中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
缩略词表 | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-24页 |
1.1 水稻黑条矮缩病毒研究概述 | 第10-15页 |
1.1.1 水稻黑条矮缩病发生、传播及病理特征 | 第10-13页 |
1.1.2 RBSDV病毒粒子特点及复制包装 | 第13-14页 |
1.1.3 RBSDV基因组结构及编码产物 | 第14-15页 |
1.2 RBSDV P7-2的相关研究概况 | 第15-19页 |
1.3 病毒干扰植物赤霉素代谢路径的研究 | 第19-22页 |
1.4 本论文研究的目的与意义 | 第22-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-37页 |
2.1 材料 | 第24-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 抗血清 | 第24页 |
2.1.3 菌种 | 第24页 |
2.1.4 载体及克隆 | 第24页 |
2.1.5 酶及化学试剂 | 第24-25页 |
2.1.6 引物合成和DNA测序 | 第25页 |
2.2 溶液及试剂配制 | 第25-29页 |
2.2.1 常用试剂及培养基的配制 | 第25-26页 |
2.2.2 实验中用到的试剂 | 第26-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-37页 |
2.3.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
2.3.2 重组克隆的构建 | 第29-30页 |
2.3.3 农杆菌注射接种 | 第30-31页 |
2.3.4 Western-blot检测 | 第31-32页 |
2.3.5 植物组织总RNA的提取 | 第32页 |
2.3.6 反转录反应 | 第32页 |
2.3.7 蛋白的原核表达与纯化 | 第32-33页 |
2.3.8 免疫共沉淀实验(co-immunoprecipitation,Co-IP) | 第33页 |
2.3.9 酵母双杂交cDNA文库筛选 | 第33-34页 |
2.3.10 酵母双杂交实验 | 第34-35页 |
2.3.11 酵母三杂交实验 | 第35-37页 |
2.3.11.1 酵母三杂交技术的简介 | 第35-36页 |
2.3.11.2 酵母三杂交质粒的构建 | 第36-37页 |
第三章 RBSDV P7-2与水稻SKP家族的互作 | 第37-45页 |
3.1 水稻OSKs基因家族的克隆 | 第37-40页 |
3.2 P7-2能够与OSK1、OSK5、OSK20体内互作 | 第40-42页 |
3.2.1 载体的构建及农杆菌转化 | 第40-41页 |
3.2.2 农杆菌注射 | 第41页 |
3.2.3 Co-IP实验及Western-blot检测 | 第41-42页 |
3.3 P7-2-OSK1-OsCUL1能够形成复合体 | 第42-43页 |
3.4 小结与讨论 | 第43-45页 |
第四章 赤霉素通路蛋白GID2的互作研究 | 第45-52页 |
4.1 克隆赤霉素响应途径中的基因 | 第45页 |
4.2 证明P7-2与OsGID2和ZeaGID2存在互作 | 第45-47页 |
4.2.1 载体构建 | 第45-46页 |
4.2.2 酵母双杂交实验验证P7-2与GA响应途径蛋白的互作 | 第46-47页 |
4.3 验证P7-2与OsGID2和ZeaGID2的体内互作 | 第47-48页 |
4.4 OsGID2和OSK5、OSK20间的互作研究 | 第48-49页 |
4.5 小结与讨论 | 第49-52页 |
第五章 P7-2及植物相关蛋白基因的功能探索 | 第52-61页 |
5.1 P7-2及寄主互作蛋白的原核表达及抗血清制备 | 第52-55页 |
5.1.1 P7-2的原核表达 | 第52-53页 |
5.1.2 相关寄主蛋白的原核表达 | 第53-55页 |
5.2 病健玉米中ZeaGID2蛋白的表达差异分析 | 第55-56页 |
5.3 SKP1沉默发育表型及与P0蛋白互作的功能分析 | 第56-57页 |
5.3.1 RNAi SKP1基因的本生烟材料的症状观察 | 第56页 |
5.3.2 筛选OSK家族成员与四种马铃薯卷叶病毒属P0的互作关系 | 第56-57页 |
5.4 RBSDV P7-2基因沉默抑制子和对水稻发育影响的功能分析 | 第57-60页 |
5.4.1 RBSDV P7-2基因沉默抑制子功能鉴定 | 第57-58页 |
5.4.2 过表达P7-2的转基因水稻显示其影响水稻发育 | 第58-60页 |
5.5 小结与讨论 | 第60-61页 |
第六章 结论与展望 | 第61-62页 |
1 结论 | 第61页 |
2 展望 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
附录: 28个OSK的DNA序列信息 | 第72-93页 |
个人简历 | 第93-94页 |