3 肾结石 | 第13-16页 |
| 0.4 基因多态性 | 第16-17页 |
| 0.5 MGP与肾结石 | 第17-18页 |
| 0.6 研究意义 | 第18-19页 |
| 第1章 血液样本的收集及全基因组DNA的提取 | 第19-25页 |
| 1.1 实验目的 | 第19页 |
| 1.2 研究对象 | 第19-20页 |
| 1.3 实验材料 | 第20-21页 |
| 1.4 试剂配制 | 第21-22页 |
| 1.4.1 PCI的配制(2L) | 第21页 |
| 1.4.2 50X TAE Buffer( pH=8.5)的配制 | 第21-22页 |
| 1.4.3 溴乙锭(10mg/ml)的配制 | 第22页 |
| 1.5 实验方法 | 第22-23页 |
| 1.5.1 血液样本的管理、保存及使用 | 第22页 |
| 1.5.2 在全血中提取人全基因组DNA | 第22-23页 |
| 1.5.3 琼脂糖凝胶制备 | 第23页 |
| 1.5.4 提取的基因组DNA进行琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
| 1.6 实验结果与讨论 | 第23-24页 |
| 1.6.1 人全基因组DNA的获得 | 第23-24页 |
| 1.7 结论 | 第24-25页 |
| 第2章 Long-PCR产物的扩增及位点筛选 | 第25-35页 |
| 2.1 实验目的 | 第25页 |
| 2.2 实验设计 | 第25页 |
| 2.3 实验材料 | 第25-27页 |
| 2.4 试剂配制 | 第27页 |
| 2.5 实验方法 | 第27-30页 |
| 2.5.1 MGP引物的设计与合成 | 第27页 |
| 2.5.2 通过Long-PCR获得MGP基因 | 第27-28页 |
| 2.5.3 PCR产物纯化 | 第28-29页 |
| 2.5.4 基因测序 | 第29-30页 |
| 2.5.5 连锁分析 | 第30页 |
| 2.6 实验结果 | 第30-33页 |
| 2.6.1 通过Long-PCR获得MGP基因序列 | 第30-31页 |
| 2.6.2 MGP基因测序结果分析 | 第31-32页 |
| 2.6.3 对测序结果进行连锁不平衡与相关分析 | 第32-33页 |
| 2.7 本章小结与讨论 | 第33-35页 |
| 第3章 等位基因特异性PCR基因定型及结果分析 | 第35-44页 |
| 3.1 实验目的 | 第35页 |
| 3.2 实验设计 | 第35页 |
| 3.3 实验材料 | 第35-37页 |
| 3.4 实验方法 | 第37-39页 |
| 3.4.1 等位基因特异性PCR基因定型 | 第37-39页 |
| 3.4.2 统计方法 | 第39页 |
| 3.5 实验结果 | 第39-42页 |
| 3.5.1 等位基因特异性PCR方法验证 | 第39-40页 |
| 3.5.2 通过等位基因特异性PCR对所有样本进行基因定型 | 第40-42页 |
| 3.6 本章小结与讨论 | 第42-44页 |
| 第4章 讨论 | 第44-47页 |
| 4.1 中国人MGP基因的多态性特点 | 第44-45页 |
| 4.2 相关分析 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 攻读学位期间发表学术论文及参加科研情况 | 第52页 |
